3種乳制品對低免疫力模型斑馬魚免疫功能的影響

史 珅，李昊虬，王 龍，李 楠，譚圣杰，劉 華，彭桂英，李亞蘭，張 沖，FENG HAOTIAN,*

（1.內蒙古乳業技術研究院有限責任公司，內蒙古 呼和浩特 010110；2.內蒙古伊利實業集團股份有限公司，內蒙古 呼和浩特 010110；3.北京中醫藥大學生命科學學院，北京 100029）

飲奶在我國歷史悠久，是國人日常膳食的重要組成部分。《2021中國奶商指數報告》顯示，中國堅持每天攝入乳制品的人群規模約為3.6億 人，仍有超過10億 人尚未形成喝奶的習慣，但是國家衛生健康委于2020年發布的《新型冠狀病毒感染的肺炎防治營養膳食指導》提出，科學合理的營養膳食能有效改善營養狀況、增強抵抗力，有助于新型冠狀病毒感染的肺炎防控與救治，倡導國人盡量保證每天“300 g奶及奶制品”以及“吃各種各樣的奶及其制品”，可見乳及乳制品對維持國民健康的重要意義。王磊等的研究表明乳蛋白包括酪蛋白和乳清蛋白，其中牛乳中的乳清蛋白包括-乳球蛋白、-乳白蛋白、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）、乳鐵蛋白等生物活性蛋白質，不僅均衡了氨基酸的組成結構、易于吸收，還具有抑菌、緩解機體炎癥、改善腸道健康、增強機體免疫力等多種生理功效。此外，牛乳中低聚糖、溶菌酶、細胞因子等免疫活性物質可以直接或間接激活免疫系統，在改善睡眠、預防過敏和哮喘、預防和改善骨質疏松等方面發揮重要作用。乳制品是以奶為基本原料，利用加熱、發酵、干燥或混合其他物質等方式制成的液態或固態食品，包括超高溫滅菌乳、發酵乳、冰淇淋、奶粉、奶酪等形式。現代研究表明，乳制品能夠提供人體必需的VB、VA、鈣等營養素，且其營養素的吸收利用率高于其他食品，有助于提高人體免疫力。除此之外，不同的加工工藝和貯存條件能夠影響牛乳及乳制品中營養成分的吸收，但是對其發揮免疫功效的影響尚不清楚。

斑馬魚是一種新型的模式生物，具有個體小、繁殖快、與人類基因同源性高等優點。斑馬魚的免疫系統分為天然免疫和獲得性免疫系統，其天然免疫系統相關基因組與人類具有高度保守性，包括免疫細胞、免疫分子以及免疫應答方式。近年來，利用熒光標記的轉基因品系斑馬魚模型來評價產品增強免疫功能的研究報道屢見不鮮，斑馬魚已然成為研究天然免疫系統的常用動物模型。因此，本研究采用靜脈注射酒石酸長春瑞濱注射液建立斑馬魚免疫功能損傷模型，通過分析巨噬細胞數量、巨噬細胞吞噬功能和T淋巴細胞數量，探討3種常見加工方式乳制品（低溫酸奶、常溫純牛奶和冷凍酸奶冰淇淋）對實驗動物免疫功能的影響，以期為消費者提供更加營養美味的乳制品。

