冠心病不穩定型心絞痛病人血清ENS、adropin表達及其與預后的關系

周 秀，李毓娟，趙小瑞

冠心病(coronary heart disease，CHD)不穩定型心絞痛(unstable angina，UA)是臨床常見的一種介于穩定型心絞痛(stable angina，SA)與急性心肌梗死間的狀態，若不及時進行恰當治療，可發展成急性心肌梗死[1]。目前，UA發病原因尚未闡述完全，但認為其與高血脂、血管壁斑塊破裂、血管新生、腎功能障礙、炎癥反應、血栓形成、動脈粥樣硬化、血管內皮功能障礙等關系密切[2-3]。研究發現，肥厚型心肌病病人血清內皮抑素(endostatin，ENS)水平升高，可作為冠狀動脈障礙及心肌重塑的標志物[4]；另外，adropin是一種調節能量平衡的分泌性蛋白，其在冠心病病人血清中呈低水平，可能在冠心病病變過程中發揮重要作用[5]。但冠心病 UA病人血清ENS、adropin水平與預后的關系鮮有報道。基于此，本研究通過檢測冠心病UA病人血清ENS、adropin水平，分析兩者的相關性及其與預后的關系，以期為臨床預測UA病人預后提供一定依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年3月—2019年7月我院收治的冠心病病人179例，其中，SA病人78例(SA組)，UA病人101例(UA組)。另選取同期101名體檢健康者作為對照組。UA組，男57例，女44例；年齡45～75(61.42±10.04)歲；SA組，男45例，女33例；年齡46～76(62.25±10.71)歲；對照組，男54例，女47例；年齡44～76(60.16±9.67)歲。以電話、微信或門診復查方式隨訪UA病人1年，參考文獻[6]將UA病人分為預后良好亞組(60例)與預后不良亞組(41例)。

診斷標準：根據《冠心病治療指南》[7]中UA、SA診斷標準進行判定。納入標準：①符合冠心病UA、SA診斷標準；②結合臨床表現，經心電圖、冠狀動脈造影、心肌酶學確診；③具備完整的生理、病理檢查資料。排除標準：①合并心肌病、心肌炎、瓣膜病；②合并肝、腎功能異常；③近期接受外科手術或有創傷者；④合并感染性疾病、中樞神經系統疾病；⑤合并傳染性疾病、免疫系統疾病。所有受試者及其家屬簽署知情同意書，研究方法符合《赫爾辛基宣言》要求，獲得本院倫理委員會審核批準。

1.2 試劑與儀器 人ENS酶聯免疫吸附法(ELISA)試劑盒(貨號：xl-Eh0105)購自上海鑫樂生物科技有限公司；人adropin ELISA試劑盒(貨號：CSB-EL007669HU)購自上海恒斐生物科技有限公司。酶標儀(型號：SuPerMax 3000FA)購自南京艾夫特工業技術有限公司。

1.3 方法

1.3.1 樣本收集 采集研究對象空腹靜脈血3～4 mL，靜置25 min，4 ℃、5 500 r/min離心5 min，保留上層血清，保存于-20 ℃冰箱中，備檢。

1.3.2 ELISA法檢測血清ENS、adropin水平 將人ENS、adropin ELISA試劑盒中的標準品配制成不同濃度標準品溶液，制作標準曲線；解凍血清樣本，于450 nm處測定各血清樣本的吸光度，根據標準曲線計算血清ENS、adropin濃度。

2 結 果

2.1 3組臨床資料比較 3組性別、年齡比較差異均無統計學意義(P>0.05)。與對照組相比，SA組、UA組糖尿病比例、高血壓比例、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇水平均明顯升高(P<0.05)，高密度脂蛋白膽固醇水平均明顯降低(P<0.05)。詳見表1。

表1 3組臨床資料比較

2.2 3組血清ENS、adropin水平比較 與對照組相比，SA組、UA組血清ENS水平明顯升高(P<0.05)，adropin水平明顯降低(P<0.05)；與SA組相比，UA組血清ENS水平明顯升高(P<0.05)，adropin水平明顯降低(P<0.05)。詳見表2。

表2 3組血清ENS、adropin水平比較(±s)

2.3 UA病人血清ENS水平與adropin的相關性 Pearson法分析顯示，UA病人血清ENS水平與adropin呈負相關(r=-0.468，P<0.05)。詳見圖1。

圖1 UA病人血清ENS水平與adropin的相關性

2.4 不同預后UA病人血清ENS、adropin水平比較 與預后良好亞組相比，預后不良亞組UA病人血清ENS水平明顯升高(P<0.05)，adropin水平明顯降低(P<0.05)。詳見表3。

表3 不同預后UA病人血清ENS、adropin水平比較(±s)

2.5 Logistic回歸分析影響UA病人預后的因素 以UA病人預后為因變量(不良=1，良好=0)，將三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、ENS、adropin等自變量納入Logistic回歸方程，結果顯示，ENS是UA病人不良預后的危險因素(P<0.05)，adropin是UA病人不良預后的保護因素(P<0.05)。詳見表4。

