復(fù)合微生態(tài)制劑對肉雞生長性能和血液生化指標(biāo)的影響

謝 富，李麗娟

（1.青島蔚藍(lán)生物股份有限公司，青島 266100；2.大名縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北 大名 056900）

在現(xiàn)代養(yǎng)殖過程中，疾病頻發(fā)、混合感染嚴(yán)重，抗生素的濫用、抗生素的殘留已造成耐藥菌株的出現(xiàn)和社會食品安全問題[1]。隨著國家禁抗政策法規(guī)的出臺，尋找新的養(yǎng)殖模式勢在必行。目前微生態(tài)制劑作為替抗產(chǎn)品的首選，可以提高動物生產(chǎn)性能和改善動物腸道問題，腸道又是動物機(jī)體最大的免疫器官。國外在很早就研究表明，益生菌能改善動物的生長性能[2-3]，我國最近幾年對微生態(tài)制劑的研究也比較多。微生態(tài)制劑是將已知的有益微生物經(jīng)現(xiàn)代生物工程技術(shù)進(jìn)行培育而得。微生態(tài)制劑的使用效果與菌種的來源、菌種的組成、生產(chǎn)工藝都有直接關(guān)系。好的菌種生產(chǎn)的微生態(tài)制劑能有效補(bǔ)充畜禽消化道的有益微生物，具有改善消化道菌群結(jié)構(gòu)、提高機(jī)體抗病力、促進(jìn)機(jī)體代謝、提高飼料吸收利用的作用，從而達(dá)到防治消化道疾病和促進(jìn)生長等多重作用。微生態(tài)制劑與抗生素相比，具有無殘留、無毒副作用、不產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，符合綠色環(huán)保飼料添加劑的要求，可預(yù)防禽類疾病和保障畜禽產(chǎn)品安全，是抗生素的替代途徑之一[4]，所以篩選好的微生態(tài)菌種、經(jīng)過工藝優(yōu)化，生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的微生態(tài)制劑可有效地減少抗生素的使用。本試驗(yàn)通過在肉雞飼養(yǎng)的不同時(shí)段添加微生態(tài)制劑，觀察微生態(tài)制劑對肉雞生產(chǎn)性能的影響，以期為肉雞生產(chǎn)中應(yīng)用微生態(tài)制劑替代抗生素提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

試驗(yàn)選用1 日齡、體重為（40.02±1.16）g 的科寶肉雞240 只，隨機(jī)分為4 個(gè)處理，每個(gè)處理5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12 只。各處理間科寶肉雞初始體重經(jīng)方差分析差異不顯著（P＞0.05）。

1.2 復(fù)合微生態(tài)制劑、疫苗及試劑

復(fù)合微生態(tài)制劑，由青島某生物微生態(tài)研發(fā)中心提供，主要由丁酸梭菌、枯草芽孢桿菌、乳酸菌代謝產(chǎn)物組成，活菌數(shù)為100億·g-1。

新城疫傳-染性支氣管炎滅活疫苗，由青島某生物疫苗研發(fā)中心提供。疫苗于7日齡首免、21日齡二免。

免疫球蛋白IgG、IgA和IgM試劑盒，由南京建成生物工程研究所有限公司提供。

1.3 試驗(yàn)場地和時(shí)間

試驗(yàn)于2021年5月1日—6月11日在青島蔚藍(lán)生物集團(tuán)有限公司動物試驗(yàn)基地進(jìn)行。

1.4 試驗(yàn)日糧及營養(yǎng)水平

試驗(yàn)前測定各種飼料原料的營養(yǎng)成分，按科寶肉雞營養(yǎng)需要配制雜粕型基礎(chǔ)日糧。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。基礎(chǔ)日糧中添加復(fù)合微生態(tài)制劑，維生素預(yù)混料中不添微生態(tài)制劑。試驗(yàn)共分4個(gè)處理組，第Ⅰ組在21日齡～上市階段日糧中添加復(fù)合微生態(tài)制劑1 kg·t-1，第Ⅱ組分別在1～5日齡、10～18 日齡、25 日齡～上市三個(gè)不同階段日糧中添加復(fù)合微生態(tài)制劑1 kg·t-1，第Ⅲ組在1～42 日齡（全程）日糧中添加復(fù)合微生態(tài)制劑1 kg·t-1，第Ⅳ組日糧中不添加任何添加劑，作為對照組。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.5 試驗(yàn)期與飼養(yǎng)管理

