黃根化學成分的研究

李依桐，文楚毛，馬鏡涵，施 敏，楊光忠，王德彬

(1.中南民族大學 藥學院，湖北 武漢 430074;2.中南民族大學 生物醫學工程學院，湖北 武漢 430074)

1 引言

黃根(Prismatomeristetrandra(Roxb.)K.Schum)是茜草科植物三角瓣花的根，又名南山花，狗骨木，在海南、廣東、云南、廣西等省區均有分布。其性微苦，味涼，具有利濕退黃，軟堅散結，涼血止血，祛瘀生新之功效，在廣西民間常用其治療慢性肝炎[1]。現代藥理學研究表明，黃根具有祛痰平喘[2]，保護巨噬細胞[3]，預防及治療矽肺[4,5]，抗肝纖維化[6]，治療肝炎等作用[7]。據文獻報道，從該植物中分離出的化合物主要包括蒽醌類，有機鋁和一些微量元素[8，13]。目前，對黃根的化學成分研究不多，為進一步探究黃根的藥效物質基礎，促進該民族藥物的開發利用，本文運用溶劑提取法，正相硅膠柱色譜及半制備高效液相色譜法等多種現代提取分離手段，從黃根的乙醇提取物中分離得到6個化合物，包含4個蒽醌類化合物和2個齊墩果烷型三萜。根據其理化性質和波譜數據分別鑒定為2-甲基蒽醌 (1)，甲基異茜草素-1-甲醚 (2)，2-甲基-3-羥基蒽醌 (3)，甲基異茜草素 (4)，3β-乙酰基齊墩果醛 (5)，3β-乙酰基齊墩果酸 (6)。

2 材料與方法

2.1 儀器與試劑

三用紫外分析儀(ZF-I型，上海顧村電光儀器)；旋轉蒸發儀(RE2000A，上海亞榮生化儀器)；循環水式多用真空泵(SHB-IIIA型，上海貝菌科技)；高效液相色譜儀(Ultimate 3000 半制備型，美國戴安，DAD檢測器)；色譜柱(半制備型，YMC-pack ODS-A，250 mm×10 mm，5 μm)；核磁共振波譜儀(AM-600/500型，德國布魯克)；氮吹濃縮裝置

(MTN-2800D型，天津奧特賽恩斯儀器)；正相硅膠(200～300目，青島海洋化工場)；硅膠板(GF 254型，青島海洋化工廠)；分析純試劑(國藥集團)；色譜純試劑(昌泰興業)；硫酸香草醛顯色劑(硫酸、香草醛、乙醇、水分別為8 mL、0.5 g、10 mL、20 mL)。

2.2 提取與分離

取干燥黃根3.5 kg粉碎，室溫下用70%乙醇浸提3次，每次24 h。提取液經減壓抽濾后，減壓濃縮，得到乙醇提取物(400 g)。將乙醇提取物分別用乙酸乙酯，正丁醇萃取3次，得到乙酸乙酯組分(35 g)和正丁醇組分(32 g)。乙酸乙酯組分經正相硅膠柱層析，以石油醚-乙酸乙酯(15∶1,9∶1,8∶2,1∶1)為洗脫劑梯度洗脫，經TLC檢測合并后得到10個組分(Fr.1～Fr.10)。Fr.4經HPLC反復制備[流動相為V(甲醇)∶V(水)=85∶15，流速3mL/min]得到化合物1(tR=9.83 min)。Fr.10經HPLC反復制備[流動相為V(甲醇)∶V(水)=81∶19，流速3 mL/min]得到化合物2(tR=8.64 min)、化合物3(tR=10.423 min)和化合物4(tR=17.277 min)。Fr.3(198.3 mg)，Fr.6(372.2 mg)重結晶后得到化合物5和化合物6。化合物1～6的結構如圖1所示。

圖1 化合物1～6的化學結構式

3 結構鑒定

化合物1:黃色粉末。1H NMR (600 MHz,CD3OD)δH8.10 (1H,s,H-1),7.70 (1H,d,J=7.8Hz,H-3),8.18 (1H,d,J=7.8Hz,H-4),8.28 (2H,dd,J=5.4,9.0Hz,H-5,H-8),7.87 (2H,dd,J=5.4,9.0Hz,H-6,H-7),2.55 (3H,s,2-CH3);13C NMR(150MHz,CD3OD)δC128.3 (C-1),147.0 (C-2),136.2 (C-3),128.0 (C-4),127.9 (C-5,C-8),135.4 (C-6),135.3 (C-7),184.4 (C-9),184.1 (C-10),134.9 (C-1a),134.8 (C-4a),132.6 (C-5a),128.3 (C-8a),21.9 (2-CH3).上述數據與文獻[9]對照基本一致，故鑒定化合物1為2-甲基蒽醌。

化合物2：黃色粉末。1H NMR (600 MHz,DMSO-d6)δH7.48 (1H,s,H-4),8.09 (1H,d,J=7.2Hz,H-5),7.82 (1H,t,J=7.2Hz,H-6),7.88 (1H,t,J=7.2Hz,H-7),8.14 (1H,d,J=7.2Hz,H-8),3.78 (3H,s,1-OCH3),2.15 (3H,s,2-CH3);13C NMR(150MHz,DMSO-d6)δC160.7 (C-1),126.2 (C-2),162.4 (C-3),109.0 (C-4),125.8 (C-5),133.1 (C-6),134.3 (C-7),126.4 (C-8),180.1 (C-9),182.8 (C-10),117.5 (C-1a),133.8 (C-4a),134.6 (C-5a),132.1 (C-8a),60.3 (1-OCH3),8.8 (2-CH3).上述數據與文獻[9]報道的基本一致，故鑒定化合物2為甲基異茜草素-1-甲醚。

