乳腺癌病人絕經前后血清25羥維生素D及骨鈣素水平與乳腺密度相關性研究

何雷，沈冬明

美國最新癌癥統計報告顯示，乳腺癌仍是具有高發病率及病死率的婦科惡性腫瘤，且發病率呈現逐年遞增趨勢［1］。為提高乳腺癌臨床診斷敏感度，提升病人生存時間，其診斷和預測指標越來越受到諸多專家關注。研究發現，25 羥維生素D（25-OHVD）通過抑制癌細胞增殖、誘導細胞凋亡、減少血管生成等降低癌癥的危險性［2-5］。研究顯示，骨鈣素（OC）與25-OH-VD 與乳腺癌發病具有強關聯性，由于OC 與25-OH-VD 與乳腺癌發病機制尚不清楚，對其作為乳腺癌的臨床診斷和預測指標存在較大爭議［6-7］。該研究通過探討25-OH-VD 和OC 等指標與乳腺癌病人影像評估風險的關聯，為乳腺癌臨床診療提供理論參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料自2017 年6 月至2018 年12 月，就診于上海市寶山區羅店醫院的乳腺癌病人共納入108 例，年齡為（46.53±6.26）歲，其中包括53 例絕經前婦女（42.68±5.44）歲和55例未使用激素治療的絕經后婦女（51.39±7.08）歲，所有病人均經臨床病理診斷為乳腺癌，對象排除標準：①患有動脈高血壓、腎病、肝病等；②乳腺結節、乳腺囊腫等；③病人依從性差或不配合者。病人或其近親屬知情同意，本研究符合《世界醫學協會赫爾辛基宣言》相關要求。

1.2 試劑和儀器

1.2.1 實驗室檢查 采用真空管采集靜脈血樣，將樣品以3 000 r/min離心10 min，將得到血清等分試樣并儲存在-80 ℃直至一次測定。血糖（GLU），三酰甘油（TG），總膽固醇（TCHO），高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和25-OH-VD通過使用Roche Cobas分析儀進行檢測。通過化學發光免疫測定法（immulite analyzer，siemens medical solutions USA，Malvern，PA）測量OC。

1.2.2 乳房X線片密度 使用GE Healthcare Senographe 2000D（GE Healthcare，Chicago，IL）測定數字乳房X線照相術。選擇乳房X線照片上四個視圖，右側和左側乳房的顱尾側和內側斜視圖中臨床測量乳腺密度。

1.3 方法采用病例對照方法，根據密度的范圍和類型采用Wolfe的實質模式將MBD分為四個實質模式：N1-非密集，沒有可見的管道；P1-導管突出占據不到四分之一的乳房；P2 突出的導管模式占據乳房的四分之一以上；Dy 型，以結締組織增生為主的乳腺，乳腺的密度增高、致密。這些模式再次被分為低風險（N1 和P1）和高風險（P2 和Dy）模式，以高風險組乳腺癌病人為病例組，低風險組病人為對照組。對所有研究對象進行血清25-OH-VD、骨鈣素等指標檢測和信息采集。

1.4 統計學方法采用R 3.4 統計軟件進行數據分析。計量資料以表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料以相對數或率表示，比較采用χ2檢驗或Fisher 確切概率法；定量變量間采用Pearson 相關性分析進行檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。根據WHO 標準分為正常體質量指數（BMI＜25 kg/m2）和超重或肥胖（BMI＞25 kg/m2）。以乳腺癌病人影像學風險模式為因變量，以年齡、BMI、腰圍、SBP 等為自變量，采用logistic 回歸分析乳腺癌病人影像學風險模式的影響因素，以納入標準為0.05，排除標準為0.10，以向前法選取變量。

2 結果

2.1 一般情況研究共納入53例絕經前和55例未使用激素治療的絕經后婦女。絕經前、后病人OC、25-OH-VD 的差異有統計學意義（P＜0.001）；絕經前后在腰圍、收縮壓、足月妊娠次數等差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 絕經前后病人一般情況分析