整個(gè)試驗(yàn)期為42 d，試驗(yàn)肉雞于平層網(wǎng)上飼養(yǎng)，每個(gè)網(wǎng)格飼養(yǎng)12 只肉雞，雞舍通風(fēng)良好。試驗(yàn)期溫度控制要求：1～7日齡為33～35 ℃，8～14日齡為29～32 ℃，15～21日齡為28～25 ℃，22～28日齡為21～24 ℃。免疫按肉雞正常免疫程序進(jìn)行，1 日齡和21 日齡免疫，試驗(yàn)雞采用人工喂料，自由采食，供給充足清潔的飲水，建立穩(wěn)定的飼養(yǎng)管理制度，避免試驗(yàn)肉雞受到驚嚇和干擾。

1.6 指標(biāo)測定

1.6.1 生產(chǎn)性能

試驗(yàn)肉雞從1 日齡開始飼養(yǎng)到42 日齡時(shí)試驗(yàn)結(jié)束，在1 日齡和42 日齡時(shí)對所有肉雞進(jìn)行空腹稱重，并計(jì)算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）及飼料效率（G/F）。

1.6.2 血樣采集及血液中新城疫抗體效價(jià)、免疫球蛋白水平

在試驗(yàn)第7、21、35、42天從各處理的每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取2只試驗(yàn)肉雞，進(jìn)行翅靜脈采血，分別在37 ℃水浴鍋里傾斜放置30 min，然后3 000 r·min-1離心15 min，分離出血清。-20 ℃冰柜中保存，用于血液免疫指標(biāo)和新城疫抗體效價(jià)的測定。新城疫抗體效價(jià)測定根據(jù)GB/T 16550—2020《新城疫診斷技術(shù)》方法進(jìn)行。

1.7 數(shù)據(jù)分析

所得數(shù)據(jù)采用SAS 8.0 軟件的ANOVA 法進(jìn)行方差分析，采用用Duncan's法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同階段添加復(fù)合微生態(tài)制劑對肉雞生產(chǎn)性能的影響

測定各組雞生產(chǎn)性能指標(biāo)，結(jié)果見表2。

從表2中可以看出，第Ⅱ組、第Ⅲ組肉雞末重顯著提高（P＜0.05）、飼料效率及死亡率顯著降低（P＜0.05），平均日增重、平均日采食量沒有顯著性變化（P＞0.05）；第Ⅰ組和第Ⅳ組的各指標(biāo)均差異不顯著（P＞0.05）；第Ⅱ組和Ⅲ組平均日增重、末重、平均日采食量、飼料效率及死亡率均差異不顯著（P＞0.05）。

表2 不同階段添加復(fù)合微生態(tài)制劑對肉雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 復(fù)合微生態(tài)制劑對肉雞新城疫抗體效價(jià)的影響

測定各試驗(yàn)組雞血液中新城疫抗體效價(jià)，結(jié)果見表3。

從表3可以看出7日齡和21日齡免疫后，新城疫抗體效價(jià)水平都大幅度提升，都能起到免疫保護(hù)作用，飼糧添加復(fù)合微生態(tài)制劑對抗體有增加作用但均無顯著差異（P＞0.05），第Ⅱ組和第Ⅲ組抗體水平高于其他2組，但差異不顯著（P＞0.05）。

表3 不同階段試驗(yàn)雞新城疫抗體效價(jià)lb

2.3 復(fù)合微生態(tài)制劑對肉雞免疫球蛋白水平的影響

測定試驗(yàn)雞免疫球蛋白水平，結(jié)果見表4。

從表4可以看出，添加復(fù)合微生態(tài)制劑對1～42日齡肉雞IgA影響比較小，各個(gè)處理組均無顯著差異（P＞0.05），但無論是階段性添加還是全程添加都提高了IgA 的濃度。1～21 日齡肉雞免疫指標(biāo)IgG，添加微生態(tài)處理組（第Ⅱ組、第Ⅲ組）顯著高于沒有添加微生態(tài)制劑組的第Ⅳ組（P＜0.05）。1～42日齡期間添加微生態(tài)組的肉雞IgG各處理組均差異不顯著（P＞0.05）；全程添加比階段性添加機(jī)體IgG含量高，但差異不顯著（P＞0.05）。