化合物3:黃色粉末。1H NMR (600 MHz,DMSO-d6)δH7.95 (1H,s,H-1),7.53 (1H,s,H-4),8.15 (2H,m,H-5,H-8),7.88 (2H,m,H-6,H-7),2.28 (3H,s,2-CH3);13C NMR(150MHz,DMSO-d6)δC124.7 (C-1),129.9 (C-2),162.0 (C-3),111.4 (C-4),126.6 (C-5),134.4 (C-6),133.9 (C-7),126.5 (C-8),181.3 (C-9),182.7 (C-10),133.2 (C-1a),132.1 (C-4a),133.3 (C-5a),133.1 (C-8a),16.3 (2-CH3).上述數據與文獻[10]比對后基本一致，故鑒定化合物3為2-甲基-3-羥基蒽醌。

化合物4：黃色粉末。1H NMR (600 MHz,DMSO-d6)δH7.22 (1H,s,H-4),8.12 (1H,d,J=7.2Hz,H-5),7.89 (2H,m,H-6,H-7),8.19 (1H,d,J=7.2Hz,H-8),2.06 (3H,s,2-CH3),13.2 (1H,s,-OH);13C NMR(150MHz,DMSO-d6)δC162.5 (C-1),117.2 (C-2),164.1 (C-3),108.0 (C-4),126.3 (C-5),134.6 (C-6),134.3 (C-7),126.7 (C-8),185.7 (C-9),182.1 (C-10),108.5 (C-1a),131.8 (C-4a),133.2 (C-5a),132.9 (C-8a),8.2 (2-CH3).上述數據與文獻[9]對照基本一致，故鑒定化合物4為甲基異茜草素。

化合物5：白色粉末。1H NMR(600 MHz,CDCl3)δH4.46(1H,t,J=8.4Hz,H-3),5.32 (1H,br s,H-12),2.60(1H,dd,J=13.2,3.6Hz,H-18),0.83 (3H,s,H-23),0.84 (3H,s,H-24),0.90 (3H,s,H-25),0.71 (3H,s,H-26),1.11 (3H,s,H-27),9.37 (1H,s,H-28),0.88 (3H,s,H-29),0.89 (3H,s,H-30),2.02 (3H,s,3-OAc);13C NMR(150MHz,CDCl3)δC38.3 (C-1),23.7 (C-2),81.1 (C-3),37.9 (C-4),55.5 (C-5),18.4 (C-6),32.9 (C-7),39.7 (C-8),47.7 (C-9),37.1 (C-10),23.6 (C-11),123.4 (C-12),143.2 (C-13),41.9 (C-14),26.9 (C-15),22.3 (C-16),49.3 (C-17),40.6 (C-18),45.7 (C-19),30.8 (C-20),33.3 (C-21),27.9 (C-22),28.3 (C-23),16.9 (C-24),15.6 (C-25),17.2 (C-26),25.7 (C-27),207.6 (C-28),33.3 (C-29),23.7 (C-30),21.6 (3-OAc),171.3 (3-OAc).上述數據與文獻[11]報道的數據基本一致，故鑒定化合物5為3β-乙酰基齊墩果醛。

化合物6：白色羽狀結晶。1H NMR(600 MHz,CDCl3)δH4.47(1H,t,J=9.0Hz,H-3),5.25 (1H,br s,H-12),2.79 (1H,dd,J=13.8,3.6Hz,H-18),0.82 (3H,s,H-23),0.84 (3H,s,H-24),0.91 (3H,s,H-25),0.72 (3H,s,H-26),1.10 (3H,s,H-27),0.88 (3H,s,H-29),0.90 (3H,s,H-30),2.02 (3H,s,3-OAc);13C NMR(150MHz,CDCl3)δC38.2 (C-1),23.7 (C-2),81.1 (C-3),37.9 (C-4),55.5 (C-5),18.4 (C-6),32.7 (C-7),39.4 (C-8),47.7 (C-9),37.2 (C-10),23.6 (C-11),122.7 (C-12),143.8 (C-13),41.7 (C-14),27.8 (C-15),23.8 (C-16),46.7 (C-17),41.1 (C-18),46.0 (C-19),30.9 (C-20),34.0 (C-21),32.6 (C-22),28.2 (C-23),15.6 (C-24),16.9 (C-25),17.4 (C-26),26.1 (C-27),183.9 (C-28),33.3 (C-29),23.8 (C-30),21.6 (3-OAc),171.3 (3-OAc).上述數據與文獻[12]所述基本一致，故鑒定化合物6為3β-乙酰基齊墩果酸。

4 結語

通過對黃根的乙醇提取物的系統分離，共得到6個化合物，包含4個蒽醌類化合物和2個齊墩果烷型三萜，分別鑒定為2-甲基蒽醌(1)，甲基異茜草素-1-甲醚(2)，2-甲基-3-羥基蒽醌(3)，甲基異茜草素(4)，3β-乙酰基齊墩果醛(5)，3β-乙酰基齊墩果酸(6)，其中化合物3、5、6為首次從黃根中分離得到，為進一步研究和開發利用黃根提供了一定的物質基礎。