不同桑樹品種桑葉的活性成分含量及綜合功能品質評價

黃金枝，石旭平，胡桂萍，張賤根，杜賢明，王軍文，俞燕芳*，鄧真華

(1.江西省蠶桑茶葉研究所，江西 南昌330202；2.江西省經濟作物研究所，江西 南昌330202；3.江西省蠶桑工程技術研究中心，江西 南昌 330202)

0 引言

【研究意義】桑葉是桑樹的主要產物，約占桑園年產干物質的36%[1]，主要用于養蠶。近年來，隨著人們生活水平的提高，養生意識逐漸增強，桑葉的藥食兩用價值可滿足人們的部分需要。桑葉被譽為“神仙葉”，含有豐富的功能活性物質，如多酚、黃酮、多糖和生物堿等[2-4]，具有抗衰老、抗疲勞、抗病毒和抑菌抗炎等藥用價值[5-7]，同時兼具美容養顏等功效。桑樹是一種經濟類樹種，可用作綠化、果樹和經濟樹種等。傳統上桑葉主要用于養蠶，用途單一，造成資源浪費。因此，開發桑葉的新用途，對于挖掘其經濟價值具有重要現實意義。【前人研究進展】馬躍飛等[8]研究表明，不同品種桑葉的總酚含量差異較大。李名潔等[9]研究不同產地及季節桑葉的1-脫氧野尻霉素(DNJ)含量變化情況顯示桑葉DNJ在不同季節和不同地域間存在顯著性差異。王彬彬等[10]比較不同部位、不同葉位間DNJ含量的變化規律表明，同一品種不同葉位桑葉的DNJ含量均隨葉位(成熟度)的增加而逐漸降低，桑樹DNJ含量與品種、葉位和采摘部位等密切相關，DNJ的合成可能與葉片的生長有關，并通過葉脈和葉柄運輸到桑樹的各部位。【研究切入點】近年來，有關桑樹的調查研究多集中于性狀調查及不同品種單一活性成分的比較分析，尚未對其綜合利用價值進行有效評估。【擬解決的關鍵問題】以35個桑樹品種為研究對象，測定分析不同品種桑葉的總酚、總黃酮、多糖和1-脫氧野尻霉素含量差異，并采用隸屬函數法對桑葉主要功能物質進行綜合評價，以期為促進桑葉資源的開發和科學利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試材料 選取35種桑樹(表1)種植于江西省蠶桑茶葉研究所桑樹種質資源圃。

表1 35種桑樹的基本信息

1.1.2 試劑 沒食子酸、蘆丁、1-脫氧野尻霉素(DNJ)標準品、芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)購自上海阿拉丁生化科技有限公司；葡萄糖、苯酚、濃硫酸、福林酚、碳酸鈉、亞硝酸鈉、氯化鋁、氫氧化鈉、乙醇、鹽酸、四硼酸鉀、硼酸、醋酸等均為分析純試劑，購自西隴化工股份有限公司；乙腈為色譜純試劑，購自德國默克公司。

1.1.3 儀器 高效液相色譜(1260Ⅱ)，美國安捷倫公司；多功能酶標儀(Varioskan LUX)，賽默飛世爾科技有限公司；紫外分光光度計(UV-2600)，日本島津公司；超聲波清洗器(KQ2200E)，昆山市超聲儀器有限公司；恒溫水浴鍋(THZ-82)，金壇市中大儀器廠；美國奧豪斯水分儀(MA35M)，美國奧豪斯儀器有限公司；臺式高速冷凍離心機(ST16R)，北京聯合科力科技有限公司；電熱恒溫鼓風干燥箱(GZX-GFC·101-3-BS)，上海添時科學儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 樣品采集及預處理 2021年5月30日，每個品種隨機選取15株，平均分成3組，每株取一年生枝條20片相同葉位的鮮葉，將其洗凈，于60℃烘干至恒重，粉碎，過60目篩，自封袋保存于-20℃冰箱，待測。

