新疆昌吉地區不同民族Rh陰性獻血者表型及基因頻率分布調查

付 輝，姚秀麗

新疆維吾爾自治區昌吉州中心血站檢驗科，新疆昌吉 831100

Rh血型是人類的一種遺傳性狀，其重要性在臨床上僅次于ABO血型系統，不同地域、不同民族Rh血型分布存在多態性和復雜性。昌吉地區位于天山北麓，是一個回族自治州，居住民族主要為漢族(72.2%)、回族(10.8%)、哈薩克族(10.3%)、維吾爾族(4.9%)，無償獻血者主要人員也是這4個民族。本文對昌吉地區2012-2020年確認為RhD陰性的無償獻血者按民族、Rh血型分布進行回顧性分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1標本來源 2012年1月至2020年12月昌吉州中心血站的初次無償獻血者85 174人份血液，其中漢族、回族、維吾爾族、哈薩克族4個民族獻血者血液83 861人份。

1.2儀器與試劑 Metic-200全自動血型分析儀(深圳愛康)；KA-2200型離心機(日本久保田)；單克隆IgM和IgG抗-D混合試劑[IMMUCOR宜美康(加拿大)生物制品有限公司]；IgG抗-D試劑(北京金豪制藥股份有限公司)、IgG抗-D試劑、直接抗人球蛋白試劑、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e標準血清、抗體篩選細胞、抗體鑒定細胞(上海血液生物醫藥公司)、凝聚胺試劑(珠海貝索生物技術有限公司)。

1.3方法

1.3.1Rh陰性初篩試驗 使用IMMUCOR宜美康單克隆IgM和IgG抗D混合試劑在全自動血型分析儀上進行RhD初篩檢測。

1.3.2Rh陰性確認試驗 使用IMMUCOR宜美康單克隆IgM和IgG抗D混合試劑、北京金豪制藥股份有限公司IgG抗-D試劑、上海血液生物醫藥公司IgG抗-D試劑，3種不同抗-D試劑，對初篩陰性者的受檢紅細胞進行間接抗人球蛋白試驗(IAT)，同時做陰、陽性對照，觀察試驗結果，如果均為陰性則判定為Rh陰性，排除D變異性。

1.3.3Rh血清學表型鑒定 分別用抗-C、抗-c、抗-E、抗-e標準血清對Rh陰性標本進行生理鹽水試管法血清學分型。

1.4統計學處理 采用SPSS17.0軟件進行數據分析，基因頻率計算方法采用文獻[1]中Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗方法進行吻合度檢驗，通過基因單倍型計算出各個表型的理論值，并對觀察值與理論值進行χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1Rh陰性檢出率 4個民族初次獻血者83 861人份血液中，確認RhD陰性獻血者血液904人份，其中漢族、回族、維吾爾族、哈薩克族RhD陰性檢出率分別為0.65%、1.47%、4.39%、3.27%；4個民族間RhD陰性檢出率比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 昌吉地區RhD陰性獻血者各民族陰性分布

2.2Rh陰性血型表型分布 漢族人群的Rh陰性表型基因頻率由高到低依次為dccee(58.14%)、dCcee(30.32%)、dccEe(6.11%)、dCCee(3.85%)、dccEE(0.90%)、dCcEe(0.45%)、dCCEe(0.23%)，回族人群的Rh陰性表型頻率由高到低依次為dccee(71.29%)、dCcee(22.77%)、dccEe(3.96%)、dCCee(0.99%)，維吾爾族人群的Rh陰性表型基因頻率由高到低依次為dccee(87.96%)、dCcee(10.19%)、dccEe(1.39%)、dCcEe(0.46%)，哈薩克族人群的Rh陰性表型頻率由高到低依次為dccee(87.59%)、dCcee(11.72%)、dccEe(0.69%)。4個民族Rh陰性表型分布比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 新疆昌吉地區主要民族Rh陰性血型表型分布及基因頻率[n(%)]

2.3Rh陰性獻血人群單倍型基因頻率 昌吉地區4個民族Rh陰性獻血人群單倍型基因頻率見表3。維吾爾族dce(93.788 6%)、哈薩克族dce(93.587 5%)單倍型基因頻率接近，回族單倍型基因頻率dce(84.431 7%)介于維吾爾族、哈薩克族和漢族之間。經Hardy-Weinberg吻合度檢驗，漢族人群觀察值與理論值差異有統計學意義(P<0.05)，回族、維吾爾族、哈薩克族人群觀察值與理論值差異無統計學意義(P>0.05)，回族、維吾爾族、哈薩克族調查數據符合Hardy-Weinberg遺傳平衡。

2.4昌吉地區與其他地區Rh陰性單倍型基因頻率分布比較 昌吉地區漢族單倍型基因頻率與國內寧夏、南昌地區相近，昌吉地區與其他地區Rh陰性單倍型基因頻率分布比較見表4。

