多粘類芽孢桿菌胞外多糖的功能研究進展

和林松 陶玲慶 韋露萍 費孝桐 朱玉雪 趙永清

摘 要：多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）屬于芽孢桿菌屬，是一類產芽孢的革蘭氏陽性細菌，可以產生多肽類、蛋白類、酶類、功能性多糖及其他代謝活性物質。現代研究表明，多糖類化合物具有廣泛的生理功能。隨著研究的不斷深入，多粘類芽孢桿菌胞外多糖已被證明具有抗氧化性、免疫活性、抗腫瘤性等功能，在生物醫藥領域及生態農業方面有著廣泛的發展前景。該文綜述了多粘類芽孢桿菌菌株來源及其胞外多糖的發酵工藝、提取、分離純化、結構分析及功能方面的研究進展，并對其未來的發展研究進行了展望。

關鍵詞：多粘類芽孢桿菌;胞外多糖;發酵工藝;提取;結構分析;生物活性

中圖分類號 Q939.124 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2022）06-0041-05

Research Progress on Extracellular Polysaccharides of Bacillus polymyxa

HE Linsong1? ?TAO Lingqing1? ?WEI Luping1? ?FEI Xiaotong1? ?ZHU Yuxue1? ?ZHONG Yongqing1，2

（1Life Science and Engineering College， Northwest Minzu University， Lanzhou 730030， China; 2Biomedical Research Center， Northwest Minzu University， Lanzhou 730030， China）

Abstract： Paenibacillus polymyxa belongs to the genus Bacillus， a type of spore-producing Gram-positive bacteria， Bacillus polymyxa can produce polypeptides， proteins， enzymes， functional polysaccharides and other metabolically active substances. Modern research shows that polysaccharide compounds have a wide range of physiological functions. With the deepening of research，the extracellular polysaccharide of Bacillus polymyxa has been proven to have antioxidant， immune， and anti-tumor functions， and has broad development prospects in the field of biomedicine and ecological agriculture. This article reviews the source of Bacillus polymyxa strains and the research status of its extracellular polysaccharide fermentation technology， extraction， separation and purification， structure analysis and function in recent years， and prospects for its future development research.

Key words： Paenibacillus polymyxa; Extracellular polysaccharide; Fermentation process; Extraction; Structural analysis; Biological activity

多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）是類芽孢桿菌的模式菌[1]。類芽孢桿菌屬于革蘭氏陽性好氧或兼性厭氧菌，能產生芽孢，抗逆性極強，在高酸、高堿、高寒、高鹽的逆境下生長良好[2]。其細胞呈直桿狀，菌落特征多成淺黃色或白色的黏稠狀，表面濕潤光滑;靠周生的鞭毛運動，膨大孢子囊中產生橢圓形芽孢;最適生長溫度為28～35℃，最適pH7.0，能產酸，有時產氣[3]。多粘類芽孢桿菌廣泛存在于自然界中，多數在植物體內外及根際土壤中分離而來，作為一類重要的根際有益菌[4]，其具有促進植物生長和生物防治的作用，被廣泛應用于農業領域。多粘類芽孢桿菌具有良好的生物學活性物質，如蛋白質類、多糖、多肽類、脂類[5]。近年來的研究表明，多粘類芽孢桿菌胞外多糖具有凈化水質[6]，吸收廢水中的重金屬離子[7]等作用，在環境生態領域中具有重要的應用價值。此外，它還具有抗氧化性、抗腫瘤性、調節免疫等生物活性，在醫藥領域中有著重要作用。多粘類芽孢桿菌產胞外多糖在農藥助劑方面也發揮著重要作用，包括助懸浮和熱保護作用[8]。多粘類芽孢桿菌有多種生物學活性，對人畜安全和無污染，具有廣泛的應用前景而受到青睞，美國環保署（EPA）將其列為可在商業上應用的微生物[9]。

