李 敏,魏春秀,金春艷,曹舒舒,高 霞
(1.菏澤學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物工程學(xué)院微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 菏澤 274015; 2.山東省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站,山東 濟(jì)南 250100;3.濱州市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,山東 濱州256600)
酸奶是牛奶經(jīng)乳酸菌發(fā)酵而制成的一種奶制品.酸奶在發(fā)酵的過(guò)程中,乳中脂肪被分解為脂肪酸,乳糖轉(zhuǎn)化成乙醇、乳酸等小分子物質(zhì),酸奶比鮮奶更有易于身體健康,且質(zhì)地細(xì)膩,風(fēng)味濃郁等特點(diǎn),深受國(guó)內(nèi)外消費(fèi)者的喜好,自2017年以來(lái),酸奶消費(fèi)額增長(zhǎng)速度遠(yuǎn)超純牛奶[1].
牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr.)是多年生灌木,具有較高的觀賞和藥用價(jià)值,在中國(guó)已有2 000年的栽培歷史,分布于全國(guó)各地.牡丹渾身都是寶,中醫(yī)古書記載牡丹根用在桂附地黃丸[2]、肝康復(fù)水丸劑[3]和其他中藥方劑中,主治寒熱,中風(fēng),驚癇邪氣,除瘀血,安五臟,療癰瘡,心腦血管等疾病[4].牡丹籽油因含有較高的亞麻酸,于2011年3月被中國(guó)衛(wèi)生部列入“新資源食品”——食用油之一,被有關(guān)專家稱為“世界上最好的油”[5].牡丹花被開發(fā)成花脯[6]、牡丹花茶[7]等產(chǎn)品.在牡丹花中占較大比例的牡丹花蕊研究主要有:牡丹花蕊醇提取物的有效成分(如:蘆丁、槲皮素和芍藥苷等),具有顯著降低小鼠的血糖指數(shù),提高HUVEC 細(xì)胞的抗氧化能力[8-9].羅磊從牡丹花蕊中提取黃酮,發(fā)現(xiàn)其具有提高RAW264.7巨噬細(xì)胞抗氧化性,并存在劑量的依賴性[10].研究發(fā)現(xiàn),牡丹花蕊中還含有一定含量的角鯊烯[11]、阿拉伯糖、沒(méi)食子酸、亞麻酸等營(yíng)養(yǎng)成分[8].總的來(lái)看,牡丹花蕊的研究主要集中在功能成分提取、含量測(cè)定及其生理功能.將牡丹花蕊的功能成分開發(fā)成產(chǎn)品鮮有報(bào)道,本文將牡丹花蕊提取液按一定的比例與牛奶混合,在乳酸發(fā)酵劑作用下形成具有天然、營(yíng)養(yǎng)、健康和保健功能的牡丹花蕊酸奶,本研究旨在為牡丹花蕊酸奶工業(yè)化生產(chǎn)提供理論支持.
牡丹花蕊、乳酸發(fā)酵劑、蔗糖、奶粉.
1.2.1 牡丹花蕊提取液制備
取牡丹花花蕊→40 ℃下烘干至恒重→去除花藥→獲得干燥的花蕊→浸泡30 min(牡丹花蕊∶水=1∶4)→榨汁→過(guò)濾→獲得牡丹花蕊提取液.
1.2.2 酸奶制作過(guò)程
牛奶→按一定比例與牡丹花蕊提取液混合→均質(zhì)→加入蔗糖、乳酸發(fā)酵劑→混合均勻→灌裝→發(fā)酵→冷藏→牡丹花蕊酸奶成品.
1.3.1 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
1) 奶水比對(duì)牡丹花蕊酸奶的影響
將奶粉與水按1∶4,1∶5,1∶6,1∶7,1∶8比例混合形成液態(tài)奶,添加牡丹花蕊提取液為5%、乳酸發(fā)酵劑添加量為1%、蔗糖添加量為6%,置于42 ℃下發(fā)酵,4 ℃下冷藏6 h,即得到不同奶水比的牡丹花蕊酸奶.不同處理進(jìn)行三次重復(fù),后面所有實(shí)驗(yàn)處理均進(jìn)行三次重復(fù).
2) 蔗糖添加量對(duì)牡丹花蕊酸奶的影響
將奶粉與水按1∶6比例混合形成液態(tài)奶,添加牡丹花蕊提取液為5%、乳酸發(fā)酵劑添加量為1%、蔗糖添加量為2%,4%,6%,8%,10%,置于42 ℃下發(fā)酵,4 ℃下冷藏6 h,即得到不同蔗糖添加量的牡丹花蕊酸奶.
3) 牡丹花蕊提取液添加量對(duì)牡丹花蕊酸奶的影響
將奶粉與水按1∶6比例混合形成液態(tài)奶,添加牡丹花蕊提取液為0%,5%,10%,15%,20%、乳酸發(fā)酵劑添加量為1%、蔗糖添加量為6%,置于42 ℃下發(fā)酵,4 ℃下冷藏6 h,即得到不同牡丹花蕊提取液的牡丹花蕊酸奶.
4) 乳酸發(fā)酵劑添加量對(duì)牡丹花蕊酸奶的影響
將奶粉與水按1∶6比例混合形成液態(tài)奶,添加牡丹花蕊提取液為5%、乳酸發(fā)酵劑添加量為0.5%,1%,1.5%,2%,2.5%、蔗糖添加量為6%,置于42 ℃下發(fā)酵,4 ℃下冷藏6 h,即得到不同發(fā)酵劑添加量的牡丹花蕊酸奶.
5) 發(fā)酵溫度對(duì)牡丹花蕊酸奶的影響
將奶粉與水按1∶6比例混合形成液態(tài)奶,添加牡丹花蕊提取液為5%、乳酸發(fā)酵劑添加量為1%、蔗糖的添加量為6%,分別置于34 ℃、38 ℃、42 ℃、46 ℃、50 ℃下發(fā)酵,4 ℃下冷藏6 h,即得到不同溫度下的牡丹花蕊酸奶.
1.3.2 牡丹花蕊酸奶優(yōu)化
在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,通過(guò)正交試驗(yàn)對(duì)奶水比,牡丹花蕊提取液添加量,蔗糖添加量,乳酸發(fā)酵劑添加量,發(fā)酵溫度等5因素進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn),各因素水平表,見(jiàn)表1所示.

