胰島素樣生長因子1受體、腫瘤轉移相關蛋白1在皮膚惡性黑色素瘤中的表達及臨床意義

慕文，盧濤，楊艷萍

西安國際醫學中心醫院整形科，西安 710100

黑色素瘤是由于黑色素細胞異常增生而形成的一種惡性腫瘤，多發生于皮膚及黏膜組織，可通過淋巴結轉移或播散[1]。皮膚惡性黑色素瘤是黑色素瘤中最常見的一種，屬于高度惡性腫瘤，據統計，皮膚惡性黑色素瘤占所有惡性腫瘤的3%，其發病率居皮膚惡性腫瘤的第3位[2]。皮膚惡性黑色素瘤易發生早期轉移，且治療效果差、病死率高，因此早診斷對于降低病死率具有重要意義。相關研究指出，腫瘤的發生伴隨著相關基因和蛋白以及受體的異常表達[3]。基于此，本研究探討皮膚惡性黑色素瘤中胰島素樣生長因子1受體（insulin like growth factor 1 receptor，IGF1R）、腫瘤轉移相關蛋白 1（metastasis associated 1，MTA1）的表達情況及臨床意義，旨在為皮膚惡性黑色素瘤的預防及臨床診療提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2019年9月至2020年9月于西安國際醫學中心醫院接受治療的皮膚惡性黑色素瘤患者的病歷資料。納入標準：①經病理檢查確診為皮膚惡性黑色素瘤；②未接受過相關治療；③臨床資料完整。排除標準：①合并其他系統病變或惡性腫瘤；②合并精神疾病等導致依從性差；③合并嚴重心、肺、肝功能不全；④妊娠期女性。根據納入和排除標準，本研究共納入72例皮膚惡性黑色素瘤患者作為觀察組，其中男42例，女30例；年齡35～74歲，平均（46.37±6.42）歲。另選取同期西安國際醫學中心醫院收治的68例色素痣患者為對照組，其中男35例，女33例；年齡17～68歲，平均（45.52±6.59）歲。兩組患者的性別、年齡比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院倫理委員會審批通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 免疫組織化學染色方法及結果判定

收集兩組患者手術切除后的組織，然后進行石蠟包埋和切片處理，使用二甲苯、乙醇進行脫蠟、脫水處理后，將標本浸泡于3%H2O2中20 min，封閉內源性過氧化物酶活性。高壓下采用枸櫞酸鹽進行抗原修復，溫水清洗后采用磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）清洗3次，每次5 min，然后加入正常羊血清以阻斷非特異性結合，置于37℃恒溫箱中30 min。加入兔抗人IGF1R多克隆抗體、山羊抗人MTA1多克隆抗體，4℃過夜，PBS清洗后，滴加生物素標記的IGF1R、MTA1二抗，37℃孵育10 min，PBS清洗后，滴加過氧化物酶標記的鏈霉卵白素工作液，孵育10 min，二氨基聯苯胺顯色，蘇木素復染，脫水、干燥后采用中性樹脂封片，以已知的IGF1R、MTA1陽性組織切片作為陽性對照，以PBS代替一抗作為陰性對照。

根據陽性細胞百分比及染色強度判定IGF1R、MTA1的表達情況。陽性細胞百分比評分：0分，無陽性細胞；1分，陽性細胞百分比＜25%，2分，陽性細胞百分比為26%～50%；3分，陽性細胞百分比＞50%。染色強度評分：0分，無色；1分，淡黃色；2分，棕黃色；3分，棕褐色。陽性細胞百分比評分與染色強度評分相乘，≤3分為陰性，＞4分為陽性[4-5]。

1.3 隨訪方法

對所有皮膚惡性黑色素瘤患者隨訪1年，隨訪方式為住院、電話、微信隨訪，統計患者的1年生存情況。

1.4 觀察指標

比較觀察組與對照組患者IGF1R、MTA1的表達情況，比較不同臨床特征皮膚惡性黑色素瘤患者IGF1R、MTA1的表達情況，分析皮膚惡性黑色素瘤患者預后的獨立危險因素。

1.5 統計學方法

采用SPSS 22.0軟件對數據進行統計分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；采用Logistic回歸模型分析皮膚惡性黑色素瘤患者預后的影響因素；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 IGF1R、MTA1表達情況的比較

觀察組患者的IGF1R、MTA1陽性表達率均明顯高于對照組，差異均有統計學意義（χ2=45.752、43.312，P＜0.01）。（表1）

表1 兩組患者的IGF1R、MTA1表達情況[n（%）]

