董云寶
山東省沂水縣動物疫病預防控制中心,山東臨沂 276400
牛結(jié)節(jié)性皮膚病(LSD)又稱牛結(jié)節(jié)疹、牛結(jié)節(jié)性皮炎或牛疙瘩皮膚病,是由山羊痘病毒屬的牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒(LSDV)引起的,以皮膚痘瘡樣結(jié)節(jié)或潰瘍,奶牛產(chǎn)奶量下降,肉牛皮張質(zhì)量下降等為主要臨床特征的牛病毒性傳染病。該病于1929年最早發(fā)現(xiàn)于贊比亞,15 年后傳入博茨瓦納、南非;20世紀70年蔓延至蘇丹、尼日利亞、毛里塔尼亞、馬里、津巴布韋、索馬里和喀麥隆等國家;2008年以后,陸續(xù)在毛里求斯、土耳其、伊拉克、約旦、黎巴嫩出現(xiàn)病例報道;阿塞拜疆、伊朗于2014年首次發(fā)現(xiàn)LSD;哈薩克斯坦、俄羅斯、塞爾維亞、納米比亞、阿爾巴尼亞、沙特阿拉伯、黑山共和國等于2016年發(fā)生該病。2019年8月12日,我國首次在新疆維吾爾自治區(qū)伊犁州發(fā)生牛結(jié)節(jié)性皮膚病[1],至今,該病已成為威脅我國養(yǎng)牛業(yè)的一大疫病并有蔓延的趨勢。
LSDV是DNA病毒,屬于痘病毒科、脊椎動物痘病毒亞科、山羊痘病毒屬,呈磚塊狀或橢圓形,大小為260~320 nm,基因組大小約為151 kbp,為較小的痘病毒。通過對該病毒的DNA分析表明,LSDV與羊痘病毒毒株之間的同源性高達80.0%,與綿羊痘病毒、山羊痘病毒的基因組核苷酸同源性高達97.0%。
LSDV對外界環(huán)境抵抗力較強,在pH值6.6~8.6之間可長期存活,在室溫甘油鹽水或細胞培養(yǎng)液中可存活4~6 個月,在干燥痂皮中可存活1 個月以上,-80 ℃下保存病變皮膚結(jié)節(jié)或組織培養(yǎng)液中的病毒可存活10 年。LSDV于55 ℃下2 h或65 ℃下30 min可滅活,20.0%乙醚、氯仿、1.0%福爾馬林也可將其滅活;對次氯酸鈉(2.0%~3.0%)、苯酚(2.0%,15 min)、碘化合物(1∶33稀釋度)和季銨鹽類化合物(0.5%)等敏感[2]。LSDV粒子對紫外線敏感,日光照射很快即可使其失去活性,但在黑暗條件下可保持活力長達幾個月。
牛是主要的易感動物,不分品種(黃牛、水牛、奶牛、瘤牛)、年齡和性別,以奶牛的易感性最高,雜交牛品種的發(fā)病率和死亡率高。綿羊、山羊等也可感染。本病不是人獸共患病,人無易感性。
LSD病牛是主要傳染源。患牛結(jié)節(jié)潰爛分泌物、脫落的痂皮中含有大量LSDV。此外病牛的血液、肌肉、奶、唾液、眼鼻腔分泌物和精液中也含有LSDV,病愈牛3 周內(nèi)體內(nèi)還含有病毒并具有傳染性。
本病通過蚊、蠅、蠓、虻等吸血節(jié)肢動物叮咬傳播,非洲蜱蟲也可充當媒介傳播本病,還可通過奶牛間相互舔舐,通過飼料、飲水等直接接觸傳染。此外,LSDV可通過母牛子宮感染胎兒,也可通過吮乳將LSDV傳播給牛犢。污染的精液也可傳播,所以在該病流行的地區(qū)和發(fā)病季節(jié),無論人工授精還是自然交配,都可能傳播LSD,所以應注意配種衛(wèi)生和引種風險[3]。
發(fā)病具有明顯的季節(jié)性,多發(fā)生于夏季至晚秋昆蟲較多的6—9月,雨后更甚。
LSD的潛伏期,自然感染為2~4 周,實驗室感染為4~12 天,平均為7 天左右。發(fā)病牛最初表現(xiàn)體溫升高到40 ℃以上,稽留熱,持續(xù)7 天左右,精神沉郁,食欲減退。泌乳牛產(chǎn)奶量顯著下降,肩前、腹股溝外、股前、后肢和耳下淋巴結(jié)等處的淺表淋巴結(jié)腫大[4]。病愈的公牛可從精液中長期排毒,導致不育;孕牛可能會流產(chǎn),后備母牛持續(xù)數(shù)月不發(fā)情,或引起不孕不育。
