體外沖擊波對肌筋膜疼痛綜合征大鼠疼痛及五羥色胺和去甲腎上腺素的影響研究

譚同才，余艷梅，方春意，劉 勇

浙江省人民醫院，浙江杭州 310014

肌筋膜疼痛綜合征(myofascial pain syndromes，MPS)是臨床上常見的慢性疼痛，主要涉及肌肉、筋膜等軟組織[1]。MPS發生機制尚不明確，臨床主要采用非甾體類藥物、針灸、按摩、神經阻滯等治療方法[2]。近年來，臨床大量運用體外沖擊波治療MPS，取得了良好的效果[3]，但其治療機制仍鮮有研究。吳彤等[4]研究發現，五羥色胺(5-hoxytryptamine，5-HT)和去甲腎上腺素(norepinephrine，NE)與急性和慢性疼痛有較強相關性。基于此，本研究觀察體外沖擊波干預對MPS大鼠血清和局部組織中5-HT和NE含量的影響，為臨床體外沖擊波治療MPS提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試劑與主要儀器

實驗動物：采用GPower軟件，根據沃春新等[5]研究的效應量，取α=0.05，檢驗效能80%，估算樣本量為25只，考慮實驗過程中小鼠的耗損20%及5只進行模型評價，最終樣本量為35只。選取無特定病原體健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，體質量(168±31)g(由醫院動物中心提供)，大鼠分籠飼養在室溫(24±1)℃，濕度50%～60%的動物房，循環照明，白天、黑夜各12 h。本研究實施前已通過浙江省人民醫院動物保護和使用委員會批準，審批號202100044。

1.2 研究方法

1.2.1大鼠分組及干預

大鼠適應性飼養1周后，對35只健康雄性SD大鼠按隨機數字表選取10只作為空白組，另外25只進行MPS造模后隨機選取5只進行模型評價，成功后將剩余20只隨機分為模型組10只和沖擊波組10只。空白組接受常規喂養，不參與造模；模型組在造模后無需干預，僅接受常規喂養；沖擊波組造模成功后常規喂養1周，再行沖擊波干預。

1.2.2MPS大鼠造模

25只大鼠接受“打擊結合離心運動法”造模[6]：停止喂養12 h后，腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠，并選擇大鼠右大腿內側的近端作為標記并固定在大鼠打擊固定板(自制木板)上，打擊木質物長為0.5 m，總負荷達1.2 kg，從高20 cm處下落擊打大鼠右大腿內側定點標記部位。造模第2天將大鼠放入電動跑臺進行下坡跑訓練(坡度-16°，速度16 m/min，時間90 min)，每周1次，連續8周。

1.2.3肌筋膜疼痛大鼠造模成功的評價

造模完成后，隨機選取25只MPS大鼠中的5只處死并解剖，暴露四頭肌，找到觸發點，發現以下4條陽性標準均符合即為造模成功[7]：局部找到明顯緊張帶和膨大結節；在膨大結節處進行肌電圖測試，無刺激下電位持續30 s以上，小于10 min；電極插入膨大結節時有局部抽搐；對解剖取得的條索、肌肉結節或帶形組織進行病理NE染色，顯示肌纖維收縮結節、肌纖維寬度不等、炎性浸潤、纖維增生。

1.2.4沖擊波干預方法

常規喂養1周后行腹腔麻醉，在大鼠的右大腿內側肌處采用F15探頭(storzMP100型)行0.16 mJ/mm2，300次，1.3 Hz的沖擊波治療，每周1次，連續3周。

1.3 評價方法

1.3.1熱痛閾的測定

分別在造模成功后和沖擊波干預3周后，測試大鼠的熱痛閾值。測試方法：采用Ankier熱板實驗法[8]，熱平板溫度為(52.0±0.2)℃，將大鼠置于平板上，記錄其開始接觸平板到抬起后爪或舔后爪的時間，為避免組織損傷，接觸平板時間不超過45 s。測量3次后取平均值為熱痛閾值(每次間隔時間不小于20 min)。

1.3.2血清及局部組織中5-HT和NE含量

采用酶聯免疫反應法測定血清中5-HT、NE含量。步驟：造模及分組處理后，禁食12 h；腹主動脈采血1 mL；37℃水浴15 min；4 000 r/min離心10 min；分離血清，-20℃保存待測；450 nm酶標儀上讀取各孔的吸光度值；以吸光度值為縱坐標，相應的標準品含量為橫坐標，繪制標準曲線；根據標準曲線換算出5-HT、NE含量。測定局部組織中5-HT、NE含量：分離股四頭肌觸發點(膨大結節處)的局部組織，低溫等滲鹽水沖洗后，-70℃冰箱保存待測。勻漿處理后，行酶聯免疫反應法檢測相應因子，方法同上。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0統計軟件進行分析，計量資料用均數±標準差表示。根據正態性及方差齊性，采用單因素方差分析進行組間比較，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組大鼠熱痛閾比較

