產超廣譜β-內酰胺酶腸桿菌科細菌的分離、分布情況及耐藥特點研究

全紅

【摘要】 目的：探討產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）腸桿菌科細菌的分離、分布情況及耐藥特點。方法：選取2019年1月-2020年1月佳木斯市中心醫院感染科送檢的各類標本129份，對標本中的細菌進行分離、培養、鑒定，并進行藥敏性試驗。對產ESBLs腸桿菌的檢出率、分布情況進行統計比較，并對藥敏結果特點進行綜合評估。結果：129份感染標本中，共檢出各類菌株145株，其中產ESBLs腸桿菌92株，檢出率63.45%，其中產ESBLs大腸埃希菌57株，產ESBLs肺炎克雷伯菌35株。分布情況：產ESBLs大腸埃希菌以引流液為主，科室分布以外科為主;產ESBLs肺炎克雷伯菌以痰液為主，科室以內科為主。耐藥性：產ESBLs大腸埃希菌和產ESBLs肺炎克雷伯菌對美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、氨曲南、萬古霉素等耐藥率低，對頭孢菌素、青霉素類抗生素高度耐藥。結論：在臨床感染疾病中產ESBLs腸桿菌有較高的發病率，其中以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌為主，菌株標本來源及科室分布呈現規律性。對青霉素、頭孢菌素等多數抗菌藥高度耐藥，對碳青霉烯類抗生素敏感，臨床應根據藥敏結果合理選用抗菌藥物進行治療。

【關鍵詞】 超廣譜β-內酰胺酶 腸桿菌科細菌 分布情況 耐藥特點

Analysis of Isolation， Distribution and Characteristics of Drug Resistance of Producing Extended Spectrum β-lactamase Enterobacter/QUAN Hong. //Medical Innovation of China， 2022， 19（05）： -172

[Abstract] Objective： To study the isolation， distribution and drug resistance characteristics of producing extended spectrum β-lactamase （ESBLs） Enterobacter. Method： A total of 129 specimens of various types submitted for inspection by the Department of Infectious Diseases of our hospital from January 2019 to January 2020 were selected to isolate， culture， and identify bacteria in the specimens， and conduct drug susceptibility tests. The detection rate and distribution of producing ESBLs Enterobacter were statistically compared， and the characteristics of drug susceptibility results were comprehensively evaluated. Result： A total of 145 strains of various strains were detected in 129 infected specimens， of which 92 strains of ESBLs-producing Enterobacter， with a detection rate of 63.45%， of which 57 strains of producing ESBLs Escherichia coli and 35 strains of producing ESBLs Klebsiella pneumoniae. Distribution： producing ESBLs Escherichia coli was dominated by drainage fluid， the distribution of departments was dominated by surgery， producing ESBLs Klebsiella pneumoniae was dominated by sputum， and departments were dominated by internal medicine. Resistance： producing ESBLs Escherichia coli and producing ESBLs Klebsiella pneumoniae had low resistance rates to Meropenem， Imipenem， Amikacin， Aztreonam， Vancomycin， etc.， and high resistant to Cephalosporins and Penicillin antibiotics. Conclusion： Producing ESBLs Enterobacter has a high incidence rate in clinical infectious diseases， among which Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae are the main ones， the source of strains and the distribution of the departments show regularity. It is highly resistant to most antibacterial drugs such as Penicillin and Cephalosporin， and is sensitive to carbapenem antibiotics， the clinical application of antibacterial drugs should be based on the results of drug sensitivity.

[Key words] Extended spectrum β-lactamase Enterobacteriaceae Distribution Characteristics of drug resistance

First-author’s address： Jiamusi Center Hospital， Heilongjiang Province， Jiamusi 154002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.05.042