1 材料與方法

1.1 動物、材料與試劑

本研究選取了3種品系的斑馬魚開展實驗，分別為轉基因巨噬細胞熒光斑馬魚（品系代號：Tg（coro1a:EGFP）hkz04tTg/+）、野生型AB品系斑馬魚、轉基因T淋巴細胞熒光斑馬魚（品系代號：Tg（rag2:DsRed）zf411Tg），均由杭州環特生物科技股份有限公司提供。斑馬魚養殖以自然成對交配繁殖方式，按照實驗需要選取同品系斑馬魚雌雄比例1∶2放置于產卵缸，每次交配準備4～5 對成年斑馬魚，采用隔板將雌雄斑馬魚隔開，次日光照前抽離隔板，使其自由受精，從抽離隔板開始計時，至抽離隔板2 h后收集受精卵，平均每對能產200～300 枚胚胎。在受精后6 h和24 h對死亡胚胎進行清理移除，并根據胚胎的發育階段挑選合適的胚胎。飼養于28 ℃的養魚用水中（水質：每1 L反滲透水中加入200 mg速溶海鹽，電導率為450～550 μS/cm；pH值為6.5～8.5；硬度為50～100 mg/L CaCO），飼養符合實驗動物管理與評估協會要求（動物實驗管理小組許可證號：001458）。實驗動物使用許可證號為SYXK（2012-0171）。

全脂滅菌純牛奶（常溫純牛奶），執行標準GB 25190ü2010《食品安全國家標準 滅菌乳》，由內蒙古伊利實業集團股份有限公司生產；活菌冰淇淋（冷凍酸奶冰淇淋），執行標準9.Q/NYLC 0014S《冷凍酸奶冰淇淋》，由內蒙古伊利實業集團股份有限公司生產；全脂發酵酸奶（低溫酸奶），執行標準GB 19302ü2010《食品安全國家標準 發酵乳》，為市售某品牌杯裝增強免疫力功能保健食品酸奶，作為功能對照使用。

酒石酸長春瑞濱注射液（以下簡稱“長春瑞濱”）杭州民生藥業有限公司；過碳酸鈉 上海阿拉丁生化科技股份有限公司；熒光微球 中國Sigma-Aldrich公司。

斑馬魚培養水（養魚用水）為實驗室自制。

1.2 儀器與設備

斑馬魚養殖飼養系統 北京愛生科技有限公司；SZX7解剖顯微鏡 日本OLYMPUS公司；CCD相機上海土森視覺科技有限公司；AZ100電動聚焦連續變倍熒光顯微鏡 日本Nikon公司；CP214精密電子天平美國OHAUS公司；IM300顯微注射儀、PC-10拉針儀日本Narishige公司。

1.3 方法

1.3.1 乳制品的生產工藝流程

常溫純牛奶：收奶→過濾→冷卻貯存→（脫氣→均質→）預殺菌→（脫氣→均質→）超高溫滅菌→冷卻灌裝→包裝→出廠。

冷凍酸奶冰淇淋：首先制作酸奶基料和雪糕基料，酸奶基料：奶粉水合→混料→循環→定容→預熱→脫氣→均質→殺菌→降溫→接種→發酵；雪糕基料：混料→循環→定容→預熱→脫氣→均質→殺菌→降溫→接種。然后將酸奶基料和雪糕基料混合、乳化、降溫后得到冷凍酸奶冰淇淋成品，包裝后出廠。

1.3.2 營養成分分析方法

蛋白質量分數按照GB 5009.5ü2016《食品安全國家標準 食品中蛋白質的測定》規定的方法測定；脂肪含量按照GB 5009.6ü2016《食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》規定的方法測定；碳水化合物含量按照GB/Z 21922ü2008《食品營養成分基本術語》規定的方法測定；鈣含量按照GB 5009.92ü2016《食品安全國家標準 食品中鈣的測定》規定的方法測定；活性乳酸菌數量按照GB 4789.35ü2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 乳酸菌檢驗》規定的方法測定。營養素參考值（nutrient reference values，NRV）是食品營養標簽上比較食品營養成分含量的參考標準，是消費者選擇食品時的一種營養參照尺度，NRV計算如公式（1）所示。

式中：為100 g食物中某營養素質量/g，RNI為食物營養素推薦攝入量（recommended nutrient intake）/g。

1.3.3 免疫低下斑馬魚模型制備

將質量濃度為10 mg/mL酒石酸長春瑞濱注射液用新鮮的斑馬魚培養水配制成質量濃度為0.2 mg/mL的應用液備用。斑馬魚胚胎發育至受精后3 d自然脫膜后，挑選發育正常已開口攝食的斑馬魚，通過顯微注射的方式靜脈注射質量濃度為0.2 mg/mL長春瑞濱10 nL建立斑馬魚免疫低下模型，表現為巨噬細胞數量減少、巨噬細胞吞噬功能減弱和T淋巴細胞減少。

