超聲造影TIC定量參數在乳腺癌分期早期診斷中的應用

李梅， 鄭綏麗， 劉楚

(崇左市人民醫院超聲醫學科，廣西省崇左市532200)

乳腺癌為女性常見惡性腫瘤，其發病早期臨床癥狀不明顯，檢出率不高，疾病后期可發生乳房上皮組織增生失控，甚至癌細胞遠端轉移，嚴重影響患者預后轉歸。近年來，免疫組織化學檢查所提供的分子生物學信息可協助追蹤細胞產物來源，確定細胞分化程度，為乳腺癌診斷和治療提供重要參考[1-2]，但該方法需進行組織活檢，患者接受程度偏低。在乳腺癌形成、發展中，血管新生提供腫瘤生長所需的血液灌流，為其重要的病理特征表現，且其出現時間早于腫瘤形態學改變，有望成為乳腺癌早期診斷及病情評估的新依據[3]。超聲造影對疑似病變區域血管形成及灌流情況進行檢查，目前已應用于多種癌癥診斷[4-5]。本研究回顧性分析乳腺癌患者臨床資料，以評價超聲造影時間-強度曲線(time-intensity curve，TIC)對乳腺癌分期的評估效能，現報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

回顧性選擇本院2020年2月—2021年2月住院的乳腺癌患者109例，年齡26～77歲，平均(50.63±8.30)歲；TNM分期Ⅰ期22例，Ⅱ期35例，Ⅲ期38例，Ⅳ期14例；病理類型均為浸潤性導管癌。根據腫瘤TNM分期分為中早期組(Ⅰ～Ⅱ期)57例與晚期組(Ⅲ～Ⅳ期)52例。納入標準：①于本院接受TIC及分子生物學標志物相關檢查；②符合《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范(2013版)》診斷標準[6]；③初次診治，尚未放化療或手術治療。排除標準：①合并其他類型惡性腫瘤；②臨床資料保存不完整。

1.2 TIC方法

采用CanonApLio i800型超聲診斷儀，i8LX5寬頻線陣探頭，機械指數為0.09?；颊咂脚P暴露乳房，以線陣探頭對乳房、腋窩等部位進行掃查，重點關注病灶區域，對感興趣區實施造影檢查，通過彈丸式注射將造影劑注入肘正中靜脈，隨后推注5 mL生理鹽水，并將3 min內動態連續圖像存儲于超聲診斷儀內。對相關圖像材料實施脫機分析，對病灶區域造影增強特點進行觀察，重點關注增強程度及病灶徑線變化情況，通過QLAB軟件對病變區域、周圍組織血流顯像進行分期，獲取超聲造影TIC相關參數。比較兩組TIC相對上升斜率、達峰時間、達峰強度、曲線下面積。

1.3 免疫組化

取病灶活檢標本，4%甲醛溶液固定,石蠟包埋，3 μm厚度切片，SP染色法對雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)、人表皮生長因子-2(human epidermal growth factor-2，HER-2)、增殖相關核抗原ki-67表達情況進行測定。ER、PR陽性表達判定：腫瘤細胞核染色≥10%判定為陽性，<10%為陰性。HER-2則記錄染色后細胞膜部位呈現棕色顆粒著色的陽性細胞數,≥10%為+，≥20%為++，≥30%為+++，+為陰性，++為不確定性，+++為陽性。ki-67依據細胞核棕黃色染色百分比進行確定，≥14%為陽性，<14%為陰性。比較兩組ER、PR、HER-2、ki-67表達情況。

1.4 統計學方法

2 結 果

2.1 影像學特征

109例乳腺癌病灶直徑0.7～5.6 cm，超聲造影增強顯示病灶多呈向心性增強，達峰時則可見病灶高增強，多見中央灌注缺損、不均勻性增強，典型病例見圖1。

2.2 兩組TIC相關參數的比較

晚期組TIC相對上升斜率、達峰強度、曲線下面積大于中早期組，達峰時間短于中早期組(P<0.05；表1)。

圖1 典型病例乳腺癌病灶造影特征A～C為中期乳腺癌，D～F為晚期乳腺癌。箭頭所示，造影劑注射15～19 s時乳腺癌病灶呈不均勻高增強、快進灌注表現，26～33 s時可見病灶區不均勻增強，中央則可見灌注缺損；紫色曲線為病灶區曲線，黃色曲線為鄰近腺體組織對比區曲線，病灶區曲線上升及下降斜率均高于周邊腺體組織區。