表3 Rh陰性獻血人群單倍型基因頻率(%)

表4 昌吉地區與其他地區或民族Rh陰性單倍型基因頻率分布比較(%)

3 討 論

Rh陰性檢出率及表型分布在人種間存在明顯差異，昌吉地區是多民族融合聚居，總陰性檢出率為1.08%，明顯高于重慶地區(0.466%)[3]和洛陽地區(0.46%)[4]。因而本次調查也體現出昌吉地區民族Rh陰性血型分布特點。本次調查結果顯示，維吾爾族和哈薩克族人群RhD陰性檢出率遠高于漢族、回族，漢族人群陰性檢出率(0.65%)與文獻[5]報道的漢族人群陰性檢出率(0.74%)除去D變異型(0.14%)后的陰性檢出率接近，高于文獻[6]報道的新疆北部地區(0.24%)；回族人群陰性檢出率(1.47%)高于文獻[5]報道的回族人群陰性檢出率(0.53%)除去D變異型(0.05%)后的陰性檢出率及寧夏地區陰性檢出率(0.54%)[1]。本次調查回族人群RhD陰性檢出率高于漢族(P<0.05)。考慮原因可能是：(1)昌吉地區是回族自治州，回族人口數量比例占全州人口第二位。(2)與本次調查研究對象選擇的周期較長、地域廣有關，昌吉地區多次榮獲全國無償獻血先進城市，采血車定期走鄉鎮、下農村，去廣大農牧區采集血液，代表了一定區域性。本次調查維吾爾族人群RhD陰性檢出率(4.39%)低于文獻[5]報道維吾爾族人群陰性檢出率(5.92%)除去D變異型(0.37%)后的陰性檢出率，與新疆維吾爾自治區博樂地區(4.78%)[7]，以及文獻[8]報道調查的新疆維吾爾自治區北部地區維吾爾族人群的RhD陰性檢出率(3.90%～5.17%)接近。哈薩克族人群陰性檢出率(3.27%)高于文獻[2]報道的新疆維吾爾自治區北部地區(2.97%)、文獻[5]報道的哈薩克族人群陰性檢出率(1.74%)除去D變異型(0.25%)后的陰性檢出率，與新疆維吾爾自治區博樂地區陰性檢出率(3.6%)[7]接近。文獻[8]報道新疆維吾爾自治區北部地區哈薩克族人群的RhD陰性檢出率為2.95%～4.70%。

在Rh陰性表型方面，本次調查4個民族中占比最高的分型均為dccee型，這與既往報道的我國昆明地區[9]、濰坊地區[10]情況基本相符，其中維吾爾族(87.96%)與哈薩克族(87.59%)近似，高于文獻[5]報道的84.37%及72.92%，與烏魯木齊地區[11]維吾爾族(86.11%)相近。其次是dCcee型，漢族最高(30.32%)，回族為22.77%，與文獻[1]報道寧夏回族自治區的漢族(28.80%)、回族(23.77%)相近。

在Rh陰性獻血人群單倍型基因頻率方面，本研究結果顯示，昌吉地區各民族Rh陰性單倍型頻率特點及與其他地區比較，昌吉地區漢族人群Rh陰性單倍型頻率與寧夏回族自治區、南昌地區[1,12]Rh陰性獻血者單倍型基因頻率比較，差異無統計學意義(P>0.05)，體現出我國漢族人群Rh陰性分布特點。在本調查中，漢族Rh陰性無償獻血者人群中，觀察值與理論值差異有統計學意義，Hardy-Weinberg吻合度不好，分析原因可能是由于外來人員增多、遷移等，昌吉地區摻入外來基因，使原來群體的基因頻率有所改變。昌吉地區回族獻血者觀察值與理論值調查數據符合Hardy-Weinberg平衡，吻合度良好。昌吉地區回族人群Rh陰性單倍型頻率與文獻[1]報道的寧夏回族自治區回族近似，介于漢族與維吾爾族、哈薩克族之間，有本民族基因頻率分布特點。昌吉地區維吾爾族、哈薩克族獻血者觀察值與理論值調查數據符合Hardy-Weinberg平衡，吻合度良好。維吾爾族、哈薩克族人群Rh陰性單倍型頻率相似程度較高，與其他地區及人群比較，存在明顯區別，與德國、高加索白種人[2]較為相似，但基因組合體頻率不同。昌吉地區哈薩克族人群Rh陰性單倍型頻率與新疆維吾爾自治區北部地區哈薩克族[2]單倍型頻率比較，差異無統計學意義(P>0.05)。本次調查結果顯示，昌吉地區漢族Rh陰性C和E抗原頻率明顯高于維吾爾族、哈薩克族、回族(P<0.05)。

綜上所述，昌吉地區Rh陰性無償獻血者中，漢族、回族、維吾爾族、哈薩克族陰性檢出率、Rh分型及單倍型基因頻率有本民族、地域性特征。