陰道灌洗液中炎性因子表達水平與高危型HPV持續感染的相關性

李詩函 馬煜磊

南陽醫學高等專科學校第一附屬醫院婦科(南陽 473000)

宮頸癌是一種臨床常見婦科惡性腫瘤，具有較高的發病率、死亡率[1]。有研究表明：人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)持續感染是引發宮頸癌的危險因素[2]。大多數女性在HPV感染之后的6～24個月，會從一過性的感染轉為正常，僅有極少數患者會發展成為持續HPV感染[3]。T細胞免疫調節在腫瘤免疫中發揮著重要作用，可分泌轉化生長因子-β(transforming grawth factor-β, TGF-β)、干擾素-γ(interferon-γ， IFN-γ)等一系列細胞因子，T細胞免疫調節失衡在宮頸癌的發生、發展中發揮著重要作用?；诖耍瑸樘骄扛呶Ｐ虷PV持續性感染與陰道灌洗液中炎性因子的相關性，本文選擇本院2019年3月—2021年3月接診的80例高危型HPV持續感染患者研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院2019年3月—2021年3月接診的80例高危型HPV持續感染患者作為試驗組，以病理組織檢查結果分組，將19例宮頸癌患者作為試驗組1、將30例宮頸上皮不典型增生(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)I級患者作為試驗組2，將31例CIN II、III級患者作為試驗組3，選取同期門診體檢的30例健康女性作為對照組。試驗組1：年齡26～64歲，平均(45.62±6.34)歲；體質量42～85 kg，平均(63.52±6.34)kg。試驗組2：年齡24～63歲，平均(45.51±6.29)歲；體質量44～84 kg，平均(63.67±6.31)kg。試驗組3：年齡25～63歲，平均(45.69±6.21)歲；體質量43～84 kg，平均(63.67±6.31)kg。對照組：年齡26～62歲，平均(45.71±6.19)歲；體質量46～82 kg，平均(63.64±6.28)kg。4組相比P>0.05，可比較。

納入標準：①試驗組均存在HPV持續感染史，其中試驗組1均滿足《宮頸癌診斷與治療指南》[4]中對“宮頸癌”診斷標準；②年齡在18周歲以上；③非月經期；④有正常性生活；⑤具備正常溝通、認知能力；⑥均知情，已同意并自愿參與此研究。

排除標準：①存在凝血功能異常者；②處于哺乳、妊娠期女性；③入組前接受過放化療、手術等對癥治療者；④中途退出此研究者；⑤入組前6月存在免疫調節劑、糖皮質激素用藥史者；⑥合并帕金森、狂躁癥、癡呆者；⑦既往存在盆腔放療史者；⑧入組前1周存在陰道用藥史者。

1.2 方法

(1)陰道灌洗液中炎性因子檢測：告知患者在標本采集前72 h，禁止性生活，采集前的1周不可進行陰道用藥，標本采集要避開月經期。采集標本前患者自行清潔外陰，協助患者采取截石位，將陰道用窺陰器撐開，充分暴露宮頸。宮頸活檢之前，以10 mL的生理鹽水對陰道上1/3以及宮頸部位沖洗，在宮頸內部將生理鹽水停留10 s，通過后穹隆吸出3.0～4.5 mL灌洗液，將血液標本剔除，取出灌洗液之后，以3 200 r/min離心速率、10 cm離心半徑，離心處理5 min，取上層清液并置于-80 ℃環境待檢。灌洗液取出后解凍，以ELISA法檢測TGF-β、IFN-γ、白細胞介素-17(interleukin-17, IL-17)、白細胞介素-6(interleukin-16, IL-6)，試劑盒均由上海廣銳生物科技有限公司提供，一切操作謹遵相關說明書完成。

(2)高危型HPV負荷量檢測：采用HPV專用的宮頸刷，對宮頸順時針刷5次，采集宮頸口脫落細胞，將其置于-4 ℃環境待檢。以第2代雜交捕獲法基因雜交信號放大系統檢測高危型HPV負荷量。

