化橘紅粉末飲片顆粒度適宜性研究

曾樂

摘要：為了將化橘紅原飲片粉碎分級處理，研究粉碎度對質量的影響。將化橘紅飲片粉碎成不同粒徑的粉末，分別加相當于飲片質量15倍的水量，設置水浴溫度90℃，加熱30 min，將化橘紅內柚皮苷的溶出度、高效液相色譜圖譜及浸出物量作為指標，考察不同粉粹度的影響。結果發現，2號樣品飲片粒徑為24～50目時所含有效成分柚皮苷的溶出度最大（平均為48.50 mg/g），是原樣品0號（平均為37.77 mg/g）的1.29倍;其次是3號和4號樣品，質量分數分別為47.72、47.52 mg/g。分析總浸出物測定結果發現，9號樣品的總浸出物最多，浸膏得率為21.07%;其次是8號樣品，浸膏得率為18.85%。根據上面兩項指標可知，化橘紅不是粒徑越小越好，而是粉碎度在24～50目時最佳。對化橘紅粉末飲片粉碎度進行適宜性研究，為化橘紅飲片的實際應用提供借鑒，以期在臨床上更好地發揮作用。

關鍵詞：化橘紅;柚皮苷;含量測定; HPLC;浸出物

化橘紅具有理氣寬中、燥濕化痰的功效[1-2]，主要用于治療風寒、咳嗽、痰多、胸悶，可健胃[3-4]?；偌t的成分有黃酮類、多糖[5]、香豆素類等化合物，包括柚皮苷、芳樟醇[6]及野漆樹苷等。藥用成分柚皮苷可以改善微血管通透性增強、炎癥性白細胞游走等狀況，驗證了化橘紅抗炎的作用。同時，對棉球肉芽腫也有抑制作用。但目前對化橘紅飲片顆粒度的適宜性研究不多，本研究針對化橘紅粉末飲片顆粒度進行適宜性研究，旨在為化橘紅飲片的臨床應用提供借鑒，使其在臨床上發揮更大的療效。

1 儀器與試藥

1.1 主要儀器

數顯鼓風干燥箱（GZX-9070MBE型，上海博迅實業有限公司醫療設備廠）、數控超聲波清洗器（KQ-300DB ，昆山市超聲儀器有限公司，功率40 Hz）、高效液相色譜儀（Agilent1260，美國Agilent公司）、 Agilent ChemStation工作站以及DAD檢測器（Agilent Technologies Co. Ltd.）。

1.2 試藥

柚皮苷對照品（H PL C級，純度不低于98%，批號： BCTG-0807，江西省中藥固體制劑制造技術國家工程研究中心）、醋酸（分析純，西隴化工股份有限公司）、甲醇（色譜純，Dikmapure，DIMA TECHNOLOGY Inc.）。

1.3 藥材收集與前處理

化橘紅飲片[國藥集團馮了性（佛山）藥材飲片有限公司]按照2015年版（一部）《中國藥典》Ⅱ A“藥材取樣法”稱取化橘紅藥材若干克，粉碎后用藥典篩1～9號篩分。共有10個同一批次藥材的不同粉碎度樣品，編號為0～9號。

2 柚皮苷的含量測定

2.1 HPLC色譜條件

色譜柱：依利特Sino Chrom ODS-BP 5μm，尺寸為4.6 mm×250.0 mm，柱號E1922350;流動相：甲醇-醋酸-水（35∶4∶61）;檢測波長為283 nm，柱溫為25℃，進樣量為10μL，流速為1.0 mL/min，理論板數應不低于1500。

2.2 供試品及對照品溶液的制備

2.2.1 供試品溶液的制備

模擬傳統飲片煎煮方式，0 ～9號粉末飲片各精確稱取4.0000 g，放在100 mL圓底燒瓶中，加入相當于飲片質量15倍的蒸餾水60 mL稱重，設置90℃恒溫水浴加熱30 min，過濾，放冷，加水補足質量，用0.22μm的有機濾頭過濾，取續濾液300μL放在2 mL的容量瓶中，加甲醇稀釋定容，充分搖勻，用 0.22μm的有機濾頭過濾，得到樣品制備液。

2.2.2 對照品溶液的制備

精確稱取柚皮苷對照品3.00 mg，放在5 mL容量瓶中，加溶劑甲醇溶解，搖勻定容，制成質量濃度為0.60 mg/mL的柚皮苷對照品溶液。

2.3 系統適應性實驗

精確吸取10μL對照品溶液和供試品溶液，按2.1中的色譜條件進樣，采用外標法測定指標成分的含量，在上述條件下，得到柚皮苷色譜峰理論塔板數不低于6000，分離度均大于1.5。

