肺炎支原體IgM檢驗在呼吸道感染患兒中的應用

秦偉

【摘要】目的：探討肺炎支原體免疫球蛋白（Ig）M檢驗在呼吸道感染患兒中的應用價值。方法：選擇2021年2～12月在江蘇省高郵市中醫醫院就診的呼吸道感染患兒82例作為研究對象，所有患兒都給予肺炎支原體IgM檢驗，檢測方法包括間接免疫熒光法、化學發光法等。觀察與記錄所有患兒的一般資料、血常規指標。同時所有患兒都采集了咽拭子，采用呼吸道標本培養分離出肺炎支原體為臨床診斷金標準，判斷IgM檢驗的價值。結果：在82例呼吸道感染患兒中，檢出肺炎支原體41例（支原體組），占比50.00%。支原體組的性別、年齡、體重、身高等與非支原體組對比無明顯差異（P>0.05）。支原體組的白細胞、D-二聚體、乳酸脫氫酶、C反應蛋白、降鈣素原含量與非支原體組對比無明顯差異（P>0.05）。在82例患兒中，間接免疫熒光法檢測肺炎支原體IgM陽性40例，化學發光法檢測肺炎支原體IgM陽性43例，間接免疫熒光法與化學發光法診斷肺炎支原體的敏感性分別為97.56%（40/41）、97.56%（40/41），特異性分別為100.00%（41/41）、92.68%（38/41）。結論：基于間接免疫熒光法與化學發光法的肺炎支原體IgM檢驗在呼吸道感染患兒中的應用都有很好的應用效果，在臨床上可合理選擇使用。

【關鍵詞】間接免疫熒光法；化學發光法；肺炎支原體；免疫球蛋白M；呼吸道感染；小兒

【中圖分類號】R446.11+2.【文獻標識碼】A.【文章編號】2096-5249（2022）21-0142-04

支原體介于細菌與病毒之間，為一種原核細胞微生物，沒有細胞壁。肺炎支原體是呼吸道感染的主要病原體，為目前臨床上較為常見的一種對人體有致病性的支原體，其病程遷延，能夠累及多器官和系統，誘發肺炎的發生[1]。支原體肺炎在全年均可發病，但是多發生于秋季者居多，主要的發病群體為5～15歲小兒[2]。支原體肺炎的病癥多表現出來體溫升高，咳嗽等，肺部體征癥狀不明顯，但是具有較強的傳染性[3]。由于患兒感染此疾病后并不會表現出來的明顯的癥狀變化，發病時間相對較長，早期肺部體征不明顯，但是容易出現各種并發癥，包括脊髓炎、肺不張、支氣管擴張、關節炎、腦膜炎等，造成臨床診斷有一定的難度，容易出現漏診與誤診，造成患兒預后不良[4-5]。當前臨床上診斷肺炎支原體的方法比較多，特別是針對肺炎支原體免疫球蛋白（IgM）的診斷方法比較多[6]。本文選擇在江蘇省高郵市中醫醫院就診的呼吸道感染患兒82例作為研究對象，具體探討了肺炎支原體IgM檢驗在呼吸道感染患兒中的應用，以促進早期鑒別診斷呼吸道感染患兒，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2021年2～12月在江蘇省高郵市中醫醫院進行相關檢測的呼吸道感染患兒82例作為研究對象，其中檢出肺炎支原體41例（占比50.00%）為支原體組，其余的41例患兒作為非支原體組。

納入標準：（1）所有患兒都存在呼吸道感染癥狀，病程≥3 d；（2）X線胸片表現為單側或雙側大面積的絮狀陰影；（3）患兒伴隨有一定程度的咳嗽、渾身無力、持續性發熱、頭痛等癥狀；（4）年齡在2～12歲，性別不限制；（5）患兒的病情穩定，患兒家長自愿參與本研究，并且簽訂了有效的協議書；（6）患兒臨床資料以及檢測數據等均完整無缺。