1.2.2 指標測定 總酚測定采用Folin-Ciocalteu比色法[11-13]；總黃酮測定采用亞硝酸鈉-硝酸鋁法[14]；多糖測定采用苯酚硫酸法[15]；1-脫氧野尻霉素(DNJ)測定采用芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)柱前衍生液相色譜法[16]。

1.3 桑葉功能品質綜合評價

采用隸屬函數法對不同品種桑葉的功能進行綜合評價[17]。將總酚(因子1)、總黃酮(因子2)、多糖(因子3)和DNJ(因子4)作為桑葉的功能品質指標，分別將各因子含量測定值標準化，得到隸屬函數值，再計算每個品種的平均隸屬函數值。當平均隸屬函數值>0.6，表明該品種桑葉功能品質表現好，0.4<平均隸屬函數值<0.6，該品種桑葉功能品質表現一般，平均隸屬函數值<0.4，該品種桑葉功能品質表現差。隸屬函數值計算公式：

Xi=(Xi-Xmax)/(Xmax-Xmin)，i=1，2，3…，n

式中，Xi為某品種桑葉i指標的測定值，Xmax為試驗品種中i指標最大值，Xmin為試驗品種中i指標最小值。

1.4 數據統計與分析

采用Excel 2007、SPSS 20.0和Origin 8.0對試驗數據進行統計分析與繪圖。

2 結果與分析

2.1 不同品種桑葉的總酚含量

從不同品種總酚的含量變化(圖1)看出，總酚含量為越南桑>太平5號大龍種>金10>白果桑2號>吉梅4號>修江2號>劍持桑>小北魯桑>大中華>青皮瓦桑>渣蓮1號>小冠桑>太平1號>落花桑>團頭荷葉白>浙9093>育237>白色青>桂華密>向塘桑>紅果1號>璜桑7號>修江6號>麻桑>紅星5號>黃馬實生桑>桑海5號>修水青皮桑>修江5號>吉梅2號>璜桑37號>南崗2號>紅皮瓦桑>興國桑。平均含量為13.23 mg/g；興國桑的總酚含量最低，為7.15 mg/g；越南桑最高，達19.30 mg/g，是興國桑的2.70倍。

圖1 不同桑樹品種桑葉的總酚含量

2.2 不同品種桑葉的總黃酮含量

由圖2可知，不同品種總黃酮含量差異較大，依次為越南桑>紅皮瓦桑>黃馬實生桑>太平5號>白果桑2號>吉梅4號>修江5號>小冠桑>大中華>璜桑37號>桑海5號>大種桑>金10>渣蓮1號>落花桑>吉梅2號>劍持桑>太平1號>團頭何葉白>修江6號>育237號>青皮瓦桑>浙9093>麻桑>紅星5號>向塘桑>白色青>興國桑>璜桑7號>修江2號>修水青皮桑>桂花密>小北魯桑>南崗2號>紅果1號。平均含量為34.18 mg/g；紅果1號的總黃酮含量最低，為19.43 mg/g；越南桑最高，達48.92 mg/g，是紅果1號的2.52倍。

圖2 不同桑樹品種桑葉的總黃酮含量

2.3 不同品種桑葉的多糖含量

從不同品種多糖的含量變化(圖3)看出，多糖含量為渣蓮1號>團頭何葉白>璜桑7號>小冠桑>青皮瓦桑>桂花密>越南桑>大種桑>吉梅4號>修江5號>太平5號>向塘桑>浙9093>白果桑2號>紅星5號>太平1號>白色青>修江2號>育237號>桑海5號>金10>小北魯桑>麻桑>落花桑>大中華>修水青皮桑>紅果1號>修江6號>興國桑>吉梅2號>紅皮瓦桑>黃馬實生桑>南崗2號>劍持桑>璜桑37號。平均含量為131.95 mg/g；璜桑37號的多糖含量最低，為74.32 mg/g；渣蓮1號最高，為189.58 mg/g，是璜桑37號的2.28倍。

