GnRHa聯合超聲射頻對子宮肌瘤患者的影響及作用機制

陳茜松， 柴 靜， 王 丹， 高淑鳳， 鄭麗莉

(唐山市婦幼保健院，河北省唐山市063000)

子宮肌瘤是女性生殖器常見的良性腫瘤，可導致不良妊娠結局，亦是子宮切除的主要原因，對女性身心健康造成一定程度的不利影響。目前臨床對于子宮肌瘤多采取藥物治療和外科手術治療，藥物治療起效慢、治療時間長,而超聲射頻是一種安全有效的微創手術，療效好，創傷小，安全性高，有助于促進子宮肌瘤患者術后恢復[1-2]。目前國內外少見報道促性腺激素釋放激素激動劑(gonadotropin releasing hormone agonist，GnRHa)聯合超聲射頻對子宮肌瘤患者血清單核細胞趨化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)、存活蛋白(Survivin，Survivin)、腫瘤特異性生長因子(tumor specific growth factors，TSGF)水平的影響，故本文對此進行了研究，現報道如下。

1 資料和方法

1.1 研究對象

選取2019年2月—2021年2月本院子宮肌瘤患者118例，分層抽樣法分為超聲射頻組(n=57)和聯合組(n=61)，兩組一般資料均衡可比(P>0.05；表1)。研究方案經本院倫理委員會批準，患者及家屬均知情且簽署知情同意書。納入標準：符合《子宮肌瘤的診治中國專家共識》[3]中子宮肌瘤診斷標準；未出現子宮內膜惡性病變；手術指征不明顯；近1年內月經周期正常。排除標準：中重度貧血，即HGB≤90 g/dL；妊娠、準備妊娠或哺乳期；近1個月內接受其他臨床研究；心血管、內分泌、消化、造血系統的慢性疾病；惡性腫瘤；精神疾病。

表1 超聲射頻組、聯合組一般資料比較

1.2 治療方法

超聲射頻組采用超聲射頻進行治療，術前10 min肌肉注射地西泮，對患者外陰進行常規消毒、暴露宮頸，探針借助B超插入引導，用以確認肌瘤位置、數目、大小，將自凝刀經引導置入，先穿入瘤體的一個方向、再從另一方向穿入，隨后進行消融，自凝刀在超聲監視下再次對另一部位肌瘤進行凝固，直至肌瘤完全凝固，對于有蒂的黏膜下肌瘤，則需采用自凝刀在肌瘤低部進行凝固，在超聲監視下用自凝刀反復凝固肌瘤蒂部直至完全切斷蒂部，夾出肌瘤，術后給予止血、抗生素3～5天預防出血和感染。聯合組在超聲射頻組基礎上，聯合GnRHa即亮丙瑞林進行治療，3.6 mg/次，每28天皮下注射1次，共注射3次。亮丙瑞林購自北京博恩特藥業有限公司(國藥準字H20093809，3.75 mg/瓶)。

1.3 臨床療效和子宮肌瘤體積觀察

將治療效果分為顯效、有效和無效。顯效：臨床癥狀消失，子宮肌瘤體積縮小≥50%且子宮無異常出血；有效：臨床癥狀部分緩解，子宮肌瘤體積縮小<50%且子宮異常出血情況有所緩解；無效：未達到上述標準。顯效加有效為總有效。

計算子宮肌瘤體積，子宮肌瘤體積=π×a×b×c/6，其中a、b、c分別代表肌瘤三維界面直徑；觀察子宮肌瘤縮小率，子宮體積縮小率(%)=(治療前體積-治療后體積)/治療前體積×100%。

1.4 酶聯免疫吸附法檢測內分泌功能指標

收集兩組清晨空腹靜脈血3 mL，3 000 r/min，離心15 min，提取上清液，采用酶聯免疫吸附法檢測治療前內分泌指標孕激素(progesterone，P)、雌二醇(estradiol，E2)、促卵泡素(follicle stimulating hormone，FSH)及血清指標MCP-1、Survivin、TSGF水平。制作標準品，稀釋樣品；在反應孔中加入稀釋的標準品100 μL/孔，35 ℃、濕育2 h；將反應板洗滌3次后，加入抗體工作液100 μL/孔，35 ℃、濕育45 min；將100 μL/孔TMB溶液加入反應孔并于35 ℃下反應45 min，加入終止液以終止反應，采用酶標儀檢測上述指標。

1.5 實時熒光定量PCR檢測微小RNA指標

收集兩組清晨空腹靜脈血3 mL，3 000 r/min，離心15 min，提取上清液，采用實時熒光定量法檢測治療前、后微小RNA-197(miR-197)、微小RNA-214-3p(miR-214-3p)水平。將1 mL Trizol加入血清樣本取總RNA并檢測其純度和濃度，提取2 μg總RNA并加入內參U6及目的小分子RNA miR-197、miR-214-3p逆轉錄引物，42 ℃ 15 min，85 ℃ 5 s，逆轉錄合成cDNA；熒光定量PCR的循環參數設定為95 ℃ 1 s，然后95 ℃ 5 s，60 ℃ 31 s，40個循環，使用Primer 5.0軟件對引物序列進行設計，Ct值(2-△△Ct)法表示miR-197、miR-214-3p水平。