排除標準：（1）合并其他呼吸系統疾病的患兒；（2）檢測前服用過影響檢測本次研究結果的患兒；（3）具有免疫缺陷障礙患兒；（4）可能隱瞞院外用藥史或用藥史不詳者；（5）近期用過免疫調節劑或者抑制劑治療的患兒。

1.2 檢測方法

所有患兒都給予肺炎支原體IgM檢驗，采集患兒的空腹靜脈血樣本2～3 mL。靜置30 min后，2000 r/min離心15 min，取上層血清保存于-20.0 ℃冰箱。采用歐蒙醫學實驗診斷有限公司的呼吸道病原體譜抗體IgM檢測試劑盒，使用間接免疫熒光法檢測血清IgM水平。同時采用化學發光法檢測肺炎支原體IgM含量，檢測設備為亞輝龍公司生產的（YHLO-iFlash3000型）設備，上述所有操作嚴格按照試劑盒上說明書要求進行，在檢測中室內質控在控。

1.3 觀察指標

觀察與記錄所有患兒的性別、年齡、體重、身高等指標。記錄所有患兒的白細胞、D-二聚體、乳酸脫氫酶、C-反應蛋白、降鈣素原含量。同時所有患兒都采集了咽拭子，采用呼吸道標本培養分離出肺炎支原體為臨床診斷金標準，分析間接免疫熒光法和化學發光法的診斷效果，包括診斷敏感性和特異性，以a表示真陽性，b表示假陽性，c表示假陰性，d表示真陰性，敏感性=a/（a+c），特異性=d/（b+d）。

1.4 統計學方法

以SPSS 23.0 統計學軟件進行數據分析。計數資料采用[n（%）]表示，用χ2檢驗；計量資料以（x—±s）表示，行t檢驗。以P<0.05表示有統計學差異。

2 結果

2.1 一般資料對比

支原體組的性別、年齡、體重、身高等與非支原體組對比無明顯差異（P>0.05），見表1。

2.2 血常規指標對比

支原體組的白細胞、D-二聚體、乳酸脫氫酶、C反應蛋白、降鈣素原含量與非支原體組對比無明顯差異（P>0.05），見表2。

2.3 診斷效果

在82例患兒中，間接免疫熒光法檢測肺炎支原體 IgM陽性40例，化學發光法檢測肺炎支原體IgM陽性43例，間接免疫熒光法與化學發光法診斷肺炎支原體的敏感性均較好，見表3。

3 討論

肺炎支原體可以自我復制，屬柔膜體綱，無肽聚糖。也是無細胞壁的最小微生物。肺炎支原體長1～2 μm，包括DNA與蛋白，其基因組為環狀雙股DNA。肺炎支原體的多項生理功能和維持自身個體形態主要是通過自身構造結構單位膜來進行的，較多膽固醇存在于其胞膜上[7]。肺炎支原體作為一種可引起人類原發性非典型肺炎的病原體，在呼吸道感染中占比大約在50.0%左右。肺炎支原體具有很強的傳染性，潛伏期即存在傳染性，可經呼吸道進行傳播，人群普遍易感，尤其小兒更容易感染[8]。

現階段對于支原體肺炎的的發病機理還沒有研究的十分清楚，目前有說服性較高的三種說法：一是肺炎支原體直接的侵入機體引發疾病、二是由于呼吸道上皮的吸附作用而引發，三是因機體的免疫學出現了異常而導致[9]。所以僅是單純的使用普通的青霉素或頭孢類抗生素來治療，其效果并不是很理想，因此臨床上可以將多種藥物一起應用來治療[10]。T淋巴細胞亞群主要包括CD4+T淋巴細胞及CD8+T淋巴細胞，CD4+T淋巴細胞促進B細胞增殖和分化，CD8+T淋巴細胞則發揮抑制作用[11]。肺炎支原體肺炎和人體某些組織存在部分相同抗原，感染后可形成自身抗體，誘發血液系統、神經系統、心血管系統疾病，甚或引起全身多器官損傷，嚴重時可危及患者的生命安全[12]。為此需要肺炎支原體肺炎予以高度重視，加強早期診斷以促進改善患兒的預后。本研究顯示，在82例呼吸道感染患兒中，檢出肺炎支原體41例（支原體組），占比50.00%；支原體組的性別、年齡、體重、身高等與非支原體組對比無明顯差異（P>0.05）；支原體組的白細胞、D-二聚體、乳酸脫氫酶、C-反應蛋白、降鈣素原含量含量與非支原體組對比無明顯差異（P>0.05），說明從臨床體征與血常規指標上很難從呼吸道感染患兒中鑒別診斷肺炎支原體感染。