1.3.4 實驗動物分組及給樣方法

按照隨機分組法將受精后3 d發育正常的斑馬魚隨機分為正常對照組、模型對照組、低溫酸奶組、常溫純牛奶組、冷凍酸奶冰淇淋組，每組30 尾，斑馬魚培養水體積為20 mL，每組均加入0.5 mg質量分數0.01%過碳酸鈉增氧。根據保健食品人體日推薦劑量等效換算，低溫酸奶組、常溫純牛奶組、冷凍酸奶冰淇淋組分別給予質量濃度為8 333 μg/mL低溫酸奶、70.4 μg/mL常溫牛奶、33 333 μg/mL冷凍酸奶冰淇淋各3 mL，分別相當于200 g低溫酸奶人體每日推薦量、250 mL常溫純牛奶人體每日食用量和50 g冷凍酸奶冰淇淋人體每日食用量。將給樣后的燒杯放入28 ℃恒溫培養箱中，每間隔24 h換一次培養液。

1.3.5 對巨噬細胞數量減少的保護作用的測定

選用受精后3 d轉基因巨噬細胞熒光斑馬魚為實驗對象，乳制品連續處理4 d后，每組隨機選取10 尾斑馬魚在熒光顯微鏡下拍照，利用圖像處理軟件NIDS-Element’s進行圖像分析，統計斑馬魚泄殖孔至尾部靜脈中巨噬細胞熒光強度總和（），以統計學分析結果分別評價不同乳制品對巨噬細胞數量減少的改善作用，計算如公式（2）所示。

1.3.6 對巨噬細胞吞噬功能的保護作用的測定

選用受精后3 d野生型AB品系斑馬魚為實驗對象，將熒光微球作為異物，0.4 mg/mL長春瑞濱和熒光微球按體積比1∶1制成混合液靜脈注射受精后3 d的斑馬魚，注射體積為10 nL/尾，建立免疫功能損傷模型同時以異物引發巨噬細胞吞噬行為。乳制品連續處理4 d后，每組隨機選取10 尾斑馬魚在熒光顯微鏡下拍照，用Image J圖像分析軟件統計斑馬魚體內剩余熒光顆粒的數量（），以統計學分析結果分別評價不同乳制品對巨噬細胞吞噬功能的改善作用，計算如公式（3）所示。

1.3.7 對T淋巴細胞數量減少的保護作用的測定

選用受精后4 d轉基因T淋巴細胞熒光斑馬魚為實驗對象，乳制品連續處理1 d后，每組隨機選取10 尾斑馬魚在熒光顯微鏡下拍照，利用圖像處理軟件NIDS-Element’s進行圖像分析，統計斑馬魚T細胞熒光強度（），以統計學分析結果分別評價不同乳制品對T細胞數量減少的改善作用，計算如公式（4）所示。

1.4 數據處理與分析

采用SPSS 26.0軟件進行統計學分析，數據結果以平均值±標準差表示，組間比較采用獨立檢驗，＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果與分析

2.1 3種奶制品營養成分和活性菌群成分分析

2.1.1 常溫純牛奶檢測結果

常溫純牛奶的主要營養成分檢測結果如表1所示。蛋白質量分數（3.32f0.03）%，NRV為5%，優于滅菌乳蛋白質國家標準GB 25190ü2010《食品安全國家標準 滅菌乳》基線（2.9%），即每包250 mL常溫純牛奶滿足12.5%的蛋白質營養素推薦攝入量；脂肪含量為（3.98f0.08）g/100 g，NRV為6%，優于滅菌乳脂肪GB 25190ü2010基線（3.1%），即每包250 mL常溫純牛奶滿足15%的脂肪營養素推薦攝入量；碳水化合物含量為（4.93f0.19）g/100 g，NRV為2%，即每包250 mL常溫純牛奶提供的碳水化合物的量約合推薦攝入量的5%；鈣含量為（118.60f2.29）mg/100 g，NRV為13%，即每包250 mL常溫牛奶滿足32.5%的鈣營養素推薦攝入量。