近些年隨著抗菌藥物的不斷增多，以及致病微生物的物種不斷復雜化，加之抗生素的濫用情況加劇，使得耐藥菌株的種類和數量也在不斷增多[1]。其中超廣譜β-內酰胺酶（extended spectrum β-lactamases，ESBLs）腸桿菌引起的耐藥現象最為嚴重。ESBLs是以滅活窄譜和廣譜頭孢菌素、單環類抗生素及抗革蘭陰性桿菌青霉素等抗生素為特征的β-內酰胺酶，可通過與各種抗生素結合靶位的改變，使抗生素作用下降[2-3]。近些年產ESBLs細菌的耐藥性也在不斷發生變化，從單純的院內感染發展到社區獲得性感染，從以往的單純耐藥發展為多重耐藥，其中以產ESBLs腸桿菌的耐藥情況最為嚴重[4]。產ESBLs腸桿菌的出現不利于患者感染性疾病的抗感染治療，若在治療期間錯誤的選擇抗菌藥物將可能進一步惡化患者腸桿菌的耐藥情況[5-6]。因此，為了更好地控制產ESBLs腸桿菌在院內、院外的傳播和流行，以及在治療過程中合理選取敏感的抗菌藥物進行針對性的治療，有著重要的臨床實踐意義[7]。為此，對佳木斯市中心醫院近期感染可送檢的各類標本進行產ESBLs腸桿菌的分離和檢出，并深入分析產ESBLs腸桿菌的耐藥情況，以期為臨床選用合理的抗生素治療方案提供參考依據?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月-2020年1月佳木斯市中心醫院感染科送檢的各類標本129份。（1）納入標準：①標本均來自本院住院患者;②采集標本的患者均有發熱、滲出等感染癥狀;③每例患者均采集一份相應的標本進行檢測;④入組前未采取相應的治療措施干預;⑤精神狀態良好，能配合本研究。（2）排除標準：①已經明確感染的致病菌種類的患者;②基礎資料、臨床檢測資料不完整;③其他未完成調查研究的各種情況。本研究已經醫院倫理學委員會批準，患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書。129例患者中，男65例，女64例;年齡34～76歲，平均（56.34±9.88）歲;體質指數（body mass index，BMI）18～26 kg/m，平均（22.81±2.76） kg/m;標本類型：血液23份，尿液32份，痰液31份，引流液27份，傷口分泌物16份;標本來源科室：內科34份，外科43份，婦產科9份，ICU 19份，腫瘤科18份，其他科室6份。

1.2 方法 病原菌培養按照《全國臨床檢驗操作規程》的相關要求進行，所取標本置于滅菌容器中，立即送檢進行細菌學培養實驗。將標本接種于血瓊脂培養基上，置于LHS-150型恒溫培養箱（上海坤天科學儀器廠）中進行分離培養24～48 h。菌株分類后采用HX-21A型多功能細菌鑒定儀（上海銘遠實業有限公司）進行鑒定，所采用的質控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603。并進一步對產ESBLs進行鑒定，鑒定方法為在分離后的菌株中加入克拉維酸與不加克拉維酸的抑菌圈相差≥5 mm時即可判斷為產ESBLs陽性菌株。最后根據菌株分離鑒定結果，統計產ESBLs腸桿菌檢出率，以及對應標本的類型、科室來源等進行統計。

采用梅里埃VITEK 2 Compact型全自動細菌鑒定及藥敏分析系統（北京蘭伯瑞生物技術有限公司）進行藥敏實驗，選用本院常用的抗菌藥物青霉素鈉、頭孢哌酮、氨芐西林、頭孢呋辛、哌拉西林、頭孢唑林、阿米卡星、慶大霉素、萬古霉素、美羅培南、呋喃妥因、氨曲南、亞胺培南、伏立康唑、兩性霉素B、氟康唑等進藥敏試驗，檢查方法為紙片瓊脂擴散法。

1.3 統計學處理 采用SPSS 21.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，計數資料以率（%）表示。

2 結果

2.1 產ESBLs腸桿菌檢出情況 129份感染標本中，共檢出各類菌株145株，其中產ESBLs腸桿菌92株，檢出率63.45%，其中產ESBLs大腸埃希菌57株，產ESBLs肺炎克雷伯菌35株，見表1。

2.2 產ESBLs腸桿菌標本類型分布情況 產ESBLs大腸埃希菌標本以引流液為主，產ESBLs肺炎克雷伯菌標本以痰液為主，見表2。

2.3 產ESBLs腸桿菌標本科室來源分布情況 產ESBLs大腸埃希菌科室分布以外科為主，依次為外科、內科、ICU、腫瘤科、婦產科、其他科室;產ESBLs肺炎克雷伯菌科室以內科為主，依次為內科、外科、ICU、腫瘤科、婦產科、其他科室。見表3。

2.4 產ESBLs腸桿菌耐藥特點 產ESBLs大腸埃希菌和產ESBLs肺炎克雷伯菌對美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、氨曲南、萬古霉素等耐藥率低，對頭孢菌素、青霉素類抗生素高度耐，見表4。

3 討論

產ESBLs腸桿菌耐藥問題是抗感染治療中最為嚴重的一類細菌耐藥問題，是由普通的β內酰胺酶基因突變而來，耐藥性較常規的β內酰胺酶更為嚴重，突出表現為耐藥的抗生素種類數量較多以及多重耐藥現象嚴重，其耐藥的機制主要是通過ESBLs使得抗菌藥物與致病菌結合靶位的改變，進而使得抗菌藥物殺菌和抑菌作用大大下降，另外ESBLs還可使得抗菌藥物不能有效穿透細菌的細胞壁，阻斷其與細菌的結合過程[8-10]。近些年隨著抗生素藥物的濫用加劇以及細菌等致病微生物譜系的變化，產ESBLs腸桿菌的耐藥情況愈加嚴重，已成為感染科治療研究的重點方向[11-12]。因此，對于產ESBLs腸桿菌的分離、鑒定、分布及耐藥性特點的研究，有助于掌握產ESBLs腸桿菌的感染規律，為臨床產ESBLs腸桿菌感染的抗菌治療提供參考[13]。

