ELISA法在診斷梅毒螺旋體感染中的臨床檢驗價值

孫 楓

(山東省萊州市慢性病防治院 山東 煙臺 261400)

梅毒主要由蒼白(梅毒)螺旋體感染引起，是一種系統性的慢性的性傳播疾病，具有較高的傳染性，主要通過性行為、母嬰傳播和血液傳播[1]。該病具有全身蔓延的發展趨勢，會在病情發展的時候侵犯患者的皮膚、黏膜和許多組織器官。有相關的研究報道結果顯示，梅毒能夠對患者的中樞神經系統造成侵犯，危害到患者的心腦血管系統功能、骨骼功能等，最終患者會因為全身多個器官出現衰竭而死亡。WHO的報告結果也顯示[2]，全世界范圍內每年均會新增加超過1060萬例感染梅毒的患者，其中有超過200萬感染梅毒的孕產婦，且有超過120萬的孕產婦會將梅毒傳染給下一代，且隨著社會的發展，梅毒的傳播率呈現出逐年上升的趨勢。當梅毒螺旋體侵襲患者機體之后，會進一步生成一種具有非特異性的抗體，但是該抗體因為具有非特異性，大大增加了檢測的困難程度，不利于早期檢驗，而且晚期梅毒的病毒量會逐漸減少，仍然無法進行有效的檢驗，因此，臨床應尋找有效的方法提高診斷的準確率。為了分析不同檢驗方式對于梅毒螺旋體感染的檢出準確率，本文對此進行分析，如下：

1 資料與方法

1.1 一般性資料

選擇2019年1月到2021年1月期間到本院間到本院就診的疑似梅毒螺旋體感染患者共計50例納入研究對象，男26例，女24例；年齡20～58歲，平均年齡(29.17±3.46)歲；體質量51～76kg，平均體重量(60.24±11.78)kg。所有患者均知曉研究內容并自愿參與兩種檢驗方式；本次研究經過了院內領導的批準和院委會的審核。排除標準：合并惡性腫瘤患者；合并嚴重HPV感染的患者；合并內分泌疾病患者；肝腎功能障礙患者。

1.2 檢測方法

所有梅毒螺旋體感染患者均在采血前三天保持良好的作息和飲食，保證血液情況的穩定，采血前常規禁食禁水，清晨采血2-5ml靜脈血液，震蕩后靜置送入檢驗科，以3000r/min的速率離心5min，并分離出上層血清分別利用ELISA法和TRUST法進行檢驗。TRUST法使用上海榮盛生物技術有限公司生產的試劑盒檢驗，ELISA法利用珠海麗珠生物公司生產的ELISA試劑盒進行檢驗，為了消除誤差，所有患者均測量三次，采取平均檢測結果，且試劑盒、試紙等器械均使用同一批次，保障數據的客觀性。

1.3 觀察指標

以TPPA結果作為金標準，對ELISA法、TRUST法檢驗梅毒螺旋體感染的診斷準確率、特異度、敏感度進行對比、分析，其中診斷準確率=(真陰+真陽)÷總數×100%、特異度=真陰÷(真陰+假陽)×100%、敏感度=真陽÷(真陽+假陰)×100%。真陽性：所有結果陽性；假陽性：ELISA法、TRUST法檢驗結果陽性，金標準結果陰性；假陰性：ELISA法、TRUST法檢驗結果陰性，金標準結果陽性；真陰性：所有結果陰性。陽性為梅毒螺旋體感染，陰性為正常。

以TPPA結果作為金標準，對比ELISA法、TRUST法對不同時期梅毒螺旋體感染的檢出情況。

1.4 統計學方法

本研究所有統計學數據均錄入SPSS21.00進行數據處理、計算和分析，計量資料若服從正態分布則采用均數±標準差描述，組間比較采用獨立樣本t檢驗；計數資料用頻數或者百分比表示，組間比較采用χ2檢驗，所有檢驗均采用雙側檢驗，以P<0.05則表示差異存在統計學意義。

2 結果

2.1 ELISA法、TRUST法對梅毒螺旋體感染的診斷準確率、特異度、敏感度

ELISA法對梅毒螺旋體感染的診斷準確率、敏感度高于TRUST法，差異有統計學意義(P<0.05)；ELISA法對梅毒螺旋體感染的特異度稍高于TRUST法，差異無統計學意義(P>0.05)。如表1-2：

表1 ELISA法、TRUST法對梅毒螺旋體感染的診斷準確率、特異度、敏感度[n]

表2 對比ELISA法、TRUST法對梅毒螺旋體感染的診斷準確率、特異度、敏感度[%]

2.2 兩種檢驗方法對不同時期的梅毒螺旋體感染的檢出情況的比較

ELISA法對Ⅰ期、Ⅱ期梅毒螺旋體感染檢出率高于TRUST法，差異有統計學意義(P<0.05)；兩種檢驗方法對Ⅲ期梅毒螺旋體感染檢出率差異無統計學意義(P>0.05)。如表3：