胞外多糖作為一種生物材料的來源，近年來受到了越來越多的關注。微生物多糖具有生產過程可控性高、不受外界因素影響、生產周期短，具有獨特的理化性質及生物活性等優勢，已被廣泛應用于各個領域。微生物多糖由范圍極廣的單糖構成，具有十分復雜的結構，其活性受發酵條件、提取工藝、純度、含量等多因素的綜合影響。因此，菌株發酵的條件及胞外多糖的提取、分離純化對后續結構分析鑒定及其活性功能的研究尤為重要。在多粘類芽孢桿菌發酵過程中，會產生大量的胞外多糖，容易分離提取。本文綜述了多粘類芽孢桿菌的來源及其多糖的提取工藝、純化、結構分析及其功能進展，并對未來相關領域研究進行了展望，為多粘類芽孢桿菌胞外多糖的綜合應用以及進一步研究提供參考。

1 菌株來源

多粘類芽孢桿菌在自然界中分布廣，廣泛分布于土壤、植物的體表以及根部，也是常見的植物內生菌。目前，多粘類芽孢桿菌多從植物的根際土壤中分離而來。劉訓理[10]等從泰山土壤中分離得到1株對多種動植物病原細菌和真菌具有較強拮抗作用的多粘芽孢桿菌Cp-s316。陳雪麗[11]等從大豆根際土壤中分離得到多粘芽孢桿菌BRF-1。張道敬[12]等在番茄的根際土壤中分離得1株生防菌株多粘芽孢桿菌HY96-2。林茂茲[13]等從太子參根際土壤中篩選出對尖孢鐮刀菌有很強抑制作用的多粘類芽孢桿菌S960。張宏福[14]等從中華蘆薈中分離到1株植物內生菌多粘類芽孢桿菌A11，并且對該菌進行了全基因組測序。吳棣[15]等自中國貴州辣椒根際土壤中分離得一株具有良好的拮抗性能并具有較好的植物促生及溶磷、解鉀的能力的多粘類芽孢桿菌SC2。鄂垚瑤[16]等從西瓜種植發病區健康植株根際分離得到的一株兼具促生及生防功能的根際有益菌多粘類芽孢桿菌SQR-21。李玉洋[17]等從水稻根際土壤中篩選得到1株對水稻惡苗病菌拮抗作用較強的多粘類芽孢桿SH15。王波[18]等從大豆植株中分離得到多粘類芽孢桿菌XZ-2。

2 發酵工藝

在發酵產胞外多糖的過程中，發酵培養基成分和發酵條件對胞外多糖的合成至關重要，通過優化培養基成分和發酵條件促進菌體生長及其生理代謝，是提高胞外多糖產量的重要手段，成為優化多糖生產工藝的研究熱點。優化發酵工藝通常使用單因素試驗、正交試驗、響應面設計方法相結合，綜合探究不同因素之間的交互作用。

2.1 培養基優化 培養基組分在很大程度上影響著微生物生長及其代謝產物的積累，適合菌體生長繁殖的培養基不一定適合于代謝產物的積累。不同的菌株對碳源、氮源、生長因子和無機鹽離子等營養物質種類和濃度的要求大有不同，不同代謝物的產生對這些要求也不同。因此，為提高多糖產率，需對培養基成分進行優化。碳源不僅是微生物菌體的能源物質，也是合成菌體和目的產物的碳成分提供者。碳源對菌體產多糖的數量和質量起著關鍵作用。不同的碳源對微生物的生長及其多糖的合成有一定的影響。氮源是細胞物質（氨基酸、蛋白質、核酸等）和含氮代謝物的組分，是菌體生長繁殖的必需營養素，為微生物生長提供營養所需的氮元素，也是合成多糖的重要成分，適宜的氮源及添加量有利于多糖的合成。無機鹽及微量元素是微生物生理活性物質的組成或生理活性作用的調節物，一般在低濃度有促進作用，在高濃度有抑制作用。不少研究表明，對于多粘類芽孢桿菌產多糖，蔗糖是最佳碳源。如劉俊等[19]先用單因素實驗方法篩選影響胞外多糖的產量因子，再用響應面法對碳源、氮源和無機鹽的培養基成分進行優化，最終確定最佳培養基組合為蔗糖188.2g/mL、酵母膏25.8g/mL、氯化鈣0.34g/mL，其提取量高達35.26g/L。蹇華麗等[21]采用單因素實驗法，以多糖產量為指標，對多粘類芽孢桿菌PS04發酵培養基成分進行優化，最終確定蔗糖是最佳碳源，最適濃度150g/L，最佳氮源為無機氮NH4NO3，最適濃度1.4g/L。王波[18]等采用單因素試驗和正交試驗相結合的方法對多粘類芽孢桿菌XZ-2的培養基組分進行優化研究，得出利用蔗糖發酵產糖量最高，其最佳培養基組成為蔗糖15g/L、蛋白胨15g/L、硫酸鎂5g/L、氯化鈣3g/L。