2.4 方法學考察

2.4.1 線性關系考察

精確吸取對照品溶液2、4、6、8、10、12μL進樣，記下峰面積，將對照品溶液質量（μg）作為橫坐標，峰面積作為縱坐標，得到柚皮苷的線性回歸方程： Y=1263.2X+9.5547，線性范圍：1.2～7.2μg（R2=0.9999）。

2.4.2 精密度實驗

按2.1中的色譜條件，精確吸取柚皮苷對照品溶液10 μ L，連續進樣5次，記下色譜峰面積分別為7 543.7、7 591.0、7577.4、7641.1、7615.0，計算柚皮苷的峰面積相對標準偏差（Relative? Standard Deviation，RSD）為0.49%，表明該儀器的精密度良好。

2.4.3 重復性實驗

精確稱取5份2號樣品粉末各2.0000 g，按2.2.1中的供試品處理方法制備，按2.1中的色譜條件進行分析，記下指標成分色譜峰面積分別為6218.3、6212.5、6038.9、6200.6、6 001.8，計算得到化橘紅中柚皮苷的峰面積RSD為1.71%，表明該方法的重現性良好。

2.4.4 穩定性實驗

按2.2.1中的方法制備2號樣品，得供試品溶液，分別在0、3、6、9、12、24 h進行測定，記下色譜峰面積分別為6 275.7、6270.5、6272.3、6275.8、6224.9、6287.6，計算得到柚皮苷的峰面積RSD為0.35%，表明樣品在24 h內穩定性較好。

2.4.5 加樣回收實驗

精確稱取6份2號樣品粉末各200.00 mg，分別加入一定量的柚皮苷對照品，按2.2.1中的方法制備樣品溶液，按2.1中的色譜條件進行色譜分析，根據測得量與加入量計算回收率，結果如表1所示，計算得到平均回收率為99.50%，RSD為1.38%，表明柚皮苷的回收率符合實驗要求，本實驗方法的準確性良好。

2.5 實驗結果

分別精確稱取0～9號不同粉碎度的化橘紅粉末樣品適量，按2.2.1中的方法制備供試品溶液，再按2.1中的色譜條件測定各樣品中柚皮苷的質量分數，結果如表2所示。

3 化橘紅粉末飲片浸出物的測定

3.1 實驗方法

分別精確稱取0～9號化橘紅飲片4.0000 g，每組各取3份放在100 mL圓底燒瓶中，加入相當于飲片質量15倍的蒸餾水60 mL稱重，90℃水浴恒溫加熱提取30 min，放冷稱重，加水補足質量，過濾，濾液置于﹣20℃的冰箱中冷凍5～6 h，再轉移至﹣80℃的環境中冷凍24 h，干燥，得水提浸出物，稱定質量。

3.2 實驗結果

精確稱定0～9號化橘紅粉末飲片干燥浸出物量，結果如表3所示。

4 結語

經測定，化橘紅粉末飲片的質量分數從大到小為2號、4號、3號、8號、9號，證明不同粉碎度對成分的溶出度有一定的影響。采用冷凍干燥法測定化橘紅粉末飲片水提取浸膏，得率高的是9號、8號，其次是0～2號?？傮w趨勢是，隨著飲片粉碎度的提高，化橘紅粉末飲片浸出物的質量分數提高，但在過濾取濾液的過程中發現，0～2號樣品的粉碎度適中，不易堵塞濾紙，過濾效率較高，同時顆粒度較大、吸附溶劑量小，損失量也相應減小，所以得率較高。3號、4號樣品的固液分離困難，吸附損失量大，過濾慢、效率低。粉碎后的中藥飲片表面積增大，提取時容易出現糊化、結焦、固液分離困難等問題，也會增加淀粉、膠質類等成分的溶出，如7～9號樣品的浸出物得率明顯高于其他組。綜合考慮柚皮苷質量分數測定和浸出物測定實驗結果，建議選擇2號樣品（粉碎度在24～50目）比較合適。

[參考文獻]

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2015版一部[M].北京：中國醫藥科技出版社，2015.

[2]葉水泉.化痰佳藥化橘紅[J].大眾健康，2015（11）：11-15.

[3]南京中醫藥大學.中藥大辭典[M].上海：上?？茖W技術出版社，2006.

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[5]黃飛龍，馬三梅.化橘紅主要有效成分的分析方法[J].安徽農學通報，2007（13）：26-28.

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