涎腺類似乳腺分泌性癌與腺泡細胞癌的臨床病理學特征比較

殷憲剛，陳潔，王素英，許珊珊

涎腺類似乳腺分泌性癌（MASC）是一種新定義的涎腺腫瘤，現已被收錄至2017年第4版WHO頭頸腫瘤分冊，其具有獨特的臨床、形態、免疫表型和遺傳學特征，其中遺傳學上存在t（12；15）（p13；q25）易位，形成ETV6-NTRK3基因融合[1]。MASC被分類定義前，常被診斷為腺泡細胞癌（AciCC），其次是被診斷為低級別非特異性癌等。但相較于AciCC，MASC患者預后較差，且更易發生淋巴結轉移。因此，明確MASC、AciCC臨床癥狀、病理特征及瘤組織的免疫組織化學特征，可為臨床MASC的鑒別診斷提供參考。本文現報道5例MASC和5例AciCC，重點表述上述兩種腫瘤的臨床病理學特征及免疫表型，并結合相關文獻進行探討，以加深臨床對MASC和AciCC的認識。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年6月至2021年12月寧波市臨床病理診斷中心收治的5例MASC患者及5例AciCC患者，所有患者均為男性，病程3～10年，年齡21～64歲，中位年齡47歲，過往均無手術史。

1.2 方法 所有手術切除標本均用3.7%中性甲醛固定，常規乙醇脫水，石蠟包埋，制成5 m左右厚度的組織切片。免疫組化染色采用EnVision二步法，其一抗包括DOG-1、MUC-4、S-100，蘇木精-伊紅染色試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。BX53熒光顯微鏡購買自日本奧林巴斯公司。

1.2.1 蘇木精-伊紅染色 5 m染色組織切片經過梯度酒精復水后，用蘇木精溶液染色5 min，然后在1%酸性乙醇（1%HCl/70%乙醇）中浸泡5 min，然后用蒸餾水沖洗。然后再用伊紅溶液染色3 min，分級酒精脫水，二甲苯透明。采用中性樹膠封片，最后使用顯微鏡觀察和拍照。

1.2.2 免疫組織化學染色 5 m組織切片經過梯度酒精復水后，先后用抗原回收液孵育后，再用3%H2O2孵育30 min，水沖洗載玻片，并與一抗在4℃下孵育過夜。次日沖洗載玻片，用相應的二抗再孵育30 min后，分別用二氨基聯苯胺（DAB）和蘇木精染色。然后使用顯微鏡觀察并拍照。采用Image-Pro Plus 6.0軟件分析DAB染色。

1.3 結果判讀 實驗結果均由3位富有經驗的病理醫師進行核查。采用半定量計數方法，DOG-1以胞膜和胞質出現棕黃色染色為陽性，MUC-4以胞漿或胞膜出現棕黃色染色為陽性，S-100以胞質和胞核棕黃色為陽性。陽性強度判讀：在高倍鏡（×400）下選取10個代表性視野，計算細胞陽性率（陽性瘤細胞數/總瘤細胞數）×100%。細胞陽性率0～5%為陰性，6%～10%為灶陽性，11%～50%為中度陽性，51%～100%為彌漫強陽性。

2 結果

2.1 MASC與Aci CC患者的臨床特征MASC和Aci CC患者均表現出緩慢長大的無痛性腫塊，且質地較為硬實，腫瘤活動性差。MASC患者的平均無瘤生存期短于AciCC患者，頸部淋巴結轉移的發生率高于Aci CC。

2.2 MASC與Aci CC瘤體的大體特征MASC腫瘤直徑0.7～5.5 cm，中位直徑為2.1 cm；腫瘤無包膜，但邊界尚清楚或浸潤性生長；腫瘤切面呈灰黃、灰紅結節狀，伴有出血或囊性變。AciCC腫瘤直徑1.0～8.0 cm，中位直徑為3.0cm；腫瘤為界限清楚的結節，可以有包膜，往往不完整；腫瘤切面呈灰白色或紅褐色，瘤體質地軟，多為實性，可見出血和囊性變。見封三彩圖6。

2.3 MASC與AciCC的瘤體組織病理特征 MASC細胞呈中等大小或較小，細胞呈圓形、卵圓形、立方形及多邊形，胞質較豐富，呈嗜酸性均質狀，有時含空泡；腫瘤細胞核呈圓形及卵圓形，大小及形態較為一致；腫瘤排列方式呈實性巢狀、囊狀、微囊狀或者濾泡狀。AciCC腫瘤細胞以漿液性腺泡細胞為特征；腫瘤細胞排列呈實體狀、梁狀、條索狀、腺泡狀及微囊狀。見封三彩圖7。

2.4 MASC與AciCC的瘤體組織免疫組化染色觀察 MASC中DOG-1呈陰性，S-100呈強陽性，MUC-4呈陽性或者局灶陽性；Aci CC中DOG-1呈強陽性，S-100呈陰性（或局灶陽性），MUC-4呈陰性。見封四彩圖1。

3 討論

在2010年，Skálová等[2]首次報道MASC，該研究發現16例涎腺腫瘤與乳腺分泌性癌具有相同的形態學特征、免疫表型等，且具有特異的遺傳學改變，由此命名為MASC。隨后，國內外學者對該腫瘤類型逐步展開研究。目前，有關MASC和AciCC的鑒別診斷研究較少，本研究通過收集MASC和AciCC病例，探討兩者在臨床特征、病理特征及免疫組織化學上的區別，對MASC的臨床診斷與治療具有重要意義。

