高危型人乳頭瘤病毒聯合薄層液基細胞學對宮頸癌及癌前病變患者診斷效能的影響

趙 衛，劉萌萌

洛陽市疾病預防控制中心門診部，河南 洛陽 471023

宮頸癌是臨床婦科多發惡性腫瘤疾病，嚴重威脅女性生命健康，需及時采取可靠診療措施［1-2］。由于宮頸癌前病變進展至宮頸癌需較長時間，而早期宮頸癌具有可治愈性，因此及早確診、及時治療具有重要意義［3-4］。高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）檢測是臨床診斷宮頸癌常用的診斷方式，具有良好靈敏性，但單獨應用時極易出現假陽性率高現象，導致特異度相對較低。近年來，薄層液基細胞學（TCT）逐因具有可重復性、非創傷性特點逐漸受到臨床關注，但在宮頸早期病變診斷中漏診可能性較大。為此，研究嘗試探討HR-HPV聯合TCT對宮頸癌及癌前病變診斷效能的影響，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年2 月—2018 年11 月洛陽市疾病預防控制中心166 例疑似宮頸癌患者作為研究對象。納入標準：均存在宮頸炎癥狀，均未處于月經期，均無子宮頸錐切或子宮切除病史，均無盆腔放療史，既往無宮頸癌及癌前病變病史，患者均知情并簽訂知情同意書。排除標準：存在其他生殖系統惡性腫瘤疾病，處于月經期。研究對象年齡28～64 歲，平均年齡（41.05±4.73）歲，孕次0～6 次，平均孕次（3.02±0.54）次，產次0～4 次，平均產次（2.14±0.27）次，其中伴有宮頸糜爛118 例。研究經洛陽市疾病預防控制中心醫學倫理委員會審批通過。

1.2 方法

正在月經期女性應該在月經結束后72 h接受檢查，檢查前24 h 禁止性生活，不在月經期的女性均需于檢查前72 h 禁止性生活、陰道內用藥、陰道沖洗。均經由常規4點取材活檢，行病理組織學檢查，于陰道鏡下活檢，分別對0、3、6、9 點等病變處取樣后采用中性福爾馬林（10%）將病理組織標本固定后送至病理科進行檢查。（1）HR-HPV 檢查方法：采用窺陰器暴露宮頸，將宮頸與宮頸周圍黏液擦拭干凈，于宮頸外口處采用專用采樣刷（由美國Digene公司提供）采集標本，逆時針旋轉（3周），并停留10 s，于存有1 mL保存液的標本保存管內放置分泌物標本，密封，保存于2～8 ℃條件下。采用聚合酶鏈式反應（PCR）熒光法、實時定量PCR 儀檢測HR-HPV，共13 種（68、59、58、56、52、51、45、39、35、33、31、18、16）。（2）TCT 檢查方法：于宮頸口、宮頸管內采用TCT 專用毛刷（由美國Digene 公司提供）采集脫落細胞，完成后立即將脫落細胞樣本放置于有細胞保存液的TCT 專用取樣瓶中，進行漂洗，并搖晃均勻，確認密封好后，送檢。采用全自動細胞制片機（美國賽迪公司）進行制片，保存完好上皮覆蓋率在10%以上為滿意涂片，之后采取巴氏染色，進行鏡檢。

1.3 診斷標準

（1）HR-HPV 診斷標準［5］：RLU/CO 比值≥1.0 判定為陽性。（2）TCT 診斷標準［6］：采用TBS 分級系統對薄層細胞進行分級。①細胞學顯示正常。②細胞學顯示良性改變。③細胞學顯示異常改變，分為非典型性鱗狀細胞、低度鱗狀上皮內病變［輕度不典型增生病變（CINⅠ）及HPV 感染所致的細胞改變］、高度鱗狀上皮內病變［中度CIN（CINⅡ）、重度CIN（CINⅢ）］、鱗癌（SCC）。非典型性鱗狀細胞及以上判定為陽性。（4）任一結果呈陽性則判定為聯合診斷陽性。（5）CINⅠ及以上判定為病理活檢陽性。

1.4 觀察指標

（1）病理結果。（2）HR-HPV、TCT 檢查結果。（3）HR-HPV、TCT 診斷效能。（4）對比不同CIN 分級與宮頸癌患者HR-HPV、TCT陽性率。

1.5 統計學方法

采用SPSS 25.0 軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t 檢驗。計數資料以例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病理結果

病理結果證實，在所有166 例疑似宮頸癌及癌前病變患者中，炎癥74 例，宮頸癌及癌前病變患者92 例，包括CINⅠ級16 例，CINⅡ級20 例，CINⅢ級24 例以及宮頸癌32例。

2.2 HR-HPV、TCT檢查結果

HR-HPV 檢查陽性94 例，陰性72 例，其中誤診18例，漏診16 例。TCT 檢查陽性86 例，陰性80 例，其中誤診17 例，漏診23 例。兩者聯合檢查108 例陽性，58 例陰性，其中誤診18例，漏診2例，見表1。