病牛在頸部、頭部、胸部、背部、乳房、會陰等部位的皮膚上出現(xiàn)幾個或數(shù)個疙瘩(結(jié)節(jié)),高出皮膚表面,觸診堅實并有痛感;逐漸遍及四肢及全身,有的只有局部出現(xiàn)疙瘩,有的遍及全身。疙瘩大多顯圓形,直徑2~3 cm,有的稍大,與周圍皮膚界限明顯。流口水,有鼻炎癥狀,眼睛和鼻腔流出大量黏液性分泌物,進而引起角膜炎,角膜渾濁甚至失明。隨著病情發(fā)展,皮膚疙瘩可能遍布全身,并且在口角、鼻孔以及眼結(jié)膜、口腔黏膜等可視黏膜甚至喉、氣管、食道等部位也出現(xiàn)結(jié)節(jié),嚴重影響病牛的飲食和呼吸,致其逐漸消瘦;有些大結(jié)節(jié)或多量的結(jié)節(jié),易引起病牛的四肢、胸腹、陰戶等部位皮下水腫,尤其是四肢皮下水腫[5],出現(xiàn)運動障礙,不愿走動。
皮下水腫和結(jié)節(jié)脫落,引起皮膚壞死、潰瘍和脫落,繼發(fā)細菌感染和化膿。不同部位的結(jié)節(jié)和壞死可導致不同病理變化,如氣管、肺的病變可能導致肺炎癥狀,氣管內(nèi)充滿黏液,氣管黏膜充血,局部氣管塌陷,有窒息的危險;乳房部位的結(jié)節(jié)、結(jié)痂和壞死,可能會導致乳腺炎,嚴重影響奶牛正常泌乳。
病毒分離與鑒定、電鏡觀察、實時熒光聚合酶鏈式反應(實時熒光PCR)與聚合酶鏈式反應(普通PCR方法)、血清中和試驗等方法,對LSD進行臨床病例確診。
實驗室診斷方法雖然準確,但耗時長、靈敏度低、特異性差,早期病例很難做出快速準確地診斷。使用牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒,可快速、準確地檢測LSDV,可作為診斷LSD的首選方法[6]。目前,在國家口岸檢疫中已開始使用。
重癥LSD病例具有明顯的特征性臨床癥狀,結(jié)合實驗室診斷基本能夠確診。但輕度感染的病牛,其臨床癥狀與牛偽結(jié)核棒狀桿菌皮膚病、偽牛痘、牛皰疹性乳頭炎、牛嗜皮菌病、牛皮蠅等疾病臨床表現(xiàn)類似,要注意鑒別診斷[7](表1)。

表1 LSD 的鑒別診斷
2020年7月3日,在農(nóng)業(yè)農(nóng)村部、海關總署聯(lián)合發(fā)布的第256號公告《中華人民共和國進境動物檢疫疫病名錄》中,將LSD定為一類動物傳染病。2022年2月10日,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和海關總署發(fā)布公告稱,在風險評估的基礎上,已將本病調(diào)整為二類動物傳染病。生產(chǎn)實踐中,要嚴格按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部在2019年8月19日印發(fā)的《農(nóng)業(yè)農(nóng)村部關于做好牛結(jié)節(jié)性皮膚病防控工作的緊急通知》、2020年7月10日印發(fā)的《牛結(jié)節(jié)性皮膚病防治技術規(guī)范》的要求,本著“早發(fā)現(xiàn)、早報告、早確診、早處置”的原則,切實做好LSD的防控工作,堅決制止疫情擴散蔓延,保障牛群健康和牛產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展。