表1 常溫純牛奶的營養成分檢測結果（n＝5）Table 1 Results of determination of nutritional components in normal temperature milk (n = 5)

2.1.2 冷凍酸奶冰淇淋檢測結果

冷凍酸奶冰淇淋的營養成分和活性菌群檢測結果如表2所示。蛋白質量分數（3.25f0.02）%，NRV為5%，即每份50 g冷凍酸奶冰淇淋滿足2.5%的蛋白質營養素推薦攝入量；脂肪含量為（8.78f0.17）g/100 g，NRV為10%，即每份50 g冷凍酸奶冰淇淋滿足5%的脂肪營養素推薦攝入量；碳水化合物含量為（25.14f0.37）g/100 g，NRV為10%，即每份50 g冷凍酸奶冰淇淋提供的碳水化合物的量約合推薦攝入量的5%。對產品中4種不同活性乳酸菌（副干酪乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌）的總活菌數在貨架期內進行了兩次檢測，第1個月檢測乳酸菌數量為3.0h10CFU/g，18個月后活性乳酸菌數量為2.0h10CFU/g，達到GB 19302ü2010《食品安全國家標準 發酵乳》中≥1h10CFU/g的標準20 倍以上。

表2 冷凍酸奶冰淇淋的營養成分檢測結果（n＝5）Table 2 Results of determination of nutritional components in frozen yogurt (n = 5)

2.2 3種奶制品對低免疫力斑馬魚巨噬細胞數量減少的保護作用

由圖1可知，與正常對照組比較，模型對照組巨噬細胞數量高度顯著降低（＜0.001），說明免疫功能損傷的巨噬細胞數量減少模型建立成功。與模型對照組比較，低溫酸奶、常溫純牛奶和冷凍酸奶冰淇淋對斑馬魚巨噬細胞數量減少均表現出顯著的保護作用，3種乳制品對斑馬魚巨噬細胞數量減少的保護作用分別達到47%（＜0.001）、85%（＜0.001）和32%（＜0.05）。常溫純牛奶組的巨噬細胞數量恢復到正常組水平（＞0.05），并顯著優于低溫酸奶組（＜0.05）。冷凍酸奶冰淇淋組的巨噬細胞數量與低溫酸奶組比較無顯著性差異（＞0.05）。

圖1 不同乳制品對低免疫力斑馬魚巨噬細胞數量減少的改善作用Fig.1 Ameliorative effects of different dairy products on macrophage reduction in zebrafish

2.3 3種奶制品對低免疫力斑馬魚巨噬細胞吞噬功能的保護作用

由圖2可知，與正常對照組比較，模型對照組斑馬魚體內殘留熒光顆粒的數量高度顯著降低（＜0.001），表明免疫功能損傷的巨噬細胞吞噬功能減弱模型建立。與模型對照組比較，常溫純牛奶和冷凍酸奶冰淇淋對低免疫力斑馬魚的巨噬細胞吞噬功能有顯著改善，這兩種乳制品對低免疫力斑馬魚的巨噬細胞吞噬功能的改善作用分別為66%（＜0.05）和70%（＜0.05）。低溫酸奶對斑馬魚巨噬細胞吞噬作用有改善趨勢，但與低免疫力模型對照組比較未見顯著差異（＞0.05）。

圖2 不同乳制品對低免疫力斑馬魚巨噬細胞吞噬功能的改善作用Fig.2 Promoting effect of different dairy products on macrophage phagocytosis in zebrafish