表1 兩組TIC相關參數的比較

2.3 兩組分子生物學標志物表達的比較

晚期組ER、PR、HER-2、ki-67陽性表達率高于中早期組(P<0.05；表2)。

表2 兩組ER、PR、HER-2、ki-67表達情況比較 單位：例(%)

2.4 TIC相關參數評估乳腺癌分期的效能分析

TIC相對上升斜率、達峰時間、達峰強度、曲線下面積評估乳腺癌分期的ROC曲線見圖2，其AUC均>0.7，具備良好的評估效能(P<0.05；表3)。

圖2 TIC相關參數評估乳腺癌分期的ROC曲線

表3 TIC相關參數評估乳腺癌分期的效能分析

3 討 論

在各類女性惡性腫瘤中，乳腺癌發病率位居榜首，約占23%[7]，近年來病死率雖有所下降，但發現較晚的患者預后不佳，故早期診斷尤為重要。

在腫瘤發生形態學改變前，其病變區域及周圍可能已經形成新生血管，故動態監測血管新生情況可幫助獲取腫瘤信息。超聲診斷技術作為腫瘤早期篩查手段，具有操作便利、無創等優勢。有研究顯示，在惡性程度較高的腫瘤患者中檢查所得峰值強度更高、達峰時間越短[8]。本研究中，晚期組TIC相對上升斜率、達峰強度、曲線下面積較中早期組更大，達峰時間則更短，而ROC曲線分析顯示，TIC相對上升斜率、達峰時間、達峰強度、曲線下面積評估乳腺癌分期的AUC分別為0.878、0.755、0.843、0.796，提示隨著腫瘤進展，乳腺癌患者局部新生血管生成更為顯著，而上述TIC相關參數在達到對應截斷值后，可于乳腺癌臨床分期評估中表現出良好效能。分析其原因，隨著腫瘤增殖、侵襲、轉移可表現出血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)受體的高表達，從而加速微血管形成。而隨著新生血管的形成，病變區域在接受超聲造影檢查時則可獲取更佳的檢查信號，表現為TIC相對上升斜率、達峰強度、曲線下面積增大，相應的相對達峰時間縮短，提示血液灌流便利度較高，故上述參數變化可直接反映病灶血供情況以及腫瘤進展情況。

ER、PR、HER-2、ki-67等分子生物學標志物表達水平被指出與乳腺癌發生發展密切相關，其中ER多于靶器官細胞內分布，PR為雌激素與前者相結合形成的產物，二者可因癌細胞增殖及激素水平紊亂而出現陽性表達[9]。HER-2為表皮生長因子受體的主要成員之一，可參與多種腫瘤細胞增殖、轉移，其水平升高可誘導癌細胞快速增殖，與乳腺癌發展關系密切[10]。ki-67則多存在于細胞核內，其在癌組織中的表達與腫瘤細胞增殖活躍度相關[11]。本研究中，晚期組ER、PR、HER-2、ki-67陽性表達率均顯著高于中早期組，提示隨著腫瘤進展及病灶血供情況的改善，ER、PR、HER-2、ki-67等更趨于陽性表達。分析其原因，上述標志物均存在于癌組織內部，其水平變化可直接反映癌細胞增殖情況。隨著腫瘤增殖活躍度提升促使ER陽性表達，并上調生長因子、血管生成因子分泌，HER-2、ki-67陽性表達率亦明顯上升。HER-2作為一類原癌基因，可在抑制腫瘤細胞凋亡的同時參與破壞乳腺周圍正常血管，上調VEGF表達，促進腫瘤新生血管生成，從而加速乳腺癌進展。

綜上所述，不同分期乳腺癌患者TIC參數、分子生物學標志物陽性表達情況不同，其中TIC參數在乳腺癌分期評估中效能顯著，提示超聲造影技術可作為分子生物學標志物檢查的替代手段，為臨床乳腺癌病情評估提供依據。