表1 正交因素水平表
1.3.3 牡丹花蕊酸奶的感官評(píng)價(jià)和理化指標(biāo)
1) 牡丹花蕊酸奶的感官評(píng)價(jià)
牡丹花蕊酸奶的感官評(píng)價(jià)由本專業(yè)老師和學(xué)生共15人對(duì)其進(jìn)行品評(píng)和打分,處理評(píng)價(jià)結(jié)果取平均值,評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表2.

表2 牡丹花蕊酸奶感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

續(xù)表
2) 牡丹花蕊酸奶理化指標(biāo)
a. 乳清析出測(cè)定
將成品酸奶杯輕輕傾斜,觀察是否有乳清析出,若有乳清析出,收集乳清稱重,用公式 (1)計(jì)算乳清析出率.

(1)
b.失重測(cè)定
失重為酸奶發(fā)酵前:奶+瓶的質(zhì)量為M1,酸奶發(fā)酵后:奶+瓶的質(zhì)量為M2,二者差值即為失重,即公式(2).
失重=M1-M2
(2)
c.酸度測(cè)定
根據(jù) GB 5009.239-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品酸度的測(cè)定》測(cè)定酸奶酸度.
d.酸奶持水性測(cè)定
準(zhǔn)確稱取成品酸奶20 g,置于3 000 r/min離心20 min,傾出上清液,稱量M1.計(jì)算公式如下.
持水性(%)=[(20-M1)/20]×100%
(3)
e.脫水收縮值測(cè)定
稱取10 g成品酸奶,置于裝有定量濾紙的漏斗中過(guò)濾,漏斗下放置刻度試管,靜止2 h,讀取試管體積V,按公式(4)計(jì)算酸奶脫水收縮值.
脫水收縮值(%)=(V/10)×100%
(4)
從表3可以看出,隨著奶水比的增加,牡丹花蕊酸奶失重呈現(xiàn)先增加后下降的趨勢(shì),在奶水比為1∶7時(shí)失重達(dá)到最大為1.14±0.205 g,但與其他處理相比不呈現(xiàn)顯著性差異;酸度隨著奶水比增加呈現(xiàn)逐漸下降趨勢(shì),各處理差異顯著,這可能是因?yàn)?∶4奶水比的干物質(zhì)含量高,利于微生物的生長(zhǎng)和繁殖,從而產(chǎn)酸較多;牡丹花蕊酸奶持水性隨著奶水比的增加呈現(xiàn)下降趨勢(shì),且奶水比超過(guò)1∶6時(shí),各處理持水性差異不顯著;奶水比1∶4的脫水收縮值與其他處理相比呈現(xiàn)顯著性差異,1∶5和1∶6的奶水比差異不顯著.1∶8奶水比有乳清析出,乳清析出率為0.89%,其他配比均無(wú)乳清析出.因此適宜奶水比為1∶6.