在本研究中通過129份各類感染標本進行菌株培養和分離鑒定，共檢出各類菌株145株，其中產ESBLs腸桿菌92株，檢出率63.45%，其中產ESBLs大腸埃希菌57株，產ESBLs肺炎克雷伯菌35株。表明產ESBLs腸桿菌有較高的發病率，與既往臨床報道的結果基本一致[14-15]，需引起臨床感染科醫師的高度重視。在產ESBLs腸桿菌標本類型分布中，產ESBLs大腸埃希菌以引流液為主，產ESBLs肺炎克雷伯菌以痰液為主。在產ESBLs腸桿菌標本科室來源分布中，產ESBLs大腸埃希菌以科室分布以外科為主，產ESBLs肺炎克雷伯菌科室以內科為主[16-17]，這與本院臨床治療情況基本吻合，這是因為大腸埃希菌主要以腸道感染和腸道外的外傷術口感染為主，而本院外科收治的大部分是住院接受手術治療的患者，術后均進行術后引流，而這類手術患者通常在圍術期使用了預防性或治療性的抗菌藥物，加重了患者出現耐藥的可能性，因此在引流液中檢出較多的產ESBLs腸桿菌[18-19]。肺炎克雷伯菌是呼吸道和腸道中的常見菌，機體抵抗力降低時，便經呼吸道進入肺內而引起大葉或小葉融合性實變，因此較多的在痰液中檢出，多以接受藥物治療內科呼吸系統疾病患者為主[20-21]。在藥敏性結果中，產ESBLs大腸埃希菌和產ESBLs肺炎克雷伯菌對美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、氨曲南、萬古霉素等耐藥率低，對頭孢菌素、青霉素類抗生素高度耐藥，與既往臨床報道的耐藥特點基本吻合[22-23]，表明對于產ESBLs腸桿菌的治療首選碳青霉烯類抗菌藥物。產ESBLs腸桿菌對青霉素和頭孢菌素類的高度耐藥，充分體現了這類細菌有較強的產ESBLs能力，這些產酶的菌株可以在同種或異種菌間通過質粒發生傳遞，從而使耐藥菌株廣泛傳播與流行，增強了對青霉素、頭孢菌素等抗菌藥物活性的抑制，呈現高度廣譜的多藥耐藥機制。因此，根據產ESBLs腸桿菌耐藥特點的分析，對于此類患者的抗菌治療可經驗性選用碳青霉烯類抗生素進行治療，同時還應繼續加強對患者病原菌分布和抗生素耐藥性的監測，以防耐藥菌株的出現，并及時調整抗菌藥物的治療方案[24-25]。

綜上所述，在臨床感染疾病中產ESBLs腸桿菌有較高的發病率，其中以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌為主，菌株標本來源及科室分布呈現規律性。對青霉素、頭孢菌素等多數抗菌藥高度耐藥，對碳青霉烯類抗生素敏感，臨床應根據藥敏結果合理選用抗菌藥物進行治療。

參考文獻

[1]曾利娟.中山市三鄉醫院產超廣譜β-內酰胺酶腸桿菌科細菌的流行病學調查及耐藥性分析[J/OL].臨床檢驗雜志（電子版），2020，29（2）：20-22.

[2]余湛，王軍，何飛，等.2015-2017年重癥監護病房患者分離菌監測及耐藥性分析[J].南京醫科大學學報（自然科學版），2019，39（8）：140-145.

[3] KITANO Y，HSU H C，SAITO H，et al.CTX-M Group Distribution and Positivity of Extended-Spectrum β-Lactamase（ESBL）-Producing Enterobacteriaceae in Urinary Tract Infections in a Tertiary Metropolitan Hospital in Japan[J].Journal of St Marianna University，2020，11（2）：133-141.

[4]范蓉，武智聰，梁翠娟，等.革蘭陰性桿菌產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）的檢出率及其與細菌耐藥性的關系[J].河北醫學，2020，26（3）：522-525.

[5] BACHTARZI R，BOUREAU A S，MASCART C，et al.

Psychoactive drug prescription and urine colonization with extended-spectrum β-lactamase-producing Enterobacteriaceae[J].Infection and Drug Resistance，2019，12（12）：1763-1770.