2.4 3種奶制品對低免疫力斑馬魚T淋巴細胞數量減少的保護作用

由圖3可知，與正常對照組比較，模型對照組T細胞數量高度顯著降低（＜0.001），表明免疫功能損傷的T細胞數量減少模型成功建立。與模型對照組比較，低溫酸奶、常溫純牛奶和冷凍酸奶冰淇淋對低免疫力斑馬魚的T淋巴細胞數量減少均顯示出顯著保護作用，并恢復到與正常對照組無顯著差異水平（＞0.05），這3種乳制品對低免疫力斑馬魚的T細胞數量減少的改善作用分別為89%（＜0.01）、127%（＜0.01）和140%（＜0.001）。

圖3 不同乳制品對低免疫力斑馬魚T細胞數量減少的改善作用Fig.3 Ameliorative effects of different dairy products on T cell reduction in zebrafish

3 討 論

長春瑞濱是一種半合成的長春花生物堿，具有廣譜抗腫瘤活性，且毒性低，能夠通過干擾細胞有絲分裂期微管的聚集而產生細胞毒性作用。研究表明，大劑量長春瑞濱骨髓抑制明顯，導致血小板、紅細胞和白細胞（中性粒細胞、巨噬細胞、T細胞等）數目減少，最終誘導免疫力低下。巨噬細胞為人體天然免疫系統中的重要組成部分，具有強大的識別、吞噬、清除病原體及細胞組織殘體的功能。作為免疫應答的第一道防線，可通過識別清除病原體、殺傷靶細胞、抗原提呈、免疫調節等功能維持機體的免疫穩態。T細胞可特異性地與靶細胞結合并直接殺死靶細胞，輔助或抑制B細胞產生抗體，也可通過釋放細胞因子強化免疫效應。斑馬魚的免疫系統與人類具有高度相似性，在受精后的18 h左右，前體巨噬細胞在中胚層被最早發現，并遷移至卵黃囊，受精后24 h在造血區前段分化成巨噬細胞，然后通過血液循環散布在全身。斑馬魚的前體T細胞最早在腎臟骨髓里被發現，不斷遷移至胸腺并在此分化，成熟后分布于各大組織。本研究中，靜脈注射長春瑞濱處理導致轉基因巨噬細胞熒光斑馬魚的巨噬細胞熒光強度減弱，巨噬細胞吞噬紅色熒光微球異物的速率降低，以及轉基因T淋巴細胞熒光斑馬魚的T淋巴細胞熒光強度減弱，從而直接指征斑馬魚免疫功能受損。而給予常溫純牛奶、低溫酸奶和冷凍酸奶冰淇淋后，巨噬細胞和T淋巴細胞數目的增加以及巨噬細胞吞噬能力的增強，表明其增強了低免疫力斑馬魚的免疫功能。

低溫酸奶中含有豐富的活性乳酸菌，研究表明，乳酸菌對全身免疫系統的調控大多通過參與調節適應性免疫中的體液免疫和細胞免疫進行的，也有部分通過參與調控天然免疫中的固有免疫屏障、固有免疫分子和固有免疫細胞來進行的。在細胞免疫中，乳酸菌可以提高巨噬細胞和單核細胞的活性，同時在不同的免疫微環境下可以促進巨噬細胞分化為不同的表型，在調節T淋巴細胞方面，研究發現乳酸菌能夠促進輔助性T細胞分泌白細胞介素（interleukin，IL）-2，并且在均衡新生兒輔助性T細胞（T helper cell，Th）1和Th2方面起到重要作用。本實驗結果顯示低溫酸奶具有增強免疫力的功效，顯著提高低免疫力斑馬魚的巨噬細胞（＜0.001）和T淋巴細胞數量（＜0.01）。與該保健食品酸奶可增強免疫力功能的宣稱一致，同時顯示本研究中的實驗方法具有一定的穩定性和可靠性，也給其他乳制品的免疫功能評估提供參考。

