子癇前期患者血清晚期氧化蛋白產(chǎn)物及髓過氧化物酶表達水平及其臨床意義〔1〕

王碩石，鐘梅，廖義鴻*

(1.深圳市人民醫(yī)院，暨南大學第二臨床醫(yī)學院，南方科技大學第一附屬醫(yī)院，廣東 深圳 518020；2.南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院，廣東 廣州 510515)

子癇前期是產(chǎn)科常見的妊娠并發(fā)癥，其主要表現(xiàn)為妊娠20周以后出現(xiàn)的高血壓、蛋白尿等，病情嚴重時可以誘發(fā)心、腦、腎、胎盤等多臟器功能障礙，是目前圍產(chǎn)期母胎死亡的主要原因之一[1-2]。多年來，各國科學家和醫(yī)務工作者們對子癇前期的發(fā)病機制和防治方法進行了大量的臨床和基礎研究，但是尚無一個單一方法能夠盡早預測子癇前期。因此，尋找分子標記物早期診斷子癇前期，對降低孕婦病死率、減少母胎不良結局有重要意義。氧化應激學說在子癇前期發(fā)病機制中占有一席之地[3]。晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)是具有高度生物活性的氧化應激代謝產(chǎn)物，本課題組前期研究表明，AOPP在子癇前期患者的外周血及胎盤中高表達，說明AOPP從氧化應激的角度參與子癇前期的發(fā)病過程[4]。髓過氧化物酶(MPO)可以誘導產(chǎn)生活性氧(ROS)，促進脂質過氧化[5]。本研究通過檢測子癇前期孕婦血清中AOPP和MPO表達水平，評估兩因子對疾病的診斷價值，希望能夠為臨床診治妊娠期高血壓疾病(尤其是子癇前期)提供新思路和新方向。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年9月—2020年10月收治的50 例子癇前期孕婦，根據(jù)病情嚴重程度分為輕度子癇前期(MPE)組25 例和重度子癇前期(SPE)組25 例，選取同期產(chǎn)檢的孕婦25 例為對照組。子癇前期的診斷依據(jù)教材婦產(chǎn)科學(第九版)標準[6]。排除標準：試管嬰兒、雙胎、各類慢性病(糖尿病、慢性高血壓等)及系統(tǒng)性疾病(血液系統(tǒng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)疾病等)。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器及試劑

低溫離心機(美國貝克曼庫爾特有限公司)；-80 ℃低溫冰箱(南京貝登醫(yī)療股份有限公司)；多功能酶標儀(上海閃譜生物科技有限公司)；MPO ELLSA試劑盒(碧云天生物科技有限公司)、AOPP檢測試劑盒(南方醫(yī)科大學免疫學教研室提供)。

1.2.2 酶聯(lián)免疫吸附法檢測

抽取5 mL肘靜脈血于EDTA抗凝管中，3 000 r/min離心30 min，收集上清液，保存于-80 ℃低溫冰箱中。酶聯(lián)免疫吸附法(ELLSA)法檢測各組血清MPO及AOPP的濃度。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結 果

2.1 一般資料比較

三組年齡、孕周、體質量指數(shù)(BMI)等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；收縮壓及舒張壓比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(見表1)。

表1 三組一般資料比較

2.2 三組MPO及AOPP表達水平比較

SPE組和MPE組血清MPO，AOPP表達均高于對照組(P<0.05)，且SPE組高于MPE組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(見表2)。

表2 三組MPO及AOPP水平比較

2.3 血清MPO及AOPP水平對子癇前期患者的診斷價值

ROC曲線顯示，MPO和AOPP可作為診斷子癇前期患者的標志物，當MPO≥40.45 μg/L，AOPP≥52.35 μmol/L時，呈高特異度和敏感度。聯(lián)合應用AOPP及MPO診斷價值優(yōu)于單獨應用AOPP或MPO診斷價值(見表3和圖1)。