表3 不同奶水比對(duì)牡丹花蕊酸奶的影響
從表4可以看出,隨著蔗糖添加量的增加,牡丹花蕊酸奶均無(wú)乳清析出,失重和脫水收縮值并無(wú)顯著差異,但是脫水收縮值隨蔗糖添加量的增加而增加,這可能是因?yàn)檎崽谴龠M(jìn)乳酸菌快速生長(zhǎng),產(chǎn)酸量過(guò)多所致;牡丹花蕊酸奶酸度呈現(xiàn)下降趨勢(shì),蔗糖添加量2%或4%的酸奶酸度略高于其他的添加量,但二者差異不顯著.隨著蔗糖添加量的增加,持水性呈現(xiàn)增加趨勢(shì),2%蔗糖添加量的持水性與其他處理相比呈現(xiàn)顯著差異.考慮各理化指標(biāo),適宜的蔗糖添加量為4%.

表4 不同蔗糖添加量對(duì)牡丹花蕊酸奶的影響
從表5可以看出,隨著牡丹花蕊提取液添加量的增加,牡丹花蕊酸奶失重、酸度和脫水收縮值無(wú)顯著性差異,牡丹花蕊提取液0~5%添加量酸奶酸度顯著高于10%以上的添加量;脫水收縮值呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì),當(dāng)添加量為15%時(shí),脫水收縮值達(dá)到最大為32%±0.045%.持水性隨著添加量的增加呈現(xiàn)下降趨勢(shì),添加量0~5%、10%~15%和20%之間均呈現(xiàn)顯著性差異,牡丹花蕊提取液添加量為20%時(shí),酸奶的持水性最差為58.19%±0.021%,酸奶質(zhì)地不均勻.根據(jù)酸度和持水性,牡丹花蕊提取液的適宜添加量為5%.

表5 不同牡丹花蕊提取液添加量對(duì)牡丹花蕊酸奶的影響
從表6可以看出,隨著乳酸發(fā)酵劑添加量的增加,牡丹花蕊酸奶均無(wú)乳清析出,失重、酸度和脫水收縮值均無(wú)顯著性差異,酸奶酸度隨乳酸發(fā)酵劑添加量的增加而增加,這可能與乳酸菌數(shù)量的增加使其產(chǎn)酸較多而致;乳酸發(fā)酵劑添加量2.5%與0.5%的持水性呈現(xiàn)顯著差異,而其他三個(gè)處理無(wú)顯著性差異.

表6 不同乳酸發(fā)酵劑添加量對(duì)牡丹花蕊酸奶的影響
從表7可以看出,隨著牡丹花蕊酸奶發(fā)酵溫度的增加,牡丹花蕊酸奶失重和脫水收縮值無(wú)顯著性差異.酸度則隨著溫度的增加呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),38~46 ℃發(fā)酵酸奶的酸度顯著高于34 ℃和50 ℃,這可能是因?yàn)闇囟冗^(guò)高或過(guò)低均抑制微生物的生長(zhǎng),微生物的數(shù)量少,產(chǎn)酸略低.在34~38 ℃下發(fā)酵形成的酸奶持水性無(wú)差異,但其持水性顯著優(yōu)于50 ℃.所有溫度處理下的牡丹花蕊酸奶均無(wú)乳清析出.綜合考慮各指標(biāo),牡丹花蕊酸奶的適宜發(fā)酵溫度為42 ℃.

表7 不同溫度對(duì)牡丹花蕊酸奶的影響
在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上對(duì)5因素(奶水比、蔗糖、牡丹花蕊提取液、乳酸發(fā)酵劑和溫度)進(jìn)行正交優(yōu)化,以感官評(píng)價(jià)為標(biāo)準(zhǔn),如表8所示.牡丹花蕊酸奶的最佳配方為奶水比1∶7,蔗糖添加量3%,牡丹花蕊提取液添加量5%,乳酸發(fā)酵劑添加量0.8%,42 ℃時(shí)的發(fā)酵溫度最佳.5因素對(duì)牡丹花蕊酸奶感官品質(zhì)影響的大小順序?yàn)椋簻囟?牡丹花蕊提取液>蔗糖添加量>乳酸發(fā)酵劑添加量>奶水比.

表8 牡丹花蕊酸奶正交優(yōu)化表
本文通過(guò)5因素進(jìn)行牡丹花蕊酸奶的單因素實(shí)驗(yàn),獲得相對(duì)適宜的單因素分別為 奶水比為1∶6,蔗糖添加量為4%,牡丹花蕊提取液添加量為5%,乳酸發(fā)酵劑添加量為1%,在42 ℃下發(fā)酵較好.在單因素的基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)獲得牡丹花蕊酸奶的最佳配方和最佳發(fā)酵溫度為奶水比1∶7,蔗糖添加量3%,牡丹花蕊提取液添加量5%,乳酸發(fā)酵劑的添加量為0.8%,發(fā)酵溫度42 ℃.