表4 Logistic回歸分析UA病人預后的影響因素

2.6 血清ENS、adropin水平對UA病人預后的評估價值 ROC曲線顯示，血清ENS水平預測UA病人不良預后的曲線下面積(area under curve，AUC)為0.878[95%CI(0.809，0.946)]，截斷值為4.70 ng/mL，其靈敏度、特異度分別為73.2%、86.7%，約登指數為0.599；血清adropin水平預測UA病人不良預后的AUC為0.838[95%CI(0.759，0.916)]，截斷值為43.26 ng/L，靈敏度、特異度分別為73.2%、83.3%；血清ENS、adropin水平聯合預測UA病人不良預后的AUC為0.937[95%CI(0.894，0.979)]，靈敏度、特異度分別為87.8%、85.0%，約登指數為0.728。詳見圖2。

圖2 血清ENS、adropin水平預測UA病人不良預后的ROC曲線

3 討 論

心絞痛是由于冠狀動脈供血不足，引發心肌急劇缺血缺氧，進而造成胸部不適的臨床綜合征，而UA是心絞痛的一種類型，是心臟出現血流量及氧氣供應不足的狀態，其可引發心臟病，預后較差[8-9]。因此，尋找與UA發病有關，且可評估UA預后的指標，對改善UA病人預后有一定積極意義。

ENS是一種內源性抑制因子，其可通過結合核仁素受體，抑制核仁素磷酸化進而抑制內皮細胞增殖、遷移，還可通過調節有關信號通路，進而在血管新生中發揮抑制作用[10-11]。研究發現，ENS水平在急性心肌梗死病人中升高，有助于預測是否發生急性心肌梗死[12]；另外，2型糖尿病合并冠狀動脈鈣化病人血清ENS水平異常，其有望成為判定2型糖尿病病人是否存在動脈粥樣硬化的有效標志物[13]。以上研究表明，ENS與血管異常類疾病關系密切。此外，Ruge等[14]研究發現，穩定型冠心病病人血清ENS水平升高，其可能與心血管事件相關。本研究中UA組血清ENS水平明顯高于SA組、對照組，提示ENS可能在UA發生發展中起重要作用，究其原因，正常情況下，抑血管生成因子ENS與血管生成因子處于動態平衡，但內皮細胞在缺血、缺氧刺激下，進入活躍狀態，進而引起內皮功能紊亂，促進ENS等血管生成抑制因子釋放，打破平衡，從而造成血管壞死、閉塞，促進UA、SA病理發展，但仍需進一步探究其作用機制。

動脈粥樣硬化是UA病變過程的病理基礎，且血管內皮功能損壞是動脈粥樣硬化的重要環節及始動因素，而adropin可參與胰島素應答，調節能量代謝平衡，進而影響動脈粥樣硬化疾病進展；其還可通過促進一氧化氮合酶表達，升高體內一氧化氮(NO)水平，進而達到保護血管內皮功能的目的[15-16]。有研究發現，低水平adropin與急性心肌梗死病人發生主要心血管不良事件相關，其可作為預測急性心肌梗死病人預后的指標[17]；此外，急性冠脈綜合征病人血清adropin水平降低，與GRACE危重程度評分呈負相關，其可輔助評估病人疾病嚴重程度和預后[18]。以上研究表明，adropin可能在UA動脈粥樣硬化類疾病中具有重要作用。本研究中UA組血清adropin水平明顯低于SA組、對照組，提示adropin可能參與并影響UA發生發展，推測低水平adropin使其保護內皮功能的作用降低，進而引起或促進動脈粥樣硬化，從而加速UA發病進程；或其可能通過影響胰島素應答、能量代謝平衡，進而參與UA疾病進展，但具體機制有待深入探究。

本研究中UA病人血清ENS水平與adropin呈負相關，提示ENS可能與adropin相互作用，進而共同影響UA發生發展，但具體機制需進一步研究證實。本研究顯示，預后不良亞組UA病人血清ENS水平明顯高于預后良好亞組，adropin水平明顯低于預后良好亞組，提示ENS、adropin均可能影響UA病人預后。進一步研究顯示，ENS是UA病人不良預后的危險因素，adropin是UA病人不良預后的保護因素，提示血清ENS水平升高，adropin水平降低，均可能使UA病人不良預后的發生風險升高，檢測血清ENS、adropin水平可能有助于判定UA病人預后。進一步研究發現，血清ENS、adropin水平預測UA病人預后的AUC分別為0.878，0.838，當ENS水平>4.70 ng/mL或adropin<43.26 ng/L時，UA病人發生不良預后的風險較高，提示ENS、adropin對UA預后有一定預測效能；ENS、adropin聯合預測UA不良預后的AUC為0.937，其靈敏度為87.8%，特異度為85.0%，提示ENS、adropin聯合預測UA不良預后的靈敏度高于單獨診斷，兩者聯合可提高對UA預后的評估價值。

綜上所述，冠心病UA病人血清ENS水平升高，adropin水平降低，兩者聯合可有效提高預測UA不良預后的價值，可更好地判定UA病人預后情況。但本研究未深入探討ENS、adropin在UA發病中的作用機制，后期將擴大樣本量進行深入研究。