1.3 觀察指標

比較4組TGF-β、IFN-γ、IL-17、IL-6水平、高危型HPV負荷量。

1.4 統計學方法

2 結 果

2.1 陰道灌洗液炎癥因子4組比較

試驗組1的TGF-β、IL-17、IL-6水平均高于試驗組2，試驗組2高于試驗組3，試驗組3高于對照組，P<0.05；試驗組1的IFN-γ水平低于試驗組2，試驗組2低于試驗組3，試驗組3低于對照組，P<0.05，見表1。

表1 陰道灌洗液炎癥因子4組比較

2.2 高危型HPV負荷量4組比較

試驗組1的 高危型HPV負荷量高于試驗組2，試驗組2高于試驗組3，試驗組3高于對照組，P<0.05，見表2。

表2 高危型HPV負荷量4組比較

2.3 陰道灌洗液炎癥因子與高危型HPV負荷量相關性

TGF-β、IL-17、IL-6水平與高危型HPV負荷量呈正相關性，與IFN-γ水平呈負相關性，P<0.05，見表3。

表3 陰道灌洗液炎癥因子與高危型HPV負荷量相關性

3 討 論

大量研究證實：HPV持續性感染是引發宮頸癌的重要因素，多見于育齡期女性，將近99%的宮頸癌患者HPV檢測結果是陽性[5-6]。宮頸癌患者普遍存在陰道排液、排血、白帶異常等癥狀，如果得不到有效、及時的治療，會造成癌細胞擴散，增加病死率[7]。在感染初期HPV以游離形式存在，不會引起細胞高級別病變，但在持續性HPV感染患者機體中，宿主DNA會結合HPV DNA，轉錄產生E6/E7 mRNA[8-9]。有研究表明：在清除HPV感染中細胞免疫發揮著極為重要的作用[10]。大部分HPV感染的患者，一般都有足夠的免疫細胞對抗HPV，但對于部分宮頸癌患者而言，卻存在免疫逃逸現象[11]。T細胞在腫瘤免疫應答中發揮著免疫監視、免疫調節等作用。正常人群機體T細胞處于動態平衡狀態，已達到維持免疫平衡的作用[11]。但宮頸局部炎癥反應會造成免疫抑制，有助于HPV持續性感染，促進宮頸癌發生、發展[12]。

本研究顯示：試驗組1的TGF-β、IL-17、IL-6水平均高于試驗組2，試驗組2高于試驗組3，試驗組3高于對照組，P<0.05；試驗組1IFN-γ水平低于試驗組2，試驗組2低于試驗組3，試驗組3低于對照組，P<0.05。表明HPV感染越嚴重的患者，陰道灌洗液中炎癥因子含量越高。分析如下：TGF-β屬于生長因子，與惡性腫瘤的發生、發展聯系密切，具有調控機體細胞轉換、侵襲、遷移、增殖等作用。IFN-γ可以干擾病毒蛋白組分、基因轉錄，將人體病毒清除，宮頸癌患者機體IFN-γ濃度以低表達為主，IFN-γ濃度降低，意味著患者免疫力、抵抗力降低，更容易受到HPV侵襲。IL-17屬于特征性細胞因子，可促進中性粒細胞活化、聚集，引發級聯炎癥反應。IL-6屬于Th2細胞相關因子，由多種細胞產生，可促進B細胞、T細胞增殖、分化，在早期炎癥反應中IL-6濃度會明顯增高。本研究顯示：試驗組1的高危型HPV負荷量高于試驗組2，試驗組2高于試驗組3，試驗組3高于對照組，P<0.05。表明宮頸癌患者機體高危型HPV負荷量明顯高于單純宮頸上皮瘤病變及健康人群。本研究顯示：TGF-β、IL-17、IL-6水平與高危型HPV負荷量呈正相關性，與IFN-γ水平呈負相關性，P<0.05。表明高危型HPV持續性感染患者陰道灌洗液炎癥因子與高危型HPV負荷量存在一定的相關性，HPV感染會誘導免疫功能損傷，而炎癥反應又會導致機體更容易被HPV侵襲[13-14]。由此可知，及時糾正高危型HPV持續性感染患者宮頸微環境炎癥反應，為臨床預防、治療宮頸癌提供了新思路。

綜上所述，高危型HPV持續性感染患者陰道灌洗液中TGF-β、IL-17、IL-6水平與高危型HPV負荷量呈正相關性，與IFN-γ水平呈負相關性，因此通過陰道灌洗液炎癥因子檢測，可評估HPV感染程度。