表3 血清MPO及AOPP對子癇前期患者的診斷價值

圖1 血清MPO及AOPP診斷子癇前期的ROC曲線

3 討 論

子癇前期是妊娠期高血壓的一種類型，嚴重時多器官功能不同程度受損。《婦產(chǎn)科學》(人衛(wèi)版)既往教材中將子癇前期分為輕度及重度；但是最新版(第9版)《婦產(chǎn)科學》將SPE認為是MPE逐步發(fā)展到嚴重狀態(tài)[7]。在臨床工作中，由于輕度子癇前期和重度子癇前期在治療和終止妊娠的時機上仍有很大差別，我們依然將二者區(qū)別對待。子癇前期是孕婦特有的疾病，病因及發(fā)病機制不明，病情復雜，往往進展迅速，嚴重危及母胎的生命安全。目前沒有先進的預測和診治方法，如果病情持續(xù)加重，需終止妊娠，造成許多早產(chǎn)兒或者低體質量兒的出生，給家庭及社會造成各種負擔。因此，早期預測和診斷子癇前期，制訂合理且個體化的診治方案，降低子癇前期對母胎的危害，有重要的社會意義。AOPP在1996年由法國學者Witko-Sarsat等[8]第一次在全世界報道。最近發(fā)現(xiàn)肥胖、高齡、糖尿病、代謝綜合征、多囊卵巢綜合征等有子癇前期高危因素婦女中普遍存在慢性AOPP高表達[9]。目前關于AOPP與子癇前期的研究不多，汪琳和王欣[10]研究發(fā)現(xiàn)，子癇前期患者的血漿AOPP水平顯著升高，AOPP與24 h尿蛋白定量及血漿光抑素水平呈正相關，認為AOPP可能通過誘導單核細胞產(chǎn)生更多活性氧，加重慢性炎性反應過程，間接造成了腎臟功能的損傷。韓靜等[11]認為，孕婦如果患有SPE合并胎兒宮內(nèi)生長受限(FGR)，其血清中胱抑素C及AOPP表達水平顯著高于正常孕婦，且母嬰妊娠結局不良者的血清胱抑素C及AOPP表達水平顯著高于預后良好者，說明子癇前期孕婦AOPP表達用于預測不良妊娠結局、指導診療方案、降低母嬰近遠期并發(fā)癥有重要意義。本課題組近10年來一直在不斷地深入研究AOPP參與子癇前期發(fā)病機制的過程，且前期研究已明確子癇前期孕婦的血漿及胎盤組織中AOPP明顯高表達。本研究再次證實，AOPP在子癇前期患者血漿中的濃度明顯高于正常對照組，且重度子癇前期組明顯高于輕度子癇前期組，與前期研究結論一致[4]，說明AOPP不僅與子癇前期密切相關，而且與病情嚴重程度密切相關。本課題組進一步深入研究發(fā)現(xiàn)，AOPP可以下調滋養(yǎng)細胞增殖、侵襲和分化能力，并上調滋養(yǎng)細胞凋亡來干擾妊娠滋養(yǎng)細胞的生物學功能[12]；AOPP可能通過還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)通路介導了妊娠滋養(yǎng)細胞的凋亡[13]；AOPP通過上調活性氧簇的表達，加重生物體氧化應激狀態(tài)[14]。研究發(fā)現(xiàn)[15]，除了氧化應激，AOPP還參與子癇前期血管內(nèi)皮功能障礙等致病環(huán)節(jié)，它通過上調滋養(yǎng)細胞抗血管生成因子，參與髓過氧化物酶阻擊病原侵入生物體。髓過氧化物酶本質是白細胞酶，隸屬于過氧化物酶家族[16]。現(xiàn)有研究認為[17]，MPO作為介質可以促進多種氧化物的形成，對心血管系統(tǒng)產(chǎn)生損害。MPO可以修飾低密度脂蛋白并將其過氧化，形成氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)，OX-LDL被單核巨噬細胞侵噬后形成泡沫細胞；泡沫細胞大量聚集在血管內(nèi)皮上，導致血液淤積、流速緩慢等一系列心血管事件的發(fā)生。黃偉聰和周曉梅[18]研究發(fā)現(xiàn)，MPO可以通過多種途徑加速血管內(nèi)皮細胞損傷，誘發(fā)調節(jié)炎性反應：首先，MPO與肌酸激酶結合后沉積于內(nèi)皮細胞表面，隨后進入胞質，下調緩激肽的表達和釋放，抑制血管張力；其次，MPO誘導產(chǎn)生組織因子，從而使血管內(nèi)皮細胞損傷甚至凋亡，而血管內(nèi)皮損傷/凋亡恰恰是子癇前期發(fā)病的學說之一，結合本論文研究結果，MPO高表達于子癇前期患者血清中，且SPE組顯著高于MPE組。因此可以認為MPO參與子癇前期的發(fā)病。

本研究發(fā)現(xiàn)子癇前期患者血清中AOPP和MPO的表達水平均高于同期正常產(chǎn)檢的孕婦，而且兩者均與子癇前期的嚴重程度密切相關，說明AOPP與MPO在誘導氧化應激及血管內(nèi)皮損傷方面具有協(xié)同作用。血清AOPP和MPO檢測簡單易行。本研究進一步通過ROC曲線分析結果提示，AOPP和MPO可作為診斷子癇前期的生物學標記物，且建議兩者聯(lián)合應用，以取得更有效的診斷價值。因此，聯(lián)合應用AOPP及MPO診斷子癇前期，可能會更早地發(fā)現(xiàn)和預測子癇前期，為改善母嬰不良妊娠結局提供新的思路。子癇前期嚴重影響孕產(chǎn)婦及其胎兒/新生兒，尤其是當其進展到較為嚴重程度時，會引起多個器官功能的受累，甚至母嬰死亡。