2.2 發酵條件優化 微生物的正常生長繁殖，需要適應的環境。在胞外多糖發酵生產中，除培養基的成分及濃度外，培養溫度、初始pH、發酵時間、通氣量、接種量等工藝條件也是主要的影響因素。只有將這些外界條件控制在適合菌種發酵的最優水平，才能提高多糖的產量。溫度是影響微生物生長的重要因素，它會影響菌中的酶活性，進而會影響微生物體內所進行的各種生化反應，對微生物的影響是最為廣泛的。在一定范圍內，適宜的溫度促進菌體生長，促進代謝活性物質的產生;不適的溫度則會影響微生物的代謝。pH值也會影響菌中酶的活性，直接影響菌類的正常生長和代謝，pH過高或過低均會影響多糖產量。到目前為止，已有不少關于多粘類芽孢桿菌產多糖培養條件的報道。楊樹麗[20]采用單因素試驗法確定了類芽孢桿菌C-12菌株的最佳發酵條件為溫度30℃，初始pH6.0，轉速160r/min，接種量6%。蹇華麗[21]采用單因素法和響應面設計對菌株PS04發酵產多糖的工藝進行優化，最終得出初始pH值為8.22、發酵溫度37℃、接種量4%、發酵周期48h時，多糖產量可達到60.04g/L，約為發酵條件未優化時產量的6倍。表明通過響應面設計方法對發酵條件進行優化可以明顯提高多糖的產率。楊棒棒[22]等在類芽孢桿菌ZX-5產胞外多糖發酵條件優化中，先對碳源、氮源、溫度、pH、碳濃度、氮濃度進行單因素試驗，得出溫度、碳源濃度、氮源濃度對產多糖具有顯著影響，再選用這3個因素進行響應面試驗，分析多糖產量的交互作用，得到最佳的產糖溫度條件為20℃，在優化條件下產糖量達到34.55g/L，是基礎水平的2.01倍。

3 提取與純化

目前，微生物胞外多糖的提取一般采用離心除菌體、有機溶劑沉淀、去除蛋白、透析、冷凍干燥等步驟得多糖粗品，其純度較低，常含有色素、蛋白質和小分子物質等雜質。雜質的存在不僅降低了多糖的純度，也影響對其結構與生物活性的研究。利用凝膠柱層析、離子交換柱層析等手段進行純化，可得到純度較高的多糖樣品。

3.1 提取 多粘類芽孢桿菌多糖為胞外產物，分離過程一般先要去除菌體。高速離心是除菌體最常用的方法。然而，多糖的高粘度性會使發酵液難于離心，因此，有研究者采用先稀釋發酵液再離心的方法，也有研究者在處理發酵液前先加熱發酵液[23]。加熱會使結合在細胞壁上的多糖脫離細胞，同時使蛋白質變性沉淀[24]。因此，發酵液先經熱處理，再冷卻稀釋離心更適合高粘度的多粘類芽孢桿菌發酵液中多糖的提取。用乙醇沉淀是最常用的多糖提取方式[25]。不同菌株發酵液中多糖的提取率與乙醇的濃度有很大影響。如賈杰[26]等用1倍體積的乙醇沉淀多粘類芽孢桿菌HY96-2胞外多糖。田文祥[27]等用3倍體積的95%乙醇沉淀多粘類芽孢桿菌PS04胞外多糖。有機溶劑在低溫下可提高其沉淀量，促進沉淀速度，所以多數研究者使用有機溶劑時先經預處理再沉淀，或是在低溫條件下進行沉淀。

