2個小蘑菇屬中國新記錄種

劉偉　陳言柳　張林平　梁俊峰

摘? 要：對采自廣東省的2份小磨菇屬Micropsalliota標本進行鑒定，采用形態鑒定和ITS序列比對相結合的方法，最終將這2份標本鑒定為二瓣小蘑菇（Micropsalliota bifida R.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde）和亞白小蘑菇（Micropsalliota subalba Heinem. & Little Flower），前者的模式產地在泰國，后者在印度，二者在我國均為首次發現。二瓣小蘑菇主要的識別特征為子實體小型，菌蓋成熟后純白色;菌褶離生，不等長，密，幼時白色，成熟后褐色，菌環白色;擔孢子橢圓形至杏仁形，光滑;褶緣囊狀體17.6～32.0??m×4.6～7.4??m，頂部有時分裂成兩瓣，簇生，光滑，薄壁，側生囊狀體缺失;菌蓋皮層由平伏的菌絲組成。亞白小蘑菇的主要識別特征為子實體小型，菌蓋表面被輻射狀纖毛;菌褶離生，不等長，具小菌褶，密;菌環上位，白色;擔孢子橢圓形，光滑，薄壁;褶緣囊狀體25.6～56.5??m×7.1～12.6??m，成簇，棒狀至槌形，無色，光滑，側生囊狀體缺失，菌蓋皮層由平伏的菌絲組成。本研究提供了二者詳細的形態描述、顯微線條圖及與它們相關的系統發育樹，并分析其與相近種在形態上的區別。本研究結果增加了該屬在我國分布的種類和地理區域。

關鍵詞：小蘑菇屬;分類學;分子系統學;新紀錄中圖分類號：S324 ?????文獻標識碼：A

Two New Records of the GenusMicropsalliota from China

LIU Wei CHEN Yanliu ZHANG Linping LIANG Junfeng

1. Lishui Baiyunshan Ecology Forest Farm， Lishui， Zhejiang 323000， China; 2. Research Institute of Tropical Forestry， Chinese Academy of Forestry， Guangzhou， Guangdong 510520， China; 3. Key Laboratory of State Forestry Administration on Forest Ecosystem Protection and Restoration of Poyang Lake Watershed / Key Laboratory of Bacteria Resources Conservation and Utilization in Jiangxi Province / Jiangxi Agricultural University， Nanchang， Jiangxi 330045， China

Abstract： In this paper， two samples ofMicropsalliota collected from Guangdong Province were classified and identified. A method of combining morphological comparison and gene sequence was used. Finally， the two specimens were identified as Micropsalliotabifida R.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde andMicropsalliota subalbaHeinem. & Little Flower， both of them are new record species in China.M. bifidais characterized in its small fruiting body， pure white pileus when mature， free and crowded lamellae， white when young， then brown when mature， white annulus， oval to almond-shaped and smooth basidiospores， hyaline and smooth cheilocystidia， sometimes bifid with two toe-like lobes， 17.6～32.0??m×4.6～7.4??m， absent pleurocystidia， and pileipellis composed of creeping hyphae.M. subalbais characterized in its small fruiting body， pileus surface with radial cilia， free and crowded lamellae， white and superior annulus， oval and smooth basidiospores， 25.6～56.5??m×7.1～12.6??m， clustered， hyaline， and smooth cheilocystidia， absent pleurocystidia， and pileipellis composed of creeping hyphae. Furthermore， the detail description， illustrations and phylogenetic tree are provided， and the differences in morphology with similar species are analyzed in this paper. To this end， the species and geographical regions of this genus in China are added.

Keywords： Micropsalliota; taxonomy; phylogeny; new records

DOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2022.04.006

小蘑菇屬（MicropsalliotaH?hn.）是蘑菇科（Agaricaceae）中較小的成員之一，與磨菇屬（Agaricus）親緣關系較近，但該屬的擔子果更小而細長^[1]。截至2020年，世界范圍內分布63種（http：//www.speciesfungorum.org/Names/Names.asp），大部分分布于熱帶地區。目前，我國共報道11種，即Micropsalliota arginophaeaHeinem.、M. brunneosperma var. cortinataHeinem.、M. furfuraceR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde、M. globocystisHeinem.、M. gracilisHeinem.、M. lateritiaHeinem.、M. megarubescensR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde、M. megasporeR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde、M. pseudoargineaHeinem.、M. pseudoglobocystisLi Wei & R.L. Zhao、M. rubrobrunnesceR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde ^[1-9]。

