化學(xué)發(fā)光法與ELISA 法對乙肝兩對半檢測結(jié)果的對比分析

侯 宏

（南京市紅十字醫(yī)院檢驗(yàn)科 江蘇 南京 210000）

乙型病毒性肝炎的臨床癥狀包括惡心、疲勞、害怕進(jìn)食、肝痛、腹脹等。嚴(yán)重者呈慢性肝病面部特征、蜘蛛痣、脾腫大、肝掌和持續(xù)性肝功能異常。按照臨床癥狀可分為輕度、中度和重度[1-2]。根據(jù)有關(guān)報(bào)道統(tǒng)計(jì)，全球有將近2 億例有慢性乙型肝炎病毒感染者，全球每年因?yàn)橐腋尾《舅劳龅募s有百萬人，乙肝現(xiàn)在已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人們身體健康的疾病之一[3]。因此，乙肝兩對半的實(shí)驗(yàn)室檢查對預(yù)防和治療乙肝有非常重要的作用。乙肝表面抗原（HBsAg）屬于乙型肝炎病毒的病毒膜蛋白，它其實(shí)本來不具備傳染能力的，然而由于它經(jīng)常與乙肝病毒合并發(fā)生，現(xiàn)在已成為乙型肝炎病毒細(xì)胞感染的最重要標(biāo)志之一[4]。HBsAg 可能出現(xiàn)在人們的血液、精液等各種分泌物中，并可能在人們不注意的情況下引起感染反應(yīng)。已感染乙肝的病人有3～6 個(gè)月潛伏期，在丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶升高前約6 周左右，血清檢測可呈現(xiàn)為陽性。此外，急性乙型肝炎患者在早期干預(yù)后能夠轉(zhuǎn)為陰性，而慢性乙型肝炎的相應(yīng)指標(biāo)仍為陽性[5]。當(dāng)前對于乙肝表面抗原的檢測方法主要為化學(xué)發(fā)光法與ELISA 法，為了對比兩種檢測方法的結(jié)果，本文就對此進(jìn)行了比較分析。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020 年8 月～2021 年8 月在南京市紅十字醫(yī)院感染科就診的確診乙型肝炎156 例患者。其中男性88 例，女性68 例，年齡18～75 歲，平均年齡（43.87±10.09）歲。收集并檢測出所有患者的靜脈血標(biāo)本，并同時(shí)采用化學(xué)發(fā)光法和ELISA 法進(jìn)行檢測乙肝兩對半。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有患者經(jīng)診斷確診為乙型肝炎，并在我院進(jìn)行治療；（2）臨床資料完整；（3）具有基本的言語溝通能力；（4）患者及患者家屬在了解研究目的、詳細(xì)內(nèi)容及研究過程中可能發(fā)生的不良事件后自愿接受治療且簽署同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并腫瘤或其他嚴(yán)重疾??；（2）合并其他肝臟器質(zhì)病變或傳染性疾病；（3）依從性差或不配合者。

1.3 方法

1.3.1 儀器與試劑。

化學(xué)發(fā)光法使用羅氏6000 全自動生化免疫分析儀，試劑使用羅氏診斷相關(guān)配套試劑，ELISA 法使用IMark 酶標(biāo)儀，乙肝兩對半試劑來自上?？迫A試劑有限公司。

1.3.2 檢測方法。

所有患者均于清晨空腹采集10ml 靜脈采血，3000r/min，進(jìn)行10min 離心分離。后把患者血清樣本等分成2 份，同時(shí)使用化學(xué)發(fā)光法和ELISA 法進(jìn)行乙肝兩對半檢測。HBsAg 陽性，S/Co≥1.0。對CMIA HBsAg 樣本進(jìn)行檢測，相對強(qiáng)度RLU 與臨界值RLU/CO＞1,0≥比值為陽性。在每次檢測過程中，使用定值參考血清作為質(zhì)量控制，嚴(yán)格按照試劑盒上的相關(guān)說明進(jìn)行操作。

1.4 判定指標(biāo)

1HBsAb（血清中乙肝表面抗體）＞10.0mlu/ml；2HBeAb（乙肝e 抗體）＞3.0NCU/ml；3HBsAg（乙肝表面抗原）＞0.15ng/ml；4HBeAg（乙肝e 抗原）＞0.25NCU/ml；5HBcAb （ 乙 肝 核 心 抗 體）＞2.0NCU/ml。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