表3 對比兩種檢驗方法對不同時期的梅毒螺旋體感染的檢出情況[n(%)]

3 討論

梅毒是臨床十分多見的性傳播疾病，主要由蒼白密螺旋體感染而全身發病，Ⅰ期、Ⅱ期的傳染性比較強，容易傳染給他人，Ⅲ期的破壞性比較大，如果損傷到中樞神經系統、心血管，還可能危及患者的生命，危害性極大，僅僅次于艾滋病[3]。梅毒已經成為了全球關注的重點、難點公共衛生安全問題。妊娠期女性合并梅毒更是威脅到孕婦、胎兒的嚴重傳染性疾病，可以通過性接觸的方式進行水平傳播[4]，該傳播方式被稱為隱性梅毒，也可以通過胎盤的血液循環進行垂直傳播，該傳播方式被稱為胎傳梅毒。近年來，隨著世界范圍內的流行傳染病的發生率提高和人們性觀念的逐漸開放，梅毒螺旋體感染的發病率也出現了逐年增長的趨勢，嚴重威脅了人們的身心健康。由于梅毒螺旋體感染的早期發病沒有明顯的疾病特征和表現，僅僅依靠對患者的病歷資料、臨床表現和常規檢查無法確診，容易被患者忽視，可能會因為漏診而威脅到疾病預后，因此梅毒的檢驗主要依靠血清學進行診斷，因此針對患者進行準確的梅毒血清篩查十分重要。早重視、早篩查、早診斷、早治療是預防梅毒不良結局的關鍵環節[5]。臨床診斷梅毒螺旋體感染的檢驗方法較多，主要有血清學檢驗、TPPA等，其中TPPA是診斷該病的金標準，但由于該檢驗的操作步驟較為繁瑣，檢驗的效率比較低，不利于大批樣本的檢驗，因此，臨床常考慮使用血清學檢驗方式進行診斷。

本次研究顯示，ELISA法對梅毒螺旋體感染的診斷準確率為80.00%、敏感度為80.00%，均高于TRUST法，差異有統計學意義(P<0.05)；ELISA法對梅毒螺旋體感染的特異度為為80.00%，稍高于TRUST法，差異無統計學意義(P>0.05)。ELISA法對Ⅰ期、Ⅱ期梅毒螺旋體感染檢出率高于TRUST法，差異有統計學意義(P<0.05)；兩種檢驗方法對Ⅲ期梅毒螺旋體感染檢出率差異無統計學意義(P>0.05)。提示ELISA法對梅毒螺旋體感染的診斷準確率比TRUST法更高，這一結果與高亞春[6]等人的研究具有一致性。ELISA法、TRUST法是臨床常用的血清學檢驗方法，傳統的TRUST法主要使用活化的心磷脂卵磷脂膽固醇進行檢驗，將VDRL抗原懸浮于含有甲苯胺紅的溶液中，和梅毒螺旋體感染患者血清中的反應素反應，導致粉紅色的凝集。有研究[7]顯示，TRUST法檢驗的準確率、敏感性均比較低，而且在系統性紅斑狼瘡、類分濕性關節炎和瘧疾患者中可能會引起假陽性，使梅毒檢測結果出現誤檢。ELISA法是通過將梅毒特異性抗體固定在微孔板上，采取雙抗原夾心法進行測定，具有操作簡單、成本低廉、試劑穩定等特點，比較容易實現自動化結果判讀和實驗操作，有利于大批量樣本的結果追溯以及檢測，被廣泛應用于臨床梅毒螺旋體感染檢測中。ELISA法可以把抗原抗體反應的特異性以及酶化學反應的敏感性進行有效的結合，因此該種方法不但敏感，而且具有比較高的特異性[8]。ELISA法具有較高的催化反應轉化率以及較高的酶純度，并且性質比較穩定，專一性較強，對梅毒的靈敏度明顯高于凝集反應。ELISA法能同時測量研究對象血清內梅毒抗體IgM和IgG，對于梅毒抗體弱陽性的標本也可以檢測出。ELISA檢測方法的準確率、敏感度相對更高，能夠顯著提高診斷的準確率，但仍然不是百分百準確的檢驗方法，因此臨床對于梅毒螺旋體感染的檢查仍然需要充分結合癥狀表現，進一步進行綜合的分析和確診。由于本次研究的樣本量不足，研究的結果具有一定的局限性，尤其是針對不同時期梅毒螺旋體感染的檢出情況的對比中，希望今后能有更大量樣本的研究，提供更為全面的結果。

綜上所述，ELISA法在診斷梅毒螺旋體感染中的準確率、特異度、敏感度均比較高，且顯著高于TRUST法，值得進一步使用推廣，但該方法仍然不是百分百準確的檢驗方式，隨著現代醫療事業的不斷進步和創新，臨床需要進一步加強對于梅毒螺旋體感染的研究，尋找更加準確的檢驗方法、為廣大患者的治愈提供希望。