1.6 統計學處理

2 結 果

2.1 兩組臨床療效和子宮肌瘤體積的比較

兩組肌瘤體積治療后均小于治療前，且聯合組治療后小于超聲射頻組治療后；聯合組肌瘤體積縮小率大于超聲射頻組(P<0.05；表2)。聯合組治療總有效率高于超聲射頻組(P<0.05；表2)。

表2 兩組臨床療效和子宮肌瘤體積的比較

2.2 兩組內分泌功能指標的比較

兩組內分泌功能指標治療后均低于治療前，且聯合組治療后低于超聲射頻組治療后(P<0.05；表3)。

表3 兩組內分泌功能指標的比較

2.3 兩組微小RNA的比較

兩組微小RNA指標治療后高于治療前，且聯合組治療后高于超聲射頻組治療后(P<0.05；表4)。

表4 兩組微小RNA的比較

2.4 兩組MCP-1、Survivin、TSGF的比較

兩組血清MCP-1、Survivin、TSGF水平治療后低于治療前，且聯合組治療后低于超聲射頻組治療后(P<0.05；表5)。

表5 兩組MCP-1、Survivin、TSGF的比較

3 討 論

子宮是女性主要生殖器官之一，亦是胚胎發育成熟的重要場所，子宮并發子宮肌瘤對女性生理健康、心理健康造成不良影響，降低女性日常生存質量。子宮肌瘤患者術前應用GnRHa可有效抑制肌瘤細胞增殖，促進肌瘤細胞凋亡、縮小肌瘤體積[4]。有研究顯示，亮丙瑞林屬于一種GnRHa中的九肽類，起效迅速，服用藥物后可明顯抑制垂體分泌FSH，進而降低卵巢分泌雌、孕激素的能力，發揮干擾腫瘤生長的作用[5-6]。超聲射頻利用高頻交流電磁場，通過射頻消融自凝刀穿刺到肌瘤組織，自凝刀周圍正負離子高速振動，產生生物熱作用于腫瘤組織，局部組織溫度高達80～100 ℃，對肌瘤組織造成不可逆性壞死，且對周圍組織損傷小[7-8]。本研究中，GnRHa聯合超聲射頻可有效減小子宮肌瘤體積，提高子宮肌瘤患者治療總有效率，其原因可能為GnRHa可通過其藥效抑制肌瘤組織生長，而超聲射頻在超聲引導下有助于發現微小和隱匿肌瘤、減少肌瘤殘留，通過物理治療使病變組織產生凝固、溶解、壞死、變性、脫落等變化，最后被機體吸收或排除體外。

臨床研究顯示，子宮肌瘤是一種性激素依賴性良性腫瘤，主要原因為雌激素、孕激素水平不穩定，產生較大的波動，其中P、E2、FSH是評價內分泌的重要指標，當內分泌出現紊亂時會導致血清P、E2、FSH水平異常升高[9-10]。本研究中，GnRHa聯合超聲射頻治療后子宮肌瘤患者內分泌指標(P、E2、FSH)降低程度更為顯著，其原因可能為兩者聯合發揮互補作用，通過與機體P受體有效結合，進而抑制卵泡發育，降低孕酮活性，促進黃體溶解，使得瘤體體積縮小。臨床研究顯示，miRNAs在子宮肌瘤以及子宮平滑肌細胞中廣泛表達及對腫瘤細胞的生長具有重要的負性調節作用，且在不同腫瘤中表達不同，其中miR-197在乳腺癌、甲狀腺濾泡癌中表達異常，且對腫瘤細胞生物學行為具有調控作用[11]。范文秀等[12]研究發現，miR-214-3p在卵巢癌組織中呈異常高表達，且其表達升高對卵巢癌細胞增殖、侵襲、遷移能力具有促進作用，為生物治療提供新靶點。本研究顯示，經GnRHa聯合超聲射頻治療后，miR-197和miR-214-3p表達顯著升高，其原因可能為兩者聯合使用可使患者肌瘤體積減小，并使肌瘤細胞增殖、凋亡加快，促使miR-197、miR-214-3p表達升高，是患者病情及治療的良好觀察指標。

MCP-1是CC趨化家族主要成員之一，具有趨化及活化單核巨噬細胞的功能，其基因啟動子部位存在核因子-κB的結合位點，若其水平降低，可抑制腫瘤細胞增殖[13-14]。Survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成員，在大多數腫瘤組織中可見其表達，其機制為Survivin通過與細胞周期依賴性蛋白CDK4結合，可發揮啟動細胞周期、促進細胞增殖分裂、抑制細胞凋亡等多種作用[15]。TSGF是經典的特異性內皮細胞有絲分裂原和血管通透性誘導因子，可有效促進腫瘤血管增生，導致子宮肌瘤的發生、發展[16]。本研究中，GnRHa聯合超聲射頻可有效降低子宮肌瘤患者血清指標MCP-1、Survivin、TSGF水平，抑制子宮肌瘤進展，其原因可能為兩種治療方式聯合使用可下調MCP-1、Survivin、TSGF，激活單核巨噬細胞功能，促進腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞增殖，抑制腫瘤血管增生，進而縮小肌瘤體積，延緩了子宮肌瘤的發展。

綜上所述，本文研究結果顯示，GnRHa聯合超聲射頻可有效改善子宮肌瘤患者肌瘤體積，降低血清MCP-1、Survivin、TSGF水平，升高微小RNA指標，是治療子宮肌瘤的有效方法，值得臨床推廣應用，但應該嚴格遵守射頻消融的適應證、禁忌證及手術時的操作規范。