牛群中如果于發(fā)燒后48 h,在頭、頸、胸、背等部位皮膚上出現(xiàn)2~3 cm的多發(fā)性、硬而凸起、界限分明的疙瘩,尤其是伴有肩前淋巴結(jié)、股前淋巴結(jié)等淺表淋巴結(jié)腫大;奶牛產(chǎn)奶量明顯下降;精神沉郁,不愿活動;眼結(jié)膜炎,鼻流清涕,口腔黏膜發(fā)炎,出現(xiàn)水皰,破潰后糜爛、潰瘍,口角流涎等典型臨床癥狀時,要立即全面排查,隔離病牛并限制移動,組織有關專家及時進行現(xiàn)場臨床診斷和流行病學調(diào)查以及樣品采集、送檢等,開展臨床鑒別診斷和實驗室檢測。
疑似LSD病例所在地縣級以上動物疫病預防控制中心要及時采集可疑病牛的皮膚痂塊、抗凝血、唾液或鼻拭子等樣品,分別向省級動物疫病預防控制中心、中國動物衛(wèi)生與流行病學中心逐級上報、檢測并確診、備份。
一旦發(fā)現(xiàn)確診病例,堅決撲殺病牛及監(jiān)測陽性牛,并進行無害化處理,嚴格隔離和監(jiān)視同群及附近健康牛,加強檢測,嚴格消毒,防止該病擴散。地面、墻壁、車輛等運輸工具,糞便等排泄物,飼草、墊料等污染物,都要進行嚴格消毒;進行有效的滅蚊蠅等吸血昆蟲及幼蟲、填埋蚊蠅滋生地等工作,防止外部病原傳入和內(nèi)部病原傳播。建立免疫帶,緊急免疫完成后1 個月內(nèi),限制同群牛移動,禁止發(fā)生疫情縣活牛調(diào)出,同時不到發(fā)生疫情的地區(qū)購買、引進牛只。加強流行病學調(diào)查,查明疫情來源和可能傳播去向,及時消除疫情隱患[8]。
加強檢疫監(jiān)督管理,認真查驗牛結(jié)節(jié)性皮膚病臨床癥狀,凡是已表現(xiàn)出明顯臨床癥狀的牛,一律不準發(fā)放檢疫合格證。
5.4.1 產(chǎn)地檢疫
產(chǎn)地檢疫發(fā)現(xiàn)疑似病例時,要根據(jù)實驗室檢測結(jié)果和流行病學調(diào)查信息,及時上報并按要求處置。對已實行疫苗免疫的牛只,應在檢疫合格證明中備注相關免疫信息。
5.4.2 屠宰檢疫
屠宰檢疫過程中,如發(fā)現(xiàn)有臨床癥狀的牛,應立即停止屠宰,隔離病牛及同群牛,已經(jīng)屠宰的,產(chǎn)品要封存,清洗、消毒屠宰設備和工具,病牛和同群牛采樣送檢,檢出的陽性牛應立即撲殺并進行無害化處理,陰性牛繼續(xù)屠宰。
5.4.3 公路檢查
公路檢查中發(fā)現(xiàn)的已有明顯臨床癥狀的牛,應就地隔離,按規(guī)定采樣、送檢,按檢驗結(jié)果采取相應處置措施。
5.4.4 邊境防控
錨地檢疫中發(fā)現(xiàn)的疑似病例,要根據(jù)《進出境動物重大疫情應急處置預案》要求,嚴格采樣、送檢,根據(jù)檢測結(jié)果,采取相應處置措施。各邊境地區(qū)畜牧獸醫(yī)部門應積極配合海關,加強引進牛的隔離、消毒、檢測、巡查等工作,禁止從牛結(jié)節(jié)性皮膚病疫情流行的國家和地區(qū)直接或間接引進牛只及相關產(chǎn)品,做好邊境地區(qū)防控。
提高牛場生物安全防護意識,設法給牛創(chuàng)造一個相對舒適的生活環(huán)境。飼養(yǎng)、屠宰、隔離等場所要嚴格按照《動物防疫條件審查辦法》的規(guī)定,符合防疫條件要求,建立并認真實施嚴格的衛(wèi)生消毒制度。同時,飼喂優(yōu)質(zhì)牧草和營養(yǎng)均衡飼料,添加適量多維素、黃芪多糖、益生菌等提高機體免疫力的物質(zhì);積極推廣使用全混合(TMR)日糧。
通過疫苗接種進行免疫預防,是本病當前主要的防控措施,但必須進行縣級畜牧獸醫(yī)主管部門報請、省級批準并報農(nóng)業(yè)農(nóng)村部備案后方可進行。我國目前并沒有針對該病的疫苗,因LSDV與羊痘病毒和山羊痘病毒同屬痘病毒,基因同源性高,具有高度交叉免疫原性,所以疫區(qū)和發(fā)現(xiàn)有發(fā)病牛的同群牛、周圍牛全部用山羊痘弱毒疫苗按照山羊的5 倍劑量皮內(nèi)注射。因皮內(nèi)注射容納疫苗量小,所以要多點(最少分5 點)皮內(nèi)注射。