2.2 不同臨床特征皮膚惡性黑色素瘤患者IGF1R、MTA1表達情況的比較

不同年齡、性別、腫瘤部位皮膚惡性黑色素瘤患者的IGF1R、MTA1陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移皮膚惡性黑色素瘤患者的IGF1R陽性表達率分別高于臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移的患者，差異均有統計學意義（χ2=5.091、8.571，P＜0.05）；臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移皮膚惡性黑色素瘤患者的MTA1陽性表達率分別高于臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移的患者，差異均有統計學意義（χ2=5.940、11.078，P＜0.05）。（表2）

表2 不同臨床特征皮膚惡性黑色素瘤患者的IGF1R、MTA1表達情況（n=72）

2.3 皮膚惡性黑色素瘤患者預后的影響因素分析

術后對皮膚惡性黑色素瘤患者進行1年隨訪，結果發現，死亡15例（20.83%）。以年齡、性別、臨床分期、淋巴結轉移情況、腫瘤部位、IGF1R表達情況、MTA1表達情況作為自變量，以患者預后作為因變量進行Logistic回歸分析，結果顯示，臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移、IGF1R陽性、MTA1陽性均是影響皮膚惡性黑色素瘤患者預后的獨立危險因素（P＜0.05）。（表3）

表3 皮膚惡性黑色素瘤患者預后的影響因素分析

3 討論

皮膚惡性黑色素瘤可分為肢端雀斑樣、淺表擴散型、結節型以及惡性雀斑樣黑色素瘤4種類型，可發生于任何部位，以曝光區最為常見，其次是長期受到外部刺激的部位，臨床多表現為出血、瘙癢、壓痛、潰瘍等癥狀[6-7]。皮膚惡性黑色素瘤具有發病隱匿、進展迅速的特點，且易出現轉移，相比于其他惡性腫瘤預后差，患者病死率較高，近年來其發病率不斷升高[8]。由于中國大部分患者對于皮膚惡性黑色素瘤的了解甚少且不夠重視，導致多數患者在就診時病情已發展為晚期，手術治療效果欠佳，且預后較差。因此，尋找識別皮膚惡性黑色素瘤發生發展相關的新型因子及預后預測標志物是近年來的研究熱點[9]。

胰島素樣生長因子1（insulin like growth factor 1，IGF1）屬于細胞增殖調控因子，與機體的細胞分化、組織修復等生理活動密切相關，可抑制腫瘤細胞凋亡，并參與惡性腫瘤的發生發展，其對應的受體為IGF1R，是由α和β兩個亞單位通過硫化鍵連接構成的異四倍體[10-11]。相關研究指出，正常細胞的增殖分化和機體的正常發育均受IGF1R介導的各種信號轉導通路調節，當其介導的信號轉導失常時，機體就有可能形成腫瘤[12]。本研究結果顯示，皮膚惡性黑色素瘤患者的IGF1R陽性表達率明顯高于色素痣患者，且臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移皮膚惡性黑色素瘤患者的IGF1R陽性表達率分別高于臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移的患者，提示IGF1R可能在皮膚惡性黑色素瘤的發生發展過程中發揮重要作用。進一步Logistic回歸分析結果顯示，IGF1R陽性表達是皮膚惡性黑色素瘤患者預后的獨立危險因素，因此推斷IGF1R可以作為評估皮膚惡性黑色素瘤患者預后的指標之一。

MTA1是促進腫瘤轉移的一種蛋白，在正常組織中表達較低甚至無表達，而當機體發生癌變時，MTA1會調控腫瘤細胞的分化功能，并與組蛋白去乙酰化酶結合形成復合物，使腫瘤基因的轉錄水平下調[13-14]。此外，MTA1還可與細胞凋亡相關蛋白結合，從而介導細胞凋亡，參與腫瘤的發生發展。本研究結果顯示，皮膚惡性黑色素瘤患者的MTA1陽性表達率明顯高于色素痣患者，且臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移皮膚惡性黑色素瘤患者的MTA1陽性表達率分別高于臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移的患者，說明MTA1在皮膚惡性黑色素瘤患者中呈高表達，且可能與皮膚惡性黑色素瘤的發生發展有關。Logistic回歸分析結果顯示，MTA1陽性是影響皮膚惡性黑色素瘤患者預后的獨立危險因素。提示可通過檢測皮膚惡性黑色素瘤患者術后MTA1的表達情況判斷療效，評估患者預后，從而指導治療。

綜上所述，IGF1R、MTA1在皮膚惡性黑色素瘤中的陽性表達率較高，推測IGF1R、MTA1可能參與了皮膚惡性黑色素瘤的發生發展過程，臨床上可通過檢測兩者的表達情況對患者的病情進展及預后情況進行評估。