利用SPSS 24.0 軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以百分比表示，采用X2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（）表示，采用t 檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對比化學(xué)發(fā)光法與ELISA 法HBsAg 靈敏度

通過比較發(fā)現(xiàn)，化學(xué)發(fā)光法的檢測HBsAg 的靈敏度普遍要高于ELISA 法，見表1。

表1 兩組方法檢測HBaAg 靈敏度的比較

2.2 對比化學(xué)發(fā)光法和ELISA 法檢測結(jié)果

通過比較發(fā)現(xiàn)，化學(xué)發(fā)光法的檢測陽性率普遍高于ELISA 法?；瘜W(xué)發(fā)光法檢測HbsAg 的陽性率為78.85%，ELISA 法陽性率為59.61%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組方法檢測HBsAg 陽性率比較[n（%）]

3 討論

乙型肝炎作為我國日常生活里常見的慢性傳染病之一，如果不及時(shí)治療，可能會進(jìn)一步引起肝癌發(fā)生，嚴(yán)重威脅到人們的生命健康[6]。在日常生活中，乙型肝炎的發(fā)病率還是很高的，在缺乏有效的治療藥物和治療手段的情況下，在特定的臨床治療下，很難有效地從患者體內(nèi)清除乙型肝炎病毒，臨床療效相對較差[7]。此外，盡管一些患者暫時(shí)緩解了病情，但身體內(nèi)的乙肝病毒并未徹底治愈。在這種情況下，即使他們已經(jīng)康復(fù)，但還是會有許多乙肝患者終生攜帶乙肝病毒[8-9]。所以，在臨床診斷上，需要采取有效的檢測方式對乙型肝炎的早期作診斷，這對于乙型肝炎患者實(shí)施早期臨床治療和預(yù)后評估有著重要的意義。

ELISA 法曾是臨床實(shí)驗(yàn)檢測中最常見的檢測固相酶免疫分析手段，其優(yōu)點(diǎn)相對簡便快捷，不需要特殊的檢驗(yàn)器材，非常適合于大量人群的抗原和抗體篩查。然而，在臨床大量實(shí)際應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，這種方法受到許多方面的困擾，如相對復(fù)雜的手動操作過程、缺乏靈敏性、精確量化難等[10-11]。此外，由于結(jié)合抗體或抗原和游離抗體或抗原的分離，所以還需要添加樣本并多次清洗平板，從而對檢測結(jié)果大大打折扣[12]。隨著臨床檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展，化學(xué)發(fā)光法在乙肝病毒標(biāo)志物中的檢測上得到了廣泛的認(rèn)可與應(yīng)用。它的原理是利用全自動儀器及其配套試劑，從而進(jìn)一步實(shí)行自動化、標(biāo)準(zhǔn)化檢測。在近年來的發(fā)展中，該技術(shù)不光具備很強(qiáng)的性能、很高的靈敏性，并且可以更好地避免人為錯(cuò)誤，提高檢測的準(zhǔn)確性[13]。目前，它已成為免疫識別的硬性指標(biāo)。本次研究結(jié)果就表明，化學(xué)發(fā)光法檢測HBsAg 的靈敏度要高于ELISA 法；另外，化學(xué)發(fā)光法的檢測結(jié)果準(zhǔn)確率普遍高于ELISA 法，化學(xué)發(fā)光法的檢測陽性率普遍高于ELISA 法。化學(xué)發(fā)光法檢測HbsAg 的陽性率為78.85%，ELISA 法陽性率為59.61%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。這是因?yàn)榛瘜W(xué)發(fā)光法具有特異性高、在機(jī)器中檢測時(shí)間相較于ELISA 法時(shí)間少、試劑儲存在冷凍箱中且不易降解、機(jī)器可以連續(xù)檢測、所有操作步驟都由該裝置執(zhí)行等優(yōu)點(diǎn)，技術(shù)指標(biāo)優(yōu)于ELISA[14-16]。

綜上所述，化學(xué)發(fā)光法在檢測乙肝靈敏度和濃度定量檢測方面均優(yōu)于ELISA 法，它可以解析藥物是否對身體有愈合作用，作出正確的評估，減少不必要的麻煩。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，ELISA 法受許多人為因素影響，靈敏度低，易造成檢測結(jié)果大相徑庭的局面。而化學(xué)發(fā)光法的陽性檢測率對HBsAg 檢測的敏感性明顯要高于ELISA 法，故臨床應(yīng)大力推廣。