[6] TEKLU D S，NEGERI A A，LEGESE M H.Extended-spectrum β-lactamase production and multi-drug resistance among Enterobacteriaceae isolated in Addis Ababa，Ethiopia[J].Antimicrobial Resistance & Infection Control，2019，8（1）：182-185.

[7]史治國.產超廣譜β-內酰胺酶的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥性分析[J].中國藥物與臨床，2019，19（8）：140-142.

[8]陳勝男，吳英，張小玲，等.產超廣譜β-內酰胺酶大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌耐藥性分析[J].現代醫藥衛生，2019，35（9）：1389-1391.

[9] SHNAIDERMAN-TORBAN A，STEINMAN A，MEIDAN G，et al.Petting Zoo Animals as an Emerging Reservoir of Extended-Spectrum β-Lactamase and AmpC-Producing Enterobacteriaceae[J].Frontiers in Microbiology，2019，10（12）：2488-2495.

[10] TYA B，HF B，KK C，et al.CTX-M group gene distribution of extended spectrum beta-lactamase-producing Enterobacteriaceae at a Japanese Children’s hospital[J].Journal of Infection and Chemotherapy，2020，26（9）：1005-1007.

[11]周長鑫.某院產超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌科室分布及其耐藥性分析[J].抗感染藥學，2020，17（11）：32-36.

[12]黃晨，肖永紅.產超廣譜β-內酰胺酶腸桿菌科細菌引起的肺部感染：抗菌藥物選擇及優化[J].現代實用醫學，2019，31（1）：9-12.

[13] GUDIOL C，CUERVO G，CARRATALà J.Optimizing therapy of bloodstream infection due to extended-spectrum β-lactamase-producing Enterobacteriaceae[J].Current Opinion in Critical Care，2019，25（5）：1-7.

[14]李嘉瑩，何賽珠，林鳳萍.哌拉西林-他唑巴坦治療產超廣譜β-內酰胺酶腸桿菌科細菌血流感染的療效觀察[J].中國處方藥，2020，18（5）：88-89.

[15] BROLUND A，RAJER F，GISKE C G，et al.Dynamics of resistance plasmids in extended spectrum β-lactamase-producing Enterobacteriaceae during post-infection colonization[J].Antimicrobial Agents and Chemotherapy，2019，29（12）：288-294.

[16]汪小英，汪曉娟，武東.哌拉西林他唑巴坦治療產超廣譜β-內酰胺酶腸桿菌科細菌血流感染的研究進展[J].中國醫院用藥評價與分析，2020，20（6）：764-768.

[17]陳雷鳴，陳藝升，石雯茜，等.女性陰道分泌物產ESBLs腸桿菌科細菌監測及耐藥分析[J].國際檢驗醫學雜志，2019，40（3）：348-350.

[18]田金靜，康亞麗，路秀芳，等.某院近5年住院患者腸桿菌科細菌分布及耐藥監測分析[J].檢驗醫學與臨床，2020，17（6）：25-29.

[19]柴磊，鄧慧媛，許靜，等.蘭州市3～6歲健康兒童產超廣譜β-內酰胺酶的大腸桿菌與肺炎克雷伯菌流行現狀及耐藥情況分析[J].中國婦幼保健，2020，35（4）：666-668.

[20]徐令清，朱卓均，湯英賢，等.產ESBL及非產ESBL大腸埃希菌整合子分布差異與耐藥性分析[J].國際檢驗醫學雜志，2019，28（12）：1782-1784.

[21]王勇，王雪芬，卜勁松，等.陰溝腸桿菌產β-內酰胺酶和質粒介導耐藥基因的檢測及耐藥性分析[J].浙江臨床醫學，2019，21（2）：88-89.

[22]余建洪，李玉梅，王修全.自貢3家三級綜合醫院血流感染病原菌的臨床分布及耐藥性分析[J].中國藥房，2019，30（7）：951-956.

[23]唐雯娟，謝蘭，羅林鳳.呼吸道感染患者產超廣譜β-內酰胺酶大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌檢測及耐藥性分析[J].標記免疫分析與臨床，2020，27（3）：393-397.

[24]錢敏健，李星軍，陸秀英，等.崇明島大腸桿菌所致社區獲得性尿路感染患者特點及產ESBLs菌株的基因型和耐藥性特點[J].廣西醫學，2019，41（23）：3026-3032.

[25]衣首靜，劉青霄，蔣智宇.泰安渿河中產ESBLs大腸桿菌耐藥性及耐藥基因的傳遞規律[J].微生物學報，2019，59（11）：2194-2205.

（收稿日期：2021-06-04） （本文編輯：程旭然）