2.2 兩組病人的檢驗結果比較絕經前高、低風險組的年齡、BMI、腰圍、GLU、TG 等指標差異無統計學意義（P＞0.05）。絕經后，低風險、高風險病人的OC 和25-OH-VD 差異有統計學意義（P＜0.001）；絕經后低風險和高風險組間年齡、腰圍、GLU、TG 等指標差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 高低風險組病人檢測指標分析

2.3 檢測指標的相關性分析采用person 進行雙變量間的相關性分析，絕經前病人中，25-OH-VD 和OC 的相關性檢驗差異有統計學意義（r=-0.28，P=0.041）；絕經后25-OH-VD 和OC 的相關性檢驗差異有統計學意義（r=-0.56，P=0.010）。見表3。

表3 絕經前后各項指標間的相關性分析

2.4 多元logistic 分析logistic 回歸分析顯示，25-OH-VD（β=-0.547，P=0.004）和OC 濃度（β=0.180，P=0.002）與乳腺癌病人影像學風險模式有關。未發現年齡、BMI、腰圍、TG、TCHO 等與乳腺癌病人影像學風險模式有關（P＞0.05）。見表4。

表4 絕經后乳腺癌病人影像學風險模式的logistic分析

3 討論

研究發現，25-OH-VD 和OC 水平在絕經后乳腺癌病人中呈明顯的相關性，具有乳腺癌高風險絕經婦女血清的25-OH-VD 表達更低，而OC 表達水平明顯升高。目前諸多研究仍未發現OC 與乳腺密度之間的關系［8-9］。此結果為絕經后婦女乳腺癌風險評估提出了新角度。

25-OH-VD 除了具有內分泌作用，還具有廣泛的免疫原性和抗增殖作用［10-11］。研究結果顯示，25-OH-VD 缺乏與乳腺癌、前列腺癌和結腸癌的發病率增加有關［12-13］。諸多研究發現，血清維生素含量低水平乳腺癌婦女的總體存活率和無病生存期較差［14-15］。目前所提出的25-OH-VD 參與調節癌癥發生發展的機制包括上調細胞之間依從性和信號傳導，促進細胞增殖的接觸抑制、分化、細胞周期穩定化，并促進細胞凋亡，抗血管生成和糖原合成酶激酶3（GSK-3）的下調，這會降低結腸直腸癌，乳腺癌，前列腺癌等癌細胞的體外增殖［16］。如果與特定癌癥類型存在明顯的相關性，25-OH-VD 及其代謝物可用作侵襲性的非特異性標志物。正常的25-OHVD 水平不僅有利于降低惡性腫瘤的發病率，而且有益于多種健康狀況，例如自身免疫疾病，感染和慢性疾病等［17-18］。基于人群的大數據分析表明，血清25-OH-VD 水平與乳腺癌風險呈負相關，并呈濃度依賴性［19］。研究發現，高BMI 和低維生素D 水平之間存在相關性［20］。該研究病例組和對照組病人進行BMI 匹配，因此，限制了BMI 作為混雜因素的影響。

維生素D 在鈣穩態，骨骼代謝方面同樣起著至關重要的作用。而骨代謝的水平與腫瘤的發生發展和預后有明顯的相關性。OC 是一種維生素D 相關蛋白，由成骨細胞釋放，不僅在成骨細胞與破骨細胞相互作用和骨吸收方面具有潛在作用，同時在代謝方面也發揮作用。有研究發現，OC 與維生素D之間存在負相關［21］。但有學者指出，血清未羧基化的OC 與25-OH 維生素D 水平呈正相關［22］。通過小鼠模型驗證發現Leydig 細胞系（MA-10）中CYP2R1表達促進25-OH-VD 的產生［23］，可能與成骨細胞產生的OC 通過受體GPRC6A 刺激Leydig 細胞產生蛋白偶聯受體有關。但目前OC 與乳腺癌的相關性尚未有明確報道，也沒有發現OC 與乳房密度風險評估的直接相關證據。

綜上所述，在乳腺癌病人中25-OH-VD 與OC 存在負相關，并在絕經后乳腺癌病人的影像學風險評價中具有重要臨床意義，有望成為乳腺癌風險評估的輔助診療指標。