造模完成時，模型組、沖擊波組與空白組相比，熱痛閾值縮短(P<0.05)，模型組和沖擊波組相比，差異無統計學意義(P>0.05)。3周后，空白組和模型組熱痛閾時間與造模完成時比較差異無統計學意義(P>0.05)，沖擊波組大鼠熱痛閾時間長于造模完成時(P<0.05)，且與空白組比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 三組大鼠右大腿內側肌熱痛閾的比較s

2.2 三組大鼠血清5-HT和NE含量比較

3周后，模型組和沖擊波組大鼠血清中5-HT、NE含量高于空白組，差異均有統計學意義(P<0.05)，且沖擊波組血清中5-HT、NE含量低于模型組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 三組大鼠血清5-HT和NE含量比較 ng·mg-1

2.3 三組大鼠局部觸發點組織中5-HT和NE含量比較

因測得的股四頭肌觸發點處肌肉組織中5-HT、NE的含量太低，故將數據轉換為“含量的負log值(下稱：-log值)”進行統計分析。沖擊波干預后，空白組和沖擊波組大鼠局部組織中5-HT、NE含量的-log值均高于模型組，差異均有統計學意義(P<0.05)；且沖擊波組與空白組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 三組大鼠觸發點組織中5-HT和NE含量的-log值比較

3 討論

3.1 體外沖擊波干預可緩解MPS大鼠疼痛及降低大鼠5-HT和NE含量

有研究報道，觸發點是MPS產生疼痛的基礎，部分病理基礎是由于局部硬結處代謝緩慢，大量炎性致痛物堆積，如5-HT和NE等[9]。因5-HT和NE是MPS觸發點產生疼痛的重要介質，在外周神經系統中具有誘發和加重疼痛的作用，很多研究以治療前后5-HT和NE的濃度來判斷臨床療效[10]。本研究結果顯示，干預3周后，沖擊波組熱痛閾時間相比造模完成時延長(P<0.05)，且與空白組比較差異無統計學意義(P>0.05)，說明沖擊波可以緩解MPS大鼠的肌肉疼痛；沖擊波組血清5-HT、NE含量低于模型組(P<0.05)，高于空白組(P<0.05)；沖擊波組觸發點組織中5-HT、NE含量的-log值高于模型組(P<0.05)，且與空白組比較差異無統計學意義(P>0.05)。既往研究指出MPS大鼠血清和局部組織高5-HT、NE含量是MPS的主要特征[4]。本研究結果顯示，沖擊波治療可降低MPS大鼠血清中的5-HT、NE含量，促使觸發點組織中5-HT、NE含量恢復至正常，具有治療MPS的作用。

3.2 體外沖擊波干預治療MPS的應用前景和優勢

MPS是一種常見的軟組織疾病，目前沒有一致的診斷標準和治療方法，主要的治療策略是破壞受累肌肉的張力帶和觸發點[11]。金冉等[12]通過meta分析發現體外沖擊波緩解MPS患者疼痛的治療效果優于針灸、推拿按摩和牽伸訓練。研究認為，體外沖擊波主要是通過空化效應和疼痛阻滯效應來達到治療目的[13]。空化效應是沖擊波作用下，人體組織中所含的大量微小氣泡急速膨脹、破裂后出現高速液體微噴射，產生撞擊效應，釋放出巨大能量，并產生高溫、高壓的微射流，有利于疏通閉塞的微細血管，松解關節軟組織的粘連。疼痛阻滯效應是指體外沖擊波刺激人體疼痛受體，改變受體接受疼痛的速度和周圍化學介質的組成，抑制神經末梢細胞，減緩疼痛的傳遞，減輕局部疼痛。

3.3 對臨床護理工作的啟示

由于運動減少、肌張力異常、姿勢不良等各種原因導致的MPS比較常見，通常需要醫護技團隊合作，聯合多種方式進行治療。本研究為體外沖擊波治療MPS提供了部分證據。同時，體外沖擊波操作較為簡便，醫護技人員易于掌握，在康復護理中，除了常規護理內容外，還可以使用體外沖擊波等理療儀器，從而使患者獲得更好的康復護理效果。