3.2 除蛋白 多糖中的蛋白以游離蛋白和結合蛋白2種存在形式，這些蛋白會隨多糖沉淀下來。多糖除蛋白有3種方法：（1）強酸處理使蛋白質變性沉淀，如三氯乙酸除蛋白，三氯乙酸能使蛋白質帶正電荷，并與負離子結合成不溶性的鹽類[28]。（2）Sevage法;利用有機溶劑使溶液中的蛋白質變性而分離蛋白質。（3）酶解法：強酸除蛋白的效率可能更高，但是反應劇烈，在蛋白質變性的同時可能會導致多糖的分解，進而降低多糖的提取率。酶解法具有條件溫和、多糖損失率低等優點，但酶法不能完全去除多糖中的蛋白質。Sevage法效率較低，需要重復操作，但對多糖的結構影響不大，更為溫和、可靠。因此，多粘類芽孢桿菌多糖中蛋白的去除，一般采用Sevage法[氯仿：正丁醇=5∶1（V∶V）]。

3.3 純化 在進行多糖的提取時，提取物中通常含有蛋白質、色素、無機鹽等多種雜質，在進行多糖的結構分析鑒定和生物活性等方面研究前需要對多糖提取物進行除雜、分離純化，以得到較高純度的單一多糖。微生物胞外多糖常為中性或弱酸性，因而可根據其電荷性質及其結構特點，選取合適的方法進行分級純化。實驗中常采用分步沉淀法、凝膠色譜法、超濾法、層析分離法、離子交換樹脂法等方法進行分離純化。張道敬等[12]對乙醇沉淀法提取得的粗多糖用DEAE-纖維素柱法進行分離純化，得出組分B和組分D，用高效液相色譜法檢測它們的純度，并對組分B采用氣相色譜法分析其單糖組成。由于單一的純化方法通常無法得到較高純度的多糖，因此在研究過程中通常需要聯合使用多種方法。

4 結構分析

多糖的結構分析主要包括多糖的單糖組分、多糖的分子量和糖苷鍵的連接方式。多糖具有復雜的結構，常用電泳法、酸解法、紅外光譜分析法（infrared spectroscopy，IR）、紫外-可見分光光度法（ultraviolet and visible spectropHotometry，UV）、氣相色譜法（gas chromatograpHy，GC）、高效液相色譜法（high performance liquid chromatograpHy，HPLC）、質譜法（mass spectrometry，MS）、高效凝膠滲透色譜法（high performance gel permeation chromatograpHy，HPGPC）、核磁共振法（nuclear magnetic resonance，NMR）等方法對多糖進行結構分析鑒定。蹇華麗[27]等采用丙烯葡聚糖凝膠S-200 HR對多粘類芽孢桿菌PS04多糖進行過濾層析，并通過凝膠滲透色譜法分析測定，結合紅外光譜、高效液相色譜及核磁共振分析，確定該多糖是由果糖與葡萄糖以7∶1的比例組成，且果糖殘基以呋喃環構型存在，以β-2，6、β-1，2鍵連接。張道敬等[12]采用凝膠滲透色譜法（GPC）、氣相色譜法（GC）測定了多粘類芽孢桿菌HY96-2的多糖組分B的分子量，得組分B的分子量為1.22×106Da，并確定其含有5種單糖：鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖，它們的摩爾比為2.52∶0.25∶1∶1.61∶2.24，是一種新結構多糖。多糖的功能性質與結構特點、空間構象密切相關，借助以上手段有效分析多糖的構型、化學鍵等結構特征，有助于研究其生理活性和藥理作用機制。

5 多粘類芽孢桿菌的功能

近幾年的研究表明，多糖不僅是細胞的結構物質和能源物質，也是具有多功能的生物活性物質。此外，功能性多糖還具有抗腫瘤、消炎、抗氧化性、抗凝血等作用，可用于生態環保等領域。