3.1 臨床特點 MASC發病年齡范圍廣，成人、兒童均可發病，且該病多發于男性。腮腺是該病最常見的部位，其次發于頜下腺、口腔小涎腺[3]。大多數MASC患者通常表現為腮腺區緩慢增長的無痛性腫物，少數患者表現為疼痛和面神經癱瘓，通常由常規口腔檢查或甲狀腺疾病的影像學評估時發現。本研究納入病例均為男性，病程3～10年，年齡21～64歲，中位年齡47歲；且MASC和AciCC患者均表現出緩慢生長的無痛性腫塊，且質地較為硬實，腫瘤活動性差；并發現MASC患者的平均無瘤生存期要短于AciCC患者，且頸部淋巴結轉移的發生率遠高于AciCC患者，與文獻[4]報道的臨床特點一致。

3.2 臨床病理特征 MASC呈邊界清楚且無包膜的腫塊，腫瘤切面呈灰白、灰黃、灰紅色，多伴有囊性變，且囊腔內含暗紅色或淡黃色液體，或形成巨大囊腔[5]。本研究納入病例顯示，MASC腫瘤直徑0.7～5.5 cm，中位直徑為2.1 cm；其腫瘤無包膜，但邊界尚清楚或者浸潤性生長，且腫瘤切面常呈現灰黃、灰紅結節狀，伴有出血或囊性變。MASC細胞呈中等大小或較小，細胞呈圓形、卵圓形、立方形及多邊形，胞質較豐富，呈嗜酸性均質狀，有時含空泡；腫瘤細胞核呈圓形及卵圓形，大小及形態較為一致；腫瘤排列方式呈實性巢狀、囊狀、微囊狀或濾泡狀。AciCC腫瘤直徑1.0～8.0 cm，中位直徑3.0 cm；腫瘤為界限清楚的結節，可以有包膜，往往不完整；腫瘤切面呈灰白色或紅褐色，瘤體質地軟，多為實性，可見出血和囊性變。AciCC腫瘤細胞則主要以漿液性腺泡細胞為特征，其腫瘤細胞排列呈實體狀、梁狀、條索狀、腺泡狀及微囊狀。

3.3 免疫組織化學特點 MASC腫瘤內微囊及小管樣腔隙中的分泌物呈耐淀粉酶消化的過碘酸雪夫（PAS）染色陽性及黏蛋白卡紅染色陽性。MASC瘤細胞CK7、CK8、CK18、S-100、Vimentin常呈彌漫強陽性，CK19、GCDFP-15、EMA、MUC1和MUC4，STAT5a、Mammaglobin常呈強陽性[6-8]。在本研究中，MASC中DOG-1呈陰性、S-100呈強陽性、MUC-4呈陽性或局灶陽性；AciCC中DOG-1呈強陽性、S-100呈陰性（或局灶陽性）、MUC-4呈陰性，可見MASC、AciCC兩種腫瘤DOG-1、S-100、MUC-4表達差異較大，以此聯合檢測鑒別具有重要意義。張金蓮等[9]研究顯示，MASC腫瘤中S-100、Vimentin及CK7均呈彌漫強陽性，Mamaglobin呈強陽性，其中S-100與本研究結果類似，均呈陽性表達。Serrano-Arévalo等[10]報道的4例MASC中，S-100、STAT5及鉬靶蛋白均呈陽性表達,且該學者提出AciCC的免疫表型中S-100、STAT5及乳腺磁珠蛋白呈陰性表達。

3.4 鑒別診斷 MASC與AciCC鑒別診斷包括：（1）MASC患者平均無瘤生存期短于AciCC患者，且頸部淋巴結轉移的發生率遠高于AciCC患者。（2）AciCC多發于女性，且輕度嗜堿性酶原顆粒狀的細胞質，罕見乳頭狀囊性結構。經淀粉酶處理后兩者均呈PAS陽性結果，在AciCC中則呈顆粒狀，但在MASC中呈球狀（即黏液）。另外，據Guilmette等[11]研究表明，MASC具有獨特的超微結構特征，能夠同經典的AciCC的進行鑒別，MASC細胞型由條紋/插層的導管細胞分化組成，經典的細胞型即表現出腺泡細胞分化。（3）免疫表型：MASC中DOG-1呈陰性，S-100、MUC-4呈陽性，AciCC中DOG-1呈陽性，S-100、MUC-4呈陰性。（4）還可通過遺傳學檢測是否存在ETV6-NTRK3融合基因，AciCC不存在該基因融合。

3.5 治療與預后 MASC是當前公認的一種低度惡性涎腺腫瘤，其生物學行為相對惰性，25%的病例可能會出現淋巴結轉移，遠處轉移較為少見。目前，臨床治療MASC首選手術切除，腮腺全切除聯合頸部淋巴結清掃術較部分腮腺切除、單純腫塊切除的患者復發風險低，若出現淋巴轉移者可以輔助化療。2016年有學者研究顯示，MASC伴有ETV6-X融合基因、非典型融合基因具有更高的侵襲性，并提出ETV6-NTRK3融合基因易位可能是MASC的治療靶點[12]。

綜上所述，MASC是一種新近認識的涎腺低度惡性上皮源性腫瘤，少數病例可以復發及淋巴結轉移，可結合臨床特征、組織學及DOG-1、S-100、MUC-4檢測，將其與AciCC鑒別區分，臨床病理醫生需進一步加強對其診斷要點的認識，以避免臨床誤診和漏診。