圖3 不同桑樹品種桑葉的多糖含量

2.4 不同品種桑葉的DNJ含量

由圖4可知，不同品種DNJ含量差異明顯，依次為紅皮瓦桑>育237號>桑海5號>渣蓮1號>璜桑37號>落花桑>南崗2號>吉梅4號>團頭何葉白>白果桑2號>璜桑7號>興國桑>小冠桑>越南桑>太平5號>紅星5號>向塘桑>浙9093>吉梅2號>劍持桑>修江2號>大種桑>金10>黃馬實生桑>大中華>修江6號>麻桑>小北魯桑>太平1號>桂花密>紅果1號>修江5號>修水青皮桑>白色青>青皮瓦桑。平均含量為1.34 mg/g；青皮瓦桑的DNJ含量最低，為0.46 mg/g；紅皮瓦桑最高，達2.21 mg/g，是青皮瓦桑的4.80倍。

圖4 不同桑樹品種桑葉的DNJ含量

2.5 桑葉功能品質的綜合評價

從表2看出，參試品種桑葉的平均隸屬函數值為0.18～0.80。綜合功能品質好(X>0.6)的7個品種分別為越南桑、太平5號、渣蓮1號、吉梅4號、白果桑2號、團頭荷葉白、小冠桑；綜合功能品質差(X<0.4)的12個品種分別為劍持桑、桂花密、白色青、麻桑、修江6號、璜桑37號、吉梅2號、北桑19號、興國桑、南崗2號、紅果1號、修水青皮桑；其余品種綜合功能品質一般(0.4

表2 不同桑樹品種桑葉功能品質的綜合評價

3 討論

桑葉含有豐富的生物活性成分，其有效成分差異不僅受遺傳和生理特性影響，同時受采收時間、采收部位及產地等影響。沈維治等[18]研究表明，7份桑種質資源中桑葉的總多酚含量差異較大，變幅為7.84～17.28 mg/g；張芳等[19]測定53個品種桑葉的黃酮、多酚和多糖含量發現，不同品種間活性物質含量差異較大；劉利等[20]研究發現，桑葉中黃酮含量與桑樹的抗逆性呈正相關，抗逆性越強，黃酮含量越高。研究結果顯示，35個品種桑葉的總酚、總黃酮、多糖和DNJ含量差異明顯，與趙東曉等[21]的研究結果一致。同一栽培管理條件下，35個品種桑葉的總酚、總黃酮、多糖和DNJ含量品種間存在較大差異，表明其活性成分含量主要受遺傳因素影響，因為不同品種的基因型存在明顯差異[22]。因此，為充分挖掘桑葉的功能價值，應加強桑品種資源篩選。

35個桑樹品種中，綜合功能品質好(X>0.6)的7個品種分別為越南桑、太平5號、渣蓮1號、吉梅4號、白果桑2號、團頭荷葉白、小冠桑，表明其總酚、總黃酮、多糖和DNJ含量的綜合功能價值較高，適宜作為功能食藥用品的原料進行開發，可推廣種植；綜合功能品質差(X<0.4)的12個品種分別為劍持桑、桂花密、白色青、麻桑、修江6號、璜桑37號、吉梅2號、北桑19號、興國桑、南崗2號、紅果1號、修水青皮桑，不適宜作為桑葉綜合利用的基礎原料；其余品種綜合功能品質一般(0.4

4 結論

不同桑樹品種桑葉活性成分存在明顯差異，總酚、總黃酮、多糖和1-脫氧野尻霉素的平均含量分別為13.23 mg/g、34.18 mg/g、131.95 mg/g和1.34 mg/g。綜合功能好的桑樹品種依次為越南桑、太平5號、渣蓮1號、吉梅4號、白果桑2號、團頭荷葉和小冠桑，適宜作為功能食藥用品原料推廣種植。