在對粵港澳大灣區大型真菌資源調查中，發現了2個小蘑菇屬中國新記錄物種，二瓣小蘑菇（Micropsalliota bifida R.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde）和亞白小蘑菇（Micropsalliota subalba Heinem. & Little Flower），擴大了該屬在我國的分布種類和區域范圍，為其從熱帶區過渡至亞熱帶區提供了數據支持。

1 ?材料與方法

1.1 標本采集

標本于2020年8月采自廣東省惠州市羅浮山風景區和南山公園，采集時拍攝新鮮子實體

生境照，用錫箔紙包裹放入采集盒，室內記錄宏觀形態后，將標本放入50℃的烘箱內烘干，最后用自封袋保存。標本保存于中國林業科學研究院熱帶林業研究所真菌標本館（RITF）。

1.2 形態研究

宏觀形態依據野外觀察記錄和生境照片;微觀形態描述依據干燥標本徒手切片觀察，使用5%的KOH溶液進行樣品形態的復原和固定，1%剛果紅溶液進行染色，隨機選取成熟的擔孢子、擔子、囊狀體和菌蓋皮層菌絲進行測量和繪圖。描述孢子時以字母x表示平均值，Q表示長寬比，Q_m表示Q±標準差，n表示測量個數^[1]。

1.3分子系統研究

采用Ezup柱式真菌基因組DNA抽提試劑盒（上海生工生物工程技術服務有限公司）提取總DNA，ITS4/ITS5為目的片段擴增引物^[10]，PCR產物送往上海生工生物科技有限公司進行測序，所獲基因序列與NCBI數據庫比對并上傳。構建系統發育樹所用的序列信息見表1。利用ContigExpress軟件進行序列拼接^[11];使用在線MAFFT version 7軟件進行序列比對^[12];BioEdit軟件用于序列的手動調整^[13];借助RaxML v7.2.6軟件進行最大似然（maximum likelihood，ML）分析，經1000次重復獲得統計學支持^[14];利用MrModeltest 2.3軟件計算出序列矩陣的最佳模型為GTR+I+G^[15];采用MrBayes 3.1軟件進行貝葉斯分析^[16]運行一百萬代;Hymenagaricus epipastus和三硫色蘑菇（Agaricus trisulphuratus）作為外類群^[1]。

2? 結果與分析

2.1形態學特征描述

2.1.1? 二瓣小蘑菇（Micropsalliota bifidaR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde，圖1）? 子實體小型;菌蓋直徑6～21 mm，幼時斗笠形或鐘形，成熟后凸鏡形至平展或平凹，幼時淡黃色，中間褐色，表面干，無毛或被白色細纖毛，具條紋，成熟后光滑，純白色，邊緣略內卷，在KOH中變紅褐色;菌肉薄，白色，不變色;菌褶離生，不等長，具小菌褶，密，幼時蒼白色、淺灰色至淡黃褐色，成熟后灰褐色、褐色至深褐色;菌柄長30～46?mm，粗1～2?mm，圓柱形，白色，近光滑或稍被絨毛;菌環白色，膜質，上位，易脫落;無明顯的氣味和味道。

擔孢子3.8～4.7??m×2.3～2.8??m，[x=（4.2± 0.21）?m×（2.6±0.14）?m，Q=1.4～1.9，Q_m=1.59±0.09，n=40]，橢圓形至杏仁形，有時頂部變厚，褐色，光滑，薄壁，無芽孔;擔子9.8～12.3??m×3.9～ 5.6??m，短棒狀，具4個小梗，有時具2個，無色，薄壁;褶緣囊狀體17.6～32??m×4.6～7.4??m，寬棒狀至近槌形，頂部有時分裂成兩瓣，簇生，無色，光滑，薄壁;側生囊狀體缺失;菌蓋皮層由平伏菌絲組成，菌絲直徑1.6～5.6??m，圓柱形，無色，薄壁;鎖狀聯合缺失。

生境：群生于闊葉林中地上或枯枝上。

分布：泰國（模式產地）、中國廣東。

研究標本：2020年8月22日，廣東省惠州市羅浮山風景區，23°15′54″N，114°3′27″E，海拔90 m，張錦花、潘雪玉（RITF4915，RITF4917）。

2.1.2? 亞白小蘑菇（Micropsalliota subalbaHeinem. & Little Flower，圖2）? 子實體小型;菌蓋8～18?mm，凸鏡形至近平展，中央具小的臍突，蓋表被輻射狀纖毛，白色至淺褐色;菌肉白色，薄，不變色;菌褶離生，不等長，具小菌褶，菌褶中間略寬，密，白色至灰褐色;菌柄長20～30?mm，粗1～1.5?mm，圓柱形，中空，褐色，被白色細微纖毛;菌環脫落，上位，白色;無明顯的氣味和味道。