當前肺炎支原體肺炎患兒診斷標準為：（1）小兒出現頑固刺激性干咳，對抗生素無效，有發熱體征，但是不甚明顯；（2）自限性疾病，有一些患兒的病癥比較輕，甚至不需要治療就可以痊愈，但是進行影像學檢查就會顯示結果較重；（3）血清肺炎支原體抗體具有很好的效果；（4）呼吸道標本培養分離出肺炎支原體為臨床診斷金標準，但是培養的周期比較長，對于技術操作的要求比較高[13-14]。

血清學檢測為肺炎支原體的主要檢測方法，特別是IgM檢測具有操作較為簡便的優點[15]。IgM檢測主要是對患兒血清中的抗IgM進行檢測，IgM在患兒有支原體感染發生的情況下出現，有效檢驗抗IgM水平能夠在早期檢出患兒，并使得患兒在早期就可接受治療，促進改善患兒的預后。隨著實驗室檢測技術的不斷完善，血清IgM的檢測質量得到了有效改善[16-17]。間接免疫熒光法與化學發光法都為當前比較先進的血清學診斷方法，可更為直接地對小兒肺炎支原體感染進行檢測[18-19]。本研究顯示在82例患兒中，間接免疫熒光法檢測肺炎支原體IgM陽性40例，化學發光法檢測肺炎支原體IgM陽性43例，間接免疫熒光法與化學發光法診斷肺炎支原體的敏感性分別為97.56%（40/41）、97.56%（40/41），特異性分別為100.00%（41/41）、92.68%（38/41）。從機制上分析，肺炎支原體IgM檢驗在呼吸道感染患兒中的應用具有很好的效果。有學者采用間接免疫熒光法測定肺炎支原體感染發熱患兒血清IgM水平，并和其他病原體感染的呼吸道感染患兒血清檢測結果進行了對比分析，取得了很好的診斷效果[20-21]。間接免疫熒光法的特異性更高，診斷費用比較高，且操作繁瑣，耗時相對比較久。相比之下，化學發光法的操作簡單、快捷，一般能一步完成，保存試劑方面比較方便，對于環境的要求也不太高。本研究未對其他病原體感染的呼吸道感染患兒進行區別分析，調查人數也不多，沒有分析發生肺炎支原體感染的原因，將在后續研究中探討。

綜上所述，基于間接免疫熒光法與化學發光法的肺炎支原體IgM檢驗在呼吸道感染患兒中的應用都有很好的應用效果，在臨床上可合理選擇使用。

參考文獻

[1] 張藝，周彬，張玨，等.肺炎支原體IgM和IgG抗體的時間分辨熒光免疫層析法的建立及初步應用[J].中華核醫學與分子影像雜志，2022，42（4）：226-230.

[2] 黎炳祥，方文，張麗范，等.血清維生素D水平與肺炎支原體感染的肺通氣功能損傷水平的臨床研究[J].黑龍江醫藥，2022，35（1）：14-16.

[3] 李丹，何兵，王夢龍，等.傳染性單核細胞增多癥合并肺炎支原體感染患兒實驗室檢測結果分析[J].檢驗醫學， 2022，37（2）：159-161.

[4] 李朋玲，王彤彤.支原體IgM抗體陽性社區獲得性肺炎患者凝血功能及血清炎性因子水平變化及意義[J].湖南師范大學學報（醫學版），2022，19（1）：173-175.

