SGK3在非小細胞肺癌組織中的表達及意義

鄭亞洲，楊澤宇，劉夢夢，李苗，黃禮年

（蚌埠醫學院第一附屬醫院呼吸與危重癥醫學科，安徽 蚌埠 233004）

肺癌是臨床最常見的腫瘤之一，也是惡性腫瘤患者死亡的主要原因之一。近年來，肺癌的發病率及死亡率逐年上升，肺癌包括小細胞肺癌及非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC），其中NSCLC 約占肺癌的80%以上［1-2］，NSCLC 包括鱗癌、腺癌、大細胞癌等。血清和糖皮質激素調節蛋白激酶3（serum and glucocorticoid-regulated protein kinase 3，SGK3）屬于SGK家族，是一種普遍表達的絲氨酸/蘇氨酸激酶，研究表明SGK3在功能上與AKT 平行，通過調節細胞增殖、生長、存活、遷移參與腫瘤的惡性轉化［3］。研究表明，SGK3 在前列腺癌、乳腺癌等腫瘤組織中表達［4-6］，但是在肺癌組織中的表達的文獻較少。本研究回顧性分析2014年1月至2018年12月于我院經病理組織學確診的134 例NSCLC 患者的臨床資料，分析SGK3在癌組織中的表達及與臨床病理特征的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2014年1月至2018年12 月于我院經病理組織學確診的134 例NSCLC 患者的臨床資料，其中男90例，女44例；年齡36～85 歲，平均（61.68±9.55）歲；鱗癌51 例，腺癌83 例。記錄134 例NSCLC 患者的性別、年齡等臨床資料，病理類型、分化程度、腫瘤直徑、TNM分期等病理資料。本研究經醫院倫理委員會批準，并經患者知情同意。

1.2 納入與排除標準 納入標準：患者均經術后病理組織學確診，術前未接受放療或化療或靶向藥物治療。排除標準：排除合并肺部其他感染性疾病、其他惡性腫瘤、嚴重肝腎疾病、自身免疫系統疾病及代謝性疾病者。

1.3 試劑來源 兔抗人SGK3 抗體（ab218251）購于美國Abcam公司，通用免疫組織化學SP試劑盒購于南京沐寶生物技術有限公司。

1.4 方法 采用免疫組織化學法檢測癌組織及癌旁組織（距離癌組織＞5 cm的組織）中SGK3的表達情況。常規石蠟包埋組織切片，玻片烘干，然后在二甲苯中脫蠟，再通過一系列濃度梯度乙醇脫水。免疫組織化學染色的操作步驟按產品說明書進行。SGK3（1∶100）陽性染色呈棕黃色顆粒狀，主要表達于細胞漿。切片在雙盲情況下由2名高年資病理科醫師獨立閱片。結果判定按照半定量積分法［7］：（1）每例標本隨機觀察5 個（×400）高倍視野，計數陽性細胞數占細胞總數的百分比：陽性細胞數為0 則計為0 分，≤25%計1 分，26%～50%計為2分，51%～75%計為3分，＞75%計為4 分；（2）按染色強度評分：無染色計為0分，淡黃色計為1分，棕黃色計為2分，棕褐色計為3 分；根據（1）、（2）兩項積分之和：0～2 分為陰性，3～7分為陽性。

1.5 統計學方法 采用SPSS 24.0 軟件進行統計學分析，計數資料采用［n（%）］表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 SGK3 在NSCLC 癌組織及癌旁組織中的表達比較 SGK3 在NSCLC 癌旁組織中低表達，在癌組織中主要表達于細胞漿，陽性染色呈棕褐色顆粒狀，見圖1。SGK3在NSCLC癌組織的表達水平為67.9%（91/134），明顯高于癌旁組織表達的3.7%（5/134），差異有統計學意義（χ2=120.042，P＜0.01）。

圖1 SGK3在NSCLC癌組織（A）中高表達和癌旁組織（B）中低表達（HE染色，×400）

2.2 SGK3的陽性表達與臨床特征的相關性 SGK3的陽性表達與NSCLC患者的年齡、性別、病理類型、腫瘤直徑、分化程度均無相關性（P＞0.05），與TNM期及淋巴結轉移相關（P＜0.05），見表1。

表1 SGK3陽性表達與NSCLC臨床特征的相關性

續表1

3 討論

NSCLC 作為常見的腫瘤，目前常見的治療方法包括放療、化療、靶向藥物治療及手術等，早期NSCLC 主要以手術治療，但30%～70%的患者在就診時已處于Ⅲ～Ⅳ期［8］，因此肺癌的早期發現尤為重要。

磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide-3-kinase，PI3K）途徑是人類癌癥中最常見的改變途徑之一［9］，PI3K 促進腫瘤的發生主要是通過激活AKT，AKT是一個高度同源的絲氨酸/蘇氨酸激酶家族，具有多種參與細胞的靶點［10］。SGK家族是一種普遍表達的絲氨酸/蘇氨酸激酶，由三種同種SGK1、SGK2、SGK3 組成，與AKT 家族高度同源，有研究稱SGK3 為第二個AKT［3］，具有與AKT相似的底物特異性［11］，SGK3具有2個關鍵的調控位點：催化結構域的活化環中的蘇氨酸殘基（SGK3中的Thr 320）和C端疏水基序中的絲氨酸殘基（SGK3 中的Ser 486），2 個位點都需要磷酸化才能完全激活［8，12］，參與PI3K途徑的轉化，涉及細胞生長增殖，可以推測SGK3 在功能上與AKT 平行，通過調節細胞增殖、生長、存活、遷移參與腫瘤的惡性轉化。本研究采用免疫組化法檢測NSCLC 癌組織及癌旁組織中SGK3 的表達情況，發現SGK3 在NSCLC 癌組織的表達明顯高于癌旁組織，并且SGK3 的表達與NSCLC 的表達與TNM 分期、淋巴結轉移有關，提示SGK3 可能參與了NSCLC的細胞增殖、生長、遷移及腫瘤的惡性轉化。據報道，在肝癌中發現SGK3擴增和過表達，并能促進腫瘤細胞增殖［13］。有研究表明，PDPK1（Phosphoinositide-dependent Kinase-1）通過SGK3 信號介導前列腺癌細胞的存活，內源性PDPK1在前列腺癌細胞中的敲除顯著降低了SGK3的磷酸化水平［5］。有文獻表明，在乳腺癌中SGK3過表達，增強凋亡和侵襲相關基因和蛋白，從而導致乳腺癌細胞的腫瘤發展和侵襲［14］；用pEGFPN1-SGK3 質粒轉染MDA-MD-231 細胞以高表達SGK3，促進了乳腺癌腫瘤生長和癌細胞的侵略性［4］；在黑色素瘤中，miR-605通過在黑色素瘤中負調控INPP4B介導的SGK3 活化而起腫瘤抑制作用［15］；SMAD2 和SGK3 在NSCLC 癌變組織中呈高表達，有淋巴結轉移時，SMAD2 和SGK3 高表達率均上升［16］，本研究結果與該研究結果相似。

綜上所述，SGK3 可能參與了NSCLC 的發生及發展過程，因此，檢測NSCLC 癌組織中SGK3的表達，為NSCLC 的靶向治療提供了一定的依據，SGK3 能否成為治療NSCLC 的潛在新靶點仍需進一步探討，關于SGK3是通過何種機制發揮作用仍需做進一步的實驗研究。