擔孢子4.9～6.8??m×2.9～4??m，[x=（5.6± 0.40）??m×（3.3±0.19） ?m，Q=1.5～1.8，Q_m=1.69±0.07，n=40]，橢圓形，在KOH溶液中呈褐色，光滑，薄壁;擔子11.5～17??m×4.9～6.8??m，棒狀，具4個小梗，偶具2個，無色，具顆粒，稍厚壁（>0.5??m）;褶緣囊狀體25.6～56.5??m×7.1～ 12.6??m，成簇，棒狀至槌形，無色，光滑，稍厚壁（>0.5??m）;側生囊狀體缺失;菌蓋表皮由平伏菌絲組成，末端細胞近棒狀至近紡錘形，23.2～69.2??m×4.8～ 9.6??m，菌絲直徑2.7～16??m，無色，薄壁;鎖狀聯合缺失。

生境：群生于地上。

分布：印度（模式產地）、泰國、中國廣東。

研究標本：2020年8月21日，廣東省惠州市南山公園，23°3′40″N，114°24′2″E，海拔30 m，陳言柳（RITF4594）。

2.2 系統發育研究

基于ITS序列，采用最大似然法和貝葉斯法構建系統發育樹，二者形成的拓撲一致，僅僅在支持率上略有不同，因此，本研究僅展現最大似然法結果（圖3）。從圖3可見，本研究的自采標本與泰國的標本聚在一起形成獨立的分支，并獲得較高的支持率。自采標本二瓣小蘑菇（M. bifida，RITF 4915和RITF 4917）與來自泰國的標本二瓣小蘑菇（M. bifida）聚在一起，獲得較高的支持率（82%的靴帶支持和1.0的后驗概率），并與來自泰國的標本亞白小蘑菇（M. subarginea）有較近的親緣關系。自采標本亞白小蘑菇（M. subalba，RITF4594）與來自泰國的標本亞白小蘑菇（M. subalba）聚在一起，獲得96%的靴帶支持和1.0的后驗概率，并與來自老撾的M. gracilis有較近的親緣關系。

3 ?討論

基于ITS的系統發育結果，自采標本二瓣小蘑菇（M. bifida，RITF4915和RITF4917）和亞白小蘑菇（M. subalba，RITF4594）均屬于小蘑菇屬的類群，并分別與來自泰國的標本亞白小蘑菇（M. subalba）和二瓣小蘑菇（M. bifida）聚在一起，其形態特征也與小蘑菇屬的特征相符合。

二瓣小蘑菇（M. bifida，RITF4915和RITF4917）與ZHAO等^[1]對其模式標本的描述無明顯差異，該種的主要識別特征為菌蓋白色、光滑，擔孢子小及緣生囊狀體兩頭膨大^[1]。還有一些具有白色菌蓋的物種，如亞白小蘑菇（M. subarginea）、M. arginea、磚紅小蘑菇（M. lateritia）、擬白色小蘑菇（M. pseudoarginea）、白小蘑菇（M. alba），宏觀特征不易與二瓣小蘑菇區分。但M. subarginea有更長、彎曲、圓柱形至近頭狀的緣生囊狀體（30～60??m×4～8??m）^[17];M. arginea有膨大近頭狀的緣生囊狀體^[1];M. lateritia有更長的孢子（4.5～5.8??m×2.6～3.2??m）、近頭狀的緣生囊狀體（20～40??m×9～18??m）及菌蓋成熟后變紅褐色^[17];M. pseudoarginea的擔子更長（17～19??m×6～6.7??m），有橢球形至寬棒狀的緣生囊狀體^[18];M. alba有更小的子實體、更大的擔孢子（5.8～6.6??m×3.3～3.6??m）及寬頭狀的緣生囊狀體^[19]。

亞白小蘑菇（M. subalba）的主要形態特征為子實體小型，菌蓋中央具小的臍突，表面被輻射狀纖毛，有3種小菌褶，擔孢子橢圓形，緣生囊狀體多頭狀，簇生，菌蓋皮層毛皮型，遇氨水呈橄欖灰色，遇KOH呈褐色。采自我國的標本（RITF4594）與源自印度的模式標本及ZHAO等^[1]采自泰國的標本在菌柄顏色上略有差異，但在顯微特征上無明顯區別;并且基于ITS的系統發育樹結果顯示，自采標本亞白小蘑菇（M. subalba，RITF4594）與泰國的標本聚在一支，其序列同源性高達99%。

基于上述原因，將我國的標本鑒定為亞白小蘑菇。M. subalba與M. gracilis具有較近的親緣關系，區別在于后者的菌蓋被淡紅褐色的鱗片或糠麩和更窄的緣生囊狀體（27～43??m×5～9??m）。

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