表1 HR-HPV、TCT檢查結果 例

2.3 HR-HPV、TCT診斷效能情況

HR-HPV 聯 合TCT 診 斷 準 確 率87.95% （95%CI 為0.758～0.903） 高 于 兩 者 單 項 檢 查79.52% （95%CI 為0.681～0.867）、75.90%（95%CI 為0.662～0.831），敏感度97.83%（95%CI 為0.736～0.890）高于兩者單項檢查，診斷敏感度82.61%（95%CI為0.736～0.890）、75.00%（95%CI 為0.653～0.827），差 異 有 統 計 學 意 義（P＜0.05）。HR-HPV 聯合TCT 診斷特異度75.68%（95%CI 為0.648～0.840） 與 兩 者 單 項 檢 查75.68% （95% CI 為0.648～0.840）、77.03%（95%CI 為0.663～0.851）相比，差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 HR-HPV、TCT診斷效能情況 例（%）

2.4 不同CIN 分級與宮頸癌患者HR-HPV、TCT 陽性率情況

宮頸癌患者HR-HPV、TCT 陽性率100.00%、96.97%高于CINⅢ級（74.07%、66.67%）、CINⅡ級（72.22%、61.11%）、CINⅠ級患者（71.43%、57.14%），不同CIN 分級患者HR-HPV、TCT 陽性率，差異無統計學意義（P＞0.05），見表3。

表3 不同CIN分級與宮頸癌患者HR-HPV、TCT陽性率情況 例（%）

3 討論

相關資料表明，宮頸癌發病率位居發女性婦科腫瘤疾病的第二位，且近年來呈現不斷升高趨勢，發病人群則呈現年輕化趨勢，防治形勢較為嚴峻［7-8］。臨床實踐顯示，宮頸病變進展至宮頸癌通常需10年左右，若及時確診宮頸癌及癌前病變，給予科學性治療，患者5 年生存率高達90%，且宮頸癌是目前唯一經醫學干預可降低發病與死亡風險的惡性腫瘤疾?。?-10］。因此，及早篩查、確診對實現早預防、早治療具有關鍵性作用。但宮頸癌及癌前病變無特異性臨床癥狀，臨床表現與月經異常、陰道感染相似，極易出現誤漏診現象。故積極探索較為可靠的診斷方式至關重要。

宮頸癌前病變及宮頸癌發生的關鍵環節為HPV生殖道持續感染，因此臨床多采取HR-HPV診斷宮頸癌，主要是通過第二代雜交捕獲法進行檢查，具有較好敏感性［6］。但90%左右HPV 感染者可于2 年內自然消退，HR-HPV 檢測結果呈現陽性僅可反映存在HPV感染，而長期持續感染才可能引發宮頸癌，從而導致假陽性風險增加，降低診斷特異度，影響診斷效能，不適宜單獨應用［7］。TCT 檢測方法是一種新型宮頸癌病變篩查、診斷方法，主要采用TCT 專用毛刷于宮頸口、宮頸管內采集脫落細胞，取出標本后立即裝入細胞保存液的TCT 專用取樣瓶中，可最大限度保留標本，通過程序化處理保存液中細胞，可有效分離炎性細胞、血液與上皮細胞，成功獲取存在診斷意義的上皮細胞［8］。同時，與常規巴氏染色操作相比，TCT 檢測可顯著減少重復操作頻次，還可明顯提高薄片細胞富集率及清晰度，有助于減少漏診現象［9］。但有文獻指出，TCT 檢測僅可收集宮頸表層細胞，難以采集宮頸深層細胞，可能因取材、制片質量因素導致診斷偏差，還極易導致過度診斷現象發生，從而影響診斷價值［10］。本研究結果顯示，HR-HPV 聯合TCT 診斷準確率87.95%、敏感度97.83%高于兩者單項檢查，可見HR-HPV聯合TCT可顯著提高診斷準確率、敏感度。本研究還顯示，兩者聯合診斷特異度與單項檢查無差異，提示HR-HPV聯合TCT不影響診斷特異度。

此外，本研究通過對比發現，宮頸癌患者HR-HPV、TCT 陽性率高于CINⅢ級、CINⅡ級、CINⅠ級患者，說明HR-HPV 與TCT 能有效鑒別宮頸癌與癌前病變，能進一步為臨床診治提供可靠信息。但本研究數據還表明，不同CIN 分級患者HR-HPV、TCT 陽性率差異無統計學意義，可能受本研究樣本量限制干擾，今后需擴大樣本量做進一步分析與探討，以更加明確HR-HPV 與TCT 在不同CIN 分級中的檢測價值。

綜上可知，HR-HPV 聯合TCT 應用于宮頸癌及癌前病變患者中診斷價值較高，有助于為臨床提供參考依據，且能有效鑒別宮頸癌與癌前病變，值得臨床推廣。