5.1 增強免疫力 多糖種類豐富、結構復雜，是生物體內一種重要的聚合物，具有顯著的生物學活性，能提高機體淋巴細胞與巨噬細胞的數量、增加細胞因子的釋放、調節機體的免疫系統，提高機體的免疫力[29]。多粘類芽孢桿菌產生的葡聚糖可以減輕小豬炎癥的發生程度[30]，將該種多糖作為飼料添加劑可提高動物的免疫力。劉俊等[19]研究表明，給D-半乳糖誘導的衰老小鼠灌胃胞外多糖，可提高小鼠的脾臟和肝臟指數，從而增強小鼠的免疫功能。P. polymyxa JB115[31]中提取分離的β-葡聚糖能刺激機體增強免疫能力，是一種很好的免疫增強劑。

5.2 抗腫瘤 腫瘤是一種常見病、多發病，其中惡性腫瘤是目前危害人類健康最重要的一類疾病。腫瘤細胞會誘導淋巴細胞凋亡，導致器官萎縮，從而降低宿主免疫力，產生危害。尋找具有抗腫瘤活性的物質已成為許多科研人員努力的方向。Chang等[32]研究P. polymyxa JB115發現，其[β]-葡聚糖可誘導巨噬細胞中產生NO，NO可作為信號分子進一步發揮神經傳導、疏通血管以及促進巨噬細胞清除腫瘤細胞。

5.3 抗氧化 細胞正常代謝過程中產生的活性氧具有雙重功能，低濃度的活性氧對生長因子的應答、免疫反應起重要作用;高濃度的活性氧則會破壞細胞中的DNA、脂類和蛋白質，從而提高致癌性。有研究指明，多粘類芽孢桿菌的胞外多糖有較強的抗氧化性。Liu等[33]研究P. polymyxa EJS-3胞外多糖的抗氧化性，體外通過測定H2O2清除活性、DPpH自由基清除活性、Fe2+螯合劑活性、脂質體過氧化抑制效果等，體內試驗以D-半乳糖誘導的小鼠為對象做生物測定，實驗結果表明該多糖有抗氧化活性，可以作為新型的天然抗氧化劑應用于醫藥領域多種疾病的治療以及開發新型化妝品。

5.4 其他方面作用 除上述的活性外，多粘類芽孢桿菌胞外多糖還具有乳化、凈化水質的作用。一些研究表明，P. polymyxa產胞外多糖具有凈化水質的作用[34]。Mokaddem等[35]研究表明，P. polymyxa CHL0102產多糖類物質，可吸附污水中的鎘離子，說明該類細菌可用于廢水中重金屬離子的去除，達到凈化污水的目的。P. polymyxa GA1[36]產生的大分子多糖可作為絮凝劑，對污水有很好的處理效果，其絮凝機是通過架橋作用使分散的顆粒聚集從而達到固液分離。多粘類芽孢桿菌在污水處理方面具有廣闊的前景。此外，P. polymyxa[37]產胞外多糖具有低濃度下高黏性、假塑性、耐鹽性，同時對熱和酸堿有很好的穩定性等優良性質。一些文獻報道，P. polymyxa[38，39]產胞外多糖在農藥助劑方面也有一定的作用，包括助懸浮、免受紫外和熱損傷。

6 展望

由于地理來源和采集環境的不同以及分泌不同代謝物質所需營養素的不同，不同多粘類芽孢桿菌的培養基成分和培養條件之間存在差異，需要通過較多的試驗次數和周期才能優化篩選出最佳結果。現階段，對多粘類芽孢桿菌培養基的探索大多是籠統的優化篩選組分及發酵條件。多粘類芽孢桿菌作為一種有益菌，具有多種可利用的生物特性，提高發酵產量，高效的提取、分離純化及更深入的結構分析、生理活性研究將有利于對其多糖的充分利用。