表4 不同階段試驗(yàn)雞免疫球蛋白水平 mg·mL-1

3 討 論

3.1 微生態(tài)制劑對肉雞生產(chǎn)性能的影響

我國多采用歐洲效益指數(shù)，即通過對雞群的體重、成活率、料重比、生產(chǎn)管理等指標(biāo)進(jìn)行綜合性評價(jià)，歐洲效益指數(shù)數(shù)值越大表明養(yǎng)殖效益越高[5]。本試驗(yàn)使用的復(fù)合微生態(tài)制劑由丁酸梭菌、枯草芽孢桿菌、乳酸菌及其代謝產(chǎn)物組成，微生態(tài)制劑在動物體內(nèi)產(chǎn)生豐富的有益活性代謝產(chǎn)物，其產(chǎn)生的纖維素酶和蛋白酶等酶類可補(bǔ)充腸道內(nèi)源酶的不足，有效分解飼料中非淀粉多糖，促進(jìn)飼料的消化吸收。丁酸梭菌和乳酸菌產(chǎn)生大量細(xì)菌素可以抑制病原菌的生長，乳酸菌和丁酸梭菌屬于厭氧菌，在腸道內(nèi)代謝形成厭氧環(huán)境，給有益菌提供厭氧和酸性環(huán)境[6]。產(chǎn)生的細(xì)菌素可以抑制病原菌的生長，減少動物的發(fā)病率，提高成活率，最終提高生產(chǎn)性能。孫全友等[7]研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加微生態(tài)制劑也能顯著提高肉雞的生長性能。郝生宏等[8]研究發(fā)現(xiàn)，微生態(tài)制劑能改善雛雞的生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)中，在1～42 日齡肉雞不同階段添加復(fù)合微生態(tài)制劑均能提高肉雞的生產(chǎn)性能，全程添加和分三個(gè)階段添加對生產(chǎn)性能影響不顯著，但均高于單獨(dú)一個(gè)階段添加。

3.2 復(fù)合微生態(tài)制劑對機(jī)體免疫球蛋白水平的影響

枯草芽孢桿菌的表面抗原或代謝產(chǎn)物能夠通過刺激粒細(xì)胞的吞噬活動來充當(dāng)免疫原，通過產(chǎn)生抗體和提高嗜菌作用等刺激免疫，增強(qiáng)機(jī)體特異性和非特異性免疫反應(yīng)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬活性，使動物免疫力增強(qiáng)[9]。由B淋巴細(xì)胞生成的免疫球蛋白是人體免疫系統(tǒng)的主要組成部分，可通過對特異性抗原及外來抗原起到排除作用而發(fā)揮免疫作用，可提高動物機(jī)體的抗病力。其中IgA對病原體入侵機(jī)體起到防護(hù)作用，是機(jī)體最重要的初級免疫應(yīng)答，起到抗感染作用；IgG 通常為機(jī)體感染的指標(biāo)，可中和游離毒素，是機(jī)體免疫的重要抗體；IgM在機(jī)體感染后最早產(chǎn)生，在早期免疫防御中起到關(guān)鍵作用[10]。

大量研究表明，在日糧中添加微生態(tài)制劑對肉雞的中樞器官和組織細(xì)胞發(fā)育及免疫功能都有很好的促進(jìn)功能[11]，對抗體也有促進(jìn)功能[12-14]，芽孢桿菌進(jìn)入腸道后作用于腸系膜淋巴結(jié)的淋巴組織，可以提高IgG和分泌型免疫球蛋白A（sIgA）的水平。

從本試驗(yàn)數(shù)據(jù)也能夠看出，添加復(fù)合微生態(tài)制劑無論是新城疫抗體水平還是IgA、IgM、IgG含量都有提高，IgG的提高水平較大，這一點(diǎn)也很好地說明了微生態(tài)制劑的作用效果，全程添加和多階段添加效果較好。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下有以下結(jié)論：

①在日糧中添加復(fù)合微生態(tài)制劑，無論是分階段添加還是全程添加對肉雞日增重、成活率及免疫性能都有提高。

②在日糧中全程添加復(fù)合微生態(tài)制劑和分三個(gè)階段添加在肉雞生產(chǎn)性能和免疫指標(biāo)上沒有顯著差異，但與沒有添加復(fù)合微生態(tài)制劑組在生產(chǎn)性能和免疫指標(biāo)上都有顯著提高。

③在飼養(yǎng)后期添加復(fù)合微生態(tài)制劑較沒有添加微生態(tài)組生產(chǎn)性能和免疫指標(biāo)有所提高，但差異不顯著，根據(jù)肉雞的生理結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，早期腸道菌群沒有健全的基礎(chǔ)上，在日糧中越早添加復(fù)合微生態(tài)制劑對肉雞的生產(chǎn)性能和免疫力的提高越有幫助。