[5] 況兆忠，裴彧，李會強，等.肺炎支原體肺炎患兒外周血CD64及心肌酶與血清MP-IgM抗體滴度的相關性[J].天津醫科大學學報，2022，28（2）：177-180.

[6] 顧秀麗，姚瑤，田曉怡，等.2020年北京地區兒童常見呼吸道病原體流行情況分析[J].中華微生物學和免疫學雜志，2022，42（2）：141-147.

[7] 劉彩霞，田玉鳳，馬杰.阿奇霉素、特布他林聯合布地奈德霧化吸入治療小兒支原體肺炎的臨床效果及對血氣分析指標、血清炎性因子的影響[J].臨床醫學研究與實踐，2022，7（6）：37-39.

[8] 顧婷婷，尚莉麗.基于血清抗體檢測分析2017～2019年合肥地區支氣管肺炎患兒肺炎支原體感染的單中心流行病學特征[J].新鄉醫學院學報，2021，38（9）：839-841.

[9] 況兆忠，高鳳霞，熊偉，等.支原體肺炎合并細菌感染患兒血清肺炎支原體抗體軟骨組織糖蛋白及載脂蛋白C1水平檢測的診斷效能[J].中國婦幼保健，2021，36（18）：4243-4245.

[10] 賀曉紅，顧星，黃仕瓊，等.哮喘合并肺炎支原體感染患兒外周血炎性因子的動態變化特點與預后的關系[J].貴州醫科大學學報，2021，46（10）：1169-1173.

[11] 謝維波，謝俊波，鄞曉峰，等.兒童社區獲得性肺炎支原體肺炎實驗室檢查特征分析[J].現代醫藥衛生，2021，37（1）：26-29.

[12] 楊新麗，馬志剛，李晨曦.河北省涿州市兒童社區獲得性肺炎流行特征及病原菌分布[J].華南預防醫學，2021，47（2）：170-173，178.

[13] 林康，文志，周暢，等.肺炎支原體P116基因FP2片段的免疫優勢和細胞黏附活性[J].安徽醫科大學學報，2021，56（8）：1268-1272.

[14] 李巍，翟慢慢，田冬冬，等.肺炎支原體快速培養、血清抗體檢測聯合應用于小兒支原體肺炎早期診斷中的價值分析[J].臨床醫學工程，2021，28（2）：175-176.

[15] 李佳潞，楊俊，朱曉萍，等.肺炎支原體肺炎合并喘息患兒血清25（OH）D3水平與肺功能的相關性及其影響因素分析[J].現代生物醫學進展，2021，21（11）：2143-2147.

[16] 鄧婷，袁煒華，朱潔好.肺炎支原體抗體、C反應蛋白及血清降鈣素原檢測在呼吸道感染診斷中的應用價值[J].中國實用醫藥，2021，16（13）：90-92.

[17] 李小琴，薛萍，鄭艷梅.不同年齡支原體肺炎患兒的臨床特征及相關指標的關聯性研究[J].中國藥物與臨床，2021，21（7）：1078-1081.

[18] 王貴清，董曉艷，鐘海琴，等.多重聚合酶鏈反應技術對判定住院兒童肺炎病原譜的初步研究[J].中國實用兒科雜志，2021，36（8）：617-622.

[19] 任麗媛，趙婷，王曉景，等.肺炎支原體快速培養和血清抗體在早期診斷小兒支原體肺炎中的價值分析[J].飲食保健，2021（17）：24-27.

[20] 鄧宇運，李雁，林杰鋒.熒光定量PCR與快速培養法在肺炎支原體臨床檢測應用比較[J].江蘇預防醫學，2021，32（3）：363-364.

[21] 石懷祿，楊卓，徐睿.慶陽市14歲以下兒童急性上呼吸道病原體感染及流行病學分析[J].微生物學免疫學進展，2021，49（3）：53-58.