目前，多糖類依舊是國內外天然化學領域的研究熱點之一，具有廣闊的應用前景。但國內對多粘類芽孢桿菌胞外多糖的研究不足，我國對于多粘類芽孢桿菌多糖的開發利用還不夠全面。對多粘類芽孢桿菌代謝活性物質的研究主要集中在多肽類、脂類、蛋白質類，而在多糖及其活性的研究較少，對其他代謝產物的研究主要集中在功能和基本的理化性質上，其中對蛋白質類、多肽類的作用機理研究比較深入、比較系統。對多糖的研究多數是針對其提取、純化、單糖鑒定，僅局限在分析單糖組成和糖苷鍵的連接方式，而對其功能研究較淺，如抗腫瘤機制的研究報道甚少，其作用機理尚不明確，胞外多糖的抗腫瘤機制有待進一步研究，這將是研究多糖的重要方向。

參考文獻

[1]王劉慶，王秋影，廖美德.多粘類芽孢桿菌生物特性及其機理研究進展[J].中國農學通報，2013，29（11）：158-163.

[2]郭興華.益生菌基礎與應用[M].北京：科學技術出版社，2002.

[3]羅元嬋，張道敬，魏洪剛，等.多粘類芽孢桿菌農用活性研究進展[C]//第四屆中國植物細菌病害學術研討會論文集.2008.

[4]Choong-Min Ryu，Jinwoo Kim，Okhee Choi，Seuk Hyun Kim，et al. Improvement of biological control capacity of Paenibacillus polymyxa E681 by seed pelleting on sesame[J].Biological Control，2006（3）：282-289.

[5]楊少波，劉訓理.多粘類芽孢桿菌及其產生的生物活性物質研究進展[J].微生物學通報，2008（10）：1621-1625.

[6]Partha P，Natarajan K A. Surface chemical studies on selective separation of pyrite and galena in the presence of bacterial cells and metabolic products of Paenibacillus polymyxa[J].Journal of Colloid and interface Science，2006，298（2）：720-729.

[7]丁雨，路現彩，周躍飛，等.多粘芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）吸附CU2+的實驗[J].高校地質學報，2007，13（4）：675-481.

[8]劉振華，魏鴻剛，李元廣，等.多粘類芽胞桿菌胞外多糖在微生物農藥劑型中的功能研究[J].農藥學學報，2011，13（06）：603-607.

[9]Wang Z W，Liu X L. Medium optimization for antifungal active substances production from a newly isolated Paenibacillus sp using response surface methodology[J].Bioresource Technology，2008，99（17）：8245-8251.

[10]劉訓理，孫長坡，馬迎飛，等.一株家蠶病原物拮抗細菌的分離與鑒定[J].蠶業科學，2004（03）：273-276.

[11]陳雪麗，郝再彬，王光華，等.多粘類芽孢桿菌BRF-1抗菌蛋白的分離純化[J].中國生物防治，2007（02）：156-159.

[12]張道敬，龔春燕，魏鴻剛，等.多粘類芽孢桿菌HY96-2的化學成分[J].華東理工大學學報（自然科學版），2008（01）：71-73.

[13]林茂茲，金美芳，鄒虹.多粘類芽孢桿菌S960菌株發酵條件優化[J].福建師大福清分校學報，2015（05）：6-11.

[14]張宏福.基于多粘類芽孢桿菌A11新型微生態制劑的研究[D].重慶：西南大學，2014.

[15]吳棣.多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）SC2對辣椒根系分泌物的響應機制研究[D].泰安：山東農業大學，2017.

[16]鄂垚瑤.接種多粘類芽孢桿菌SQR-21及FON對西瓜根系轉錄水平和蛋白表達的影響[D].南京：南京農業大學，2017.

[17]李玉洋.水稻惡苗病生防拮抗菌—多粘類芽孢桿菌SH15的分離及抑菌活性研究[D].泰安：山東農業大學，2017.

[18]王波，王幸，周興根，等.多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）XZ-2發酵條件優化的研究[J].江西農業學報，2018，30（11）：57-61.

[19]劉俊.多粘類芽孢桿菌胞外多糖的發酵條件、結構、化學修飾及其抗氧化活性的研究[D].南京：南京農業大學，2010.

