ELISA 單試劑抗-HCV 反應(yīng)性獻血者的HCV 基因分型及歸隊研究

張銳

汕頭市中心血站供血服務(wù)科，廣東汕頭 515000

丙型肝炎病毒（HCV）是一種丙型肝炎病毒[1-3]，該病毒具有顯著異源性和高度可變性， 主要傳染源包括急性臨床型和無癥狀患者、 慢性患者及病毒攜帶者[4]。 調(diào)查顯示。 民眾中對于該病毒的認知度普遍較低[5]。 無償獻血者中可能存在攜帶病毒的情況，因此，采血機構(gòu)應(yīng)該加強對HCV 的篩查[6]。 基于此，選取該站2019 年1 月—2020 年12 月301 名ELISA單試劑檢測抗-HCV 反應(yīng)性獻血者為研究對象，主要分析ELISA 單試劑抗-HCV 反應(yīng)性獻血者的HCV基因分型及歸隊，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該站301 名ELISA 單試劑檢測抗-HCV 反應(yīng)性獻血者為研究對象，其中男180 名，女121 名；年齡18～50 歲， 平均 （36.11±2.74） 歲； 體質(zhì)指數(shù)（BMI）21～32 kg/m2，平均（26.64±1.48）kg/m2；收縮壓110～140 mmHg，平均（122.42±10.71）mmHg；舒張壓65～90 mmHg，平均（79.41±7.64）mmHg；初次獻血者151 名，第2 次獻血者92 名，2 次以上獻血者58 名；文化程度：小學(xué)30 名，中學(xué)51 名，高中120 名，本科及以上100 名。該研究經(jīng)過醫(yī)學(xué)倫理委員會批準。納入標準： ①均符合健康獻血者檢查標準且無過敏反應(yīng)；②研究方法和目的已被獻血者明確；③獻血者知情并同意。排除標準：①年齡不足18 周歲；②常規(guī)體檢有問題。

1.2 方法

采集獻血者靜脈血5 mL，分為3 份，分別用于血清學(xué)檢測、PCR 定性檢測及HCV 基因分型（PCR檢測呈陽性者）。 HCV 基因分型呈陰性者，在獻血者信息系統(tǒng)中將其轉(zhuǎn)入“歸隊”程序。 由該站檢驗科經(jīng)過專門培訓(xùn)認證的專業(yè)技術(shù)人員， 用全自動酶免分析后處理系統(tǒng)（澳斯邦FAME24/20，愛康A(chǔ)E268）及其配套試劑（批號V940710、V941210、V941410）和珠海麗珠試劑（批號2019061008、2019081408、2019101808）等做單試劑篩查；HCVPCR 檢測 （批號201901263等，中山大學(xué)達安基因股份有限公司）。 操作過程嚴格按儀器及試劑說明進行。 HCV 基因分型委托浙江迪安診斷技術(shù)股份有限公司完成。

2 結(jié)果

ELISA 篩查抗-HCV 獻血者，其中HCV NAT 無反應(yīng)占比男性大于女性，HCV NAT 反應(yīng)占比及HCV 分型陽性數(shù)占比男性小于女性，ELISA 篩查抗-HCV 獻血者HCV PCR 反應(yīng)情況、基因分型與性別分布，見表1。

表1 抗-HCV 獻血者HCV PCR 反應(yīng)情況、基因分型與性別分布[n(%)]

HCV1b＞HCV2a＞HCV3a＞HCV6a。PCR 反應(yīng)性獻血者HCV 基因分型陽性者HCV 亞型分布情況，見表2。

表2 PCR 反應(yīng)性獻血者HCV 基因分型陽性者HCV 亞型分布情況[n(%)]

PCR 無反應(yīng)性獻血者6 個月后再次接受血清學(xué)和NAT 檢測，212 名中有182 名再次接受檢測，其中2 種方法均合格的獻血者有102 名， 將其納入次輪歸隊程序。 經(jīng)過第二輪的歸隊程序后，有81 名獻血者回歸獻血者隊伍，歸隊為26.91%（81/301）。

3 討論

丙型肝炎病毒是一種丙型肝炎病毒。臨床資料表明， 人體感染HCV 后所產(chǎn)生的保護性免疫力很差，甚至部分患者會因此出現(xiàn)肝硬化或肝癌[7-8]。 感染機制尚未明確，可能與細胞免疫病理反應(yīng)可有關(guān)[9-11]。既往研究顯示，ELISA 單試劑檢測抗-HCV 反應(yīng)性獻血者的HCV 基因分型，可作為血液篩查解除屏蔽進而歸隊的依據(jù)[12-15]。

該次研究結(jié)果顯示：301 名通過ELISA 篩查抗-HCV 獻血者， 男性180 名，138 名HCV NAT 無反應(yīng)，占比達到76.67%，高于女性的61.16%（74/121）；HCV NAT 反應(yīng)占比男性為10.56%， 小于女性的34.71%；HCV 分型陽性數(shù)，男性為6.11%，小于女性的14.05%。 與吳凡等[16]學(xué)者的研究結(jié)果相符，其研究中， 納入305 名ELISA 篩查抗-HCV 獻血者，男174 名，128 名HCV NAT 無反應(yīng)，占比達到73.56%，高于女性的58.77%（77/131）；HCV NAT 反應(yīng)占比男性為10.75%， 小于女性的35.81%；HCV 分型陽性數(shù)，男性為9.77%（17 名），小于女性的15.74%。

另外，PCR 反應(yīng)性獻血者HCV 基因分型陽性者HCV 亞型分布分別為：HCV2a 占25.00%，HCV3a 占17.86%，HCV6a 占14.28%，HCV1b 占42.86%，結(jié)果顯示：分布情況為HCV1b＞HCV2a＞HCV3a＞HCV6a。

受邀再次接受血清學(xué)和NAT 檢測的212 名HCV NAT 無反應(yīng)者， 有182 名同意再次接受檢測，并且有102 名2 種方法均合格。 經(jīng)過第二輪的歸隊程序后，有81 名獻血者回歸獻血者隊伍，回歸率為26.91%（81/301）。 與邵雷等[18]學(xué)者的研究結(jié)果相符，其研究中，受邀再次接受血清學(xué)和NAT 檢測的256 名HCV NAT 無反應(yīng)者， 有178 名同意再次接受檢測，并且有112 名2 種方法均合格。 經(jīng)過第二輪的歸隊程序后，有85 位獻血者回歸獻血者隊伍，回歸率為23.94%（85/355）。

綜上所述，ELISA 單試劑抗-HCV 反應(yīng)性獻血者的HCV 基因分型及歸隊在血站研究中具有重要意義，不僅可屏蔽HCV 陽性者，還可體現(xiàn)出人文關(guān)懷作用，值得廣泛推廣應(yīng)用。