IgA腎病患者IgA1分子糖基化異常與Th17細(xì)胞的相關(guān)性分析

侯 靜， 藺 艷， 劉 勇， 王玉潔

(1.西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院， 四川 瀘州 646000 2.西南醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所， 四川 瀘州 646000)

經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查[1]發(fā)現(xiàn)，IgA腎病約占原發(fā)性腎小球疾病的20.0%～50.0%，其中約有三分之一的患者在疾病診斷后的25年內(nèi)可發(fā)展到終末期腎衰竭(end-stage renal disease,ESRD)。盡管患者接受腎移植等方法治療，仍有50%以上患者在術(shù)后2年出現(xiàn)IgA腎病復(fù)發(fā)現(xiàn)象。有研究[2]指出，IgA腎病的發(fā)生與IgA1分子糖基化異常有關(guān)。也有研究[3]表示，Th17細(xì)胞失衡是導(dǎo)致IgA腎病發(fā)生的關(guān)鍵。但臨床上關(guān)于Th17細(xì)胞與Gd-IgA1在IgA腎病作用及機(jī)制的研究報(bào)道較少，尚未闡明。故本次選取50例IgA腎病患者與50例健康體檢人員的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，旨在探討IgA腎病患者IgA1分子糖基化異常與Th17細(xì)胞的相關(guān)性分析。現(xiàn)將其報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1臨床資料:回顧性分析2018年2月至2020年5月診治的50例IgA腎病患者與50例健康體檢人員的臨床資料。診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合“原發(fā)性IgA腎病診治循證指南(2016)”[4]中關(guān)于IgA腎病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)腎臟病理活檢以系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)增生為主，伴有IgA為主的免疫復(fù)合物沉積，且伴有血尿、蛋白尿、腎功損害等表現(xiàn)。IgA腎病組納入標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料完整，如血清指標(biāo)等；②納入實(shí)驗(yàn)前未經(jīng)糖皮質(zhì)激素或其他免疫抑制劑治療；③無(wú)惡性腫瘤等疾病。健康對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：①認(rèn)知功能正常；②身體健康；③生化指標(biāo)資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有嚴(yán)重心功能不全；②妊娠、哺乳階段；③凝血功能異常。

1.2方 法

1.2.1調(diào)查內(nèi)容及其方法：設(shè)計(jì)統(tǒng)一的病例調(diào)查表，由專(zhuān)業(yè)醫(yī)師收集IgA腎病患者與健康體檢人員的臨床資料，包括Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞、Th17/Treg、異常糖基化IgA1(Gd-IgA1)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(Transforming Growth Factor-β,TGF-β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白介素-17(Interleukin-17,IL-17)、白介素-21(Interleukin-21,IL-21)、白介素-23(Interleukin-23,IL-23)、血肌酐、白蛋白及尿蛋白定量等。

1.2.2血清指標(biāo)檢測(cè)方法：于清晨狀態(tài)下采集受檢人員外周靜脈血5mL，3000r/min離心15min，提取血清待檢。其中，Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，計(jì)算Th17/Treg比值，試劑盒由美國(guó)eBioscience公司提供；TGF-β、IL-6、IL-17、IL-21、IL-23采用ELISA法檢測(cè)，試劑盒由杭州聯(lián)科生物科技有限公司提供；Gd-IgA1采用人半乳糖缺乏IgA1酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒檢測(cè)；血肌酐采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)，白蛋白采用溴甲酚綠法檢測(cè)，試劑盒均由中生北控生物科技股份有限公司提供。

1.2.3尿液指標(biāo)檢測(cè)方法：留取受檢人員24h尿液，采用比色法檢測(cè)尿蛋白。

2 結(jié) 果

2.1一般資料比較:兩組在性別、年齡、BMI等一般資料比較中，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 兩組一般資料比較

2.2Gd-IgA1及Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞比較:IgA腎病組的Th17細(xì)胞、Th17/Treg、Gd-IgA1均高于健康對(duì)照組，而Treg細(xì)胞低于健康對(duì)照組(P<0.05)。詳見(jiàn)表2。

表2 Th17細(xì)胞 Treg細(xì)胞及Gd-IgA1比較

2.3Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子比較:IgA腎病組的TGF-β低于健康對(duì)照組，而IL-6、IL-17、IL-21、IL-23高于健康對(duì)照組(P<0.05)。詳見(jiàn)表3。

表3 兩組TGF-β IL-6 IL-17 IL-21 IL-23比較

2.4血肌酐、血清白蛋白及尿蛋白定量比較:IgA腎病組的血肌酐、尿蛋白定量高于健康對(duì)照組，而白蛋白低于健康對(duì)照組(P<0.05)。詳見(jiàn)表4。

表4 兩組血肌酐血清白蛋白及尿蛋白定量比較

2.5相關(guān)性分析

2.5.1Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞與Gd-IgA1的相關(guān)性分析Pearson相關(guān)性顯示，Gd-IgA1與Th17細(xì)胞、Th17/Treg呈正相關(guān)(r=0.737、0.810，P<0.05)，與Treg細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)(r=-0.487，P<0.05)。詳見(jiàn)表5。