[20]楊樹麗.一株產胞外多糖芽孢桿菌的研究[D].上海：上海應用技術大學，2016.

[21]蹇華麗，田文祥，楊幼慧，等.多黏類芽孢桿菌PS04產胞外多糖發酵條件優化[J].食品科技，2013，38（01）：26-30.

[22]楊棒棒，符運會，周佳，等.類芽孢桿菌ZX-5產胞外多糖發酵條件優化及其保濕特性[J].現代食品科技，2022，38（01）：151-158.

[23]Acosta M P，Valdman E，Leite S G F，et al. Biosorption of Copper by Paenibacillus polymyxa Cells and their Exopolysaccharide[J] .World Journal of Microbiology and Biotechnology，2005，21：1157-1163.

[24]劉振華，井長勤，周晨妍.生防細菌多粘類芽孢桿菌多糖研究進展[J].上海農業學報，2015，31（04）：146-150.

[25]Asker M M S，Manal G M，Ghada S I. Structural characterization and biological activity of acidic polysaccharide fractions isolated from Bacillus polymyxa NRC-A [J].Journal of Applied Sciences Research，2007，3：1170-1177.

[26]賈杰，鄭瑞峰，李淑蘭等.多粘類芽孢桿菌HY96-2胞外多糖的分離純化[J].分析科學學報，2020，36（01）：42-46.

[27]蹇華麗，田文祥，楊幼慧，等.多粘類芽孢桿菌PS04胞外多糖分子結構研究[J].食品工業科技，2014，35（08）：114-117，121.

[28]初雅潔.辣木多糖除蛋白的工藝技術[J].現代食品，2020（19）：86-89.

[29]潘桂芳.卷丹百合多糖的提取純化、結構分析及其免疫活性研究[D].合肥：安徽農業大學，2017.

[30]孫守坤，宋濤，盧義.刺五加酸性多糖對免疫低下小鼠的免疫調節作用[J].免疫學雜志，2018，34（10）：863-868.

[31] Ko E J，Byon Y Y，Jee Y，et al.Maturation of bone marrow-derived dendritic cells by a novel β-glucan purified from Paenibacillus polymyxa JB115[J]. Journal of Veterinary Science，2011，12（2）：187-189.

[32]Chang Z Q，Lee J S，Hwang M H，et al. A novel β-glucan produced by Paenibacillus polymyxa JB115 induces nitric oxide production in RAW264.7 macrophages[J]. Journal of Veterinary Science，2009，10（2）：165-167.

[33]Liu J， Luo J， Ye H，et al， In vitro and in vivo antioxidant activity of exopolysaccharides from endophytic bacterium Paenibacillus polymyxa EJS-3[J].Carbohydrate Polymers，2010，82（4）：1278-1283.

[34]Hwang Y H，Park B K，Lim J H，et al.Effetcs of beta-glucan from Paenibacillus polymyxa and L-theanine on growth performance and immuno-modulation in Weanling Piglets[J].Asian-Australasian Journal of Animal Science，2008，21：1753-1759.

[35]Mokaddem H，Sadaoui Z，Boukhelate N，et al. Removal of cadmium from aqueous solution by polysaccharide produced from Paenibacillus polymyxa[J] Journal of Hazardous Materials，2009，172（2-3）：1150-1155.

[36]阮敏，楊朝暉，曾光明，等.多粘類芽孢桿菌GA1所產絮凝劑的絮凝性能研究及機理探討[J].環境科學，2007（10）：2336-2341.

[37]田文祥，蹇華麗，楊幼慧，等.產胞外多糖菌的鑒定及多糖性質研究[J].食品與機械，2012，28（01）：162-165.

[38]劉振華，魏鴻剛，李元廣，等.多粘類芽胞桿菌胞外多糖在微生物農藥劑型中的功能研究[J].農藥學學報，2011，13（06）：603-607.

[39]劉振華.多粘類芽孢桿菌和海洋芽孢桿菌可濕性粉劑的研制及其加工工藝的優化與放大[D].廣州：華東理工大學，2011.

（責編：張宏民）