表5 分析Gd-IgA1與Th17細(xì)胞 Treg細(xì)胞的相關(guān)性

2.5.2細(xì)胞因子與Gd-IgA1的相關(guān)性分析Pearson相關(guān)性顯示，Gd-IgA1與TGF-β呈負(fù)相關(guān)(r=-0.260，P<0.05)，與IL-6、IL-17、IL-21、IL-23呈正相關(guān)(r=0.796/0.776/0.714/0.819，P<0.05)。詳見(jiàn)表6。

表6 分析細(xì)胞因子與Gd-IgA1的相關(guān)性

3 討 論

目前臨床上對(duì)于IgA腎病的發(fā)病機(jī)制尚未闡述，因此臨床上缺乏特異有效的治療措施。近年來(lái)，有眾多研究[4]發(fā)現(xiàn)，IgA1分子糖基化異常在IgA腎病的發(fā)生、發(fā)展中具有至關(guān)重要的作用，因其能刺激機(jī)體產(chǎn)生抗聚糖IgG自身抗體，再通過(guò)與抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，通過(guò)逃避血液循環(huán)中正常的清除機(jī)制，使得IgA沉淀于腎小球系膜區(qū)，繼而誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)及促使系膜細(xì)胞增殖，造成腎小球損傷。其中，IgA1分子糖基化異常與遺傳因素、環(huán)境因素，以及參與糖基化過(guò)程的相關(guān)酶類(lèi)異常表達(dá)有關(guān)[5]。且有大量研究數(shù)據(jù)[6]表明，輔助性T細(xì)胞(Th細(xì)胞)免疫失衡在調(diào)控IgA1分子產(chǎn)生和糖基化過(guò)程中起著重要作用。當(dāng)Th細(xì)胞免疫失衡，可釋放大量的細(xì)胞因子，如IL-6、IL-17、IL-21、IL-23等，通過(guò)抑制參與糖基化過(guò)程的β-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶(β3GalT)及其分子伴侶Cosmc的表達(dá)，促進(jìn)IgA1分子的糖基化異常。研究結(jié)果顯示，IgA腎病組的Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞、Th17/Treg表達(dá)均高于健康對(duì)照組，提示Th細(xì)胞參考了IgA腎病的發(fā)生發(fā)展。

Th17細(xì)胞是新近發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)Th細(xì)胞亞群，與Th1、Th2細(xì)胞不同，主要作用在于通過(guò)產(chǎn)生IL-17、IL-17F、IL-22等，誘導(dǎo)組織細(xì)胞產(chǎn)生促炎癥細(xì)胞因子、趨化因子及金屬蛋白酶類(lèi)，清除Th1和Th2細(xì)胞無(wú)法清除的細(xì)胞外病原體[7]。研究結(jié)果顯示，Th17細(xì)胞與IL-6、IL-17、IL-21、IL-23呈正相關(guān)，說(shuō)明細(xì)胞因子會(huì)隨著Th17細(xì)胞的失衡而大量分泌。其中，IL-17是Th17細(xì)胞的標(biāo)志性細(xì)胞因子，因Th17細(xì)胞介導(dǎo)產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)是通過(guò)IL-17細(xì)胞因子所發(fā)揮，但當(dāng)Th17細(xì)胞失衡，則會(huì)促使IL-17高表達(dá)，繼而促進(jìn)IgA抗體的產(chǎn)生，且誘導(dǎo)Th2型細(xì)胞反應(yīng)，故臨床認(rèn)為T(mén)h17細(xì)胞可能會(huì)在一定程度上影響Th2細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)[8]。而Th2型細(xì)胞，目前已證實(shí)其參與調(diào)控IgA腎病中的IgA1分子糖基化異常。基于上述結(jié)果，認(rèn)為T(mén)h17細(xì)胞與Th2細(xì)胞能相互作用，故推測(cè)Th17細(xì)胞也會(huì)影響IgA1分子產(chǎn)生和糖基化異常。在Pearson相關(guān)性中，Gd-IgA1與Th17細(xì)胞呈正相關(guān)，說(shuō)明兩者相互影響，從而促使IgA腎病的發(fā)生。另外，有研究[9]表示，炎癥狀態(tài)下細(xì)胞因子會(huì)在一定程度上影響IgA1分子糖基化異常。雖然目前尚無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，炎癥介質(zhì)是否參與調(diào)控IgA1分子產(chǎn)生和糖基化異常，但在本文相關(guān)性分析中，發(fā)現(xiàn)Gd-IgA1與TGF-β呈負(fù)相關(guān)，與IL-6、IL-17、IL-21、IL-23呈正相關(guān)，故推測(cè)炎性細(xì)胞因子可能參與了IgA1分子糖基化異常，但因本研究樣本較小，所收治的均為本院IgA腎病患者，仍需擴(kuò)大樣本，進(jìn)一步研究及證實(shí)。

綜上所述，Th17細(xì)胞與Gd-IgA1呈正相關(guān)，即參與了IgA1分子糖基化異常的過(guò)程，可通過(guò)評(píng)估Th17細(xì)胞表達(dá)量，為臨床診治IgA腎病提供客觀依據(jù)。