本研究中的常溫牛奶樣品含有豐富的蛋白質、脂肪、碳水化合物和鈣，可能與其免疫功能有一定的必然聯系。牛乳中含有免疫球蛋白、乳鐵蛋白等優質蛋白質，免疫球蛋白（IgG、IgA和IgM等）作為一種維持機體免疫力的重要蛋白，可與過敏原、病原微生物以及細菌結合，中和毒素，使其喪失感染侵襲宿主細胞的能力，并介導補體活化、免疫調節等免疫反應，在增強機體免疫能力、防止細菌和病毒入侵、活化補體等方面發揮重要作用；乳鐵蛋白可以抑制并殺傷病原微生物，還可與病原體的表面蛋白結合，發揮抗病毒作用，阻止病毒入侵。此外，牛乳中還含有大量酶和生物活性肽，大都具有抗菌以及抗病毒的活性，在體內起到免疫調節的作用。牛奶中通常含有3%～5%的脂質，其中包括甘油酯、類脂和游離脂肪酸等，約有98%以上的脂肪酸是以結合態甘油酯或類脂形態存在，較少部分則是以游離脂肪酸的形式存在，牛奶中的脂質成分被乳脂球膜包裹，以乳脂球的形式穩定分散。并且，牛奶中富含多不飽和脂肪酸，如共軛亞油酸、-3多不飽和脂肪酸在心血管疾病和癌癥的預防中發揮重要作用，中短鏈脂肪酸對腸道健康有益，支鏈脂肪酸又具有抗炎作用。牛奶中的另一個主要營養成分是碳水化合物，其中除了代表性的乳糖，還有一些活性多糖和低聚糖的存在，有研究發現牛乳中含有和人乳中類似的可參與免疫反應的低聚糖，參與機體免疫系統的營養支持和活化。鈣與人體的免疫力存在密不可分的關系，機體低鈣情況下，可能通過降低弗林蛋白酶（Furin）mRNA的表達，導致特定人群的血清補體C3水平降低，從而使免疫力降低，增加上呼吸道感染的危險。鈣網蛋白（calreticulin，CRT）是46 kDa大小的Ca結合內質網常駐蛋白，通過調節細胞內鈣濃度、增強抗原遞呈、清除凋亡細胞、影響小鼠的Th1/Th2平衡、參與腫瘤免疫應答、佐劑效應等方式，實現免疫調節功能。牛奶中含有乳礦物鹽形式的乳鈣，可以為機體免疫系統提供鈣源，從而維持并增強正常免疫功能。本實驗研究結果顯示常溫純牛奶含有蛋白質、脂肪、碳水化合物和鈣等營養素，并具有增強免疫力的功能，表現為能顯著增加低免疫力斑馬魚的巨噬細胞數量和T細胞數量，能顯著改善巨噬細胞的吞噬功能，并能夠使巨噬細胞數量和T細胞數量恢復到正常水平，且常溫純牛奶對低免疫力斑馬魚巨噬細胞數量的增加效果優于實驗中作為參照的“增強免疫力”功能保健食品低溫酸奶樣品。

冷凍酸奶冰淇淋是以酸奶為主要原料之一的乳制品，除了具有牛奶豐富的營養成分以外，還包含副干酪乳桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌4種優勢菌種，并且其冷凍貯藏條件較普通冷藏條件更有利于保持酸奶的性狀、營養成分和菌種活性。副干酪乳桿菌具有抑菌和增強免疫力的功效，可顯著提高腹瀉小鼠單核巨噬細胞的吞噬能力，通過提高轉化生長因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）水平，同時降低IL-6、IL-1β、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、IL-17和IL-23等炎癥因子水平，以及調節腸道菌群來維持人體消化系統的免疫穩態。保加利亞乳桿菌具有免疫激活和免疫調節的作用，主要通過提高免疫細胞的活性起到提高免疫力的功效，并能提升單核細胞活性和吞噬作用，誘導其產生多種細胞因子。研究還發現保加利亞乳桿菌的胞外多糖具有通過調節免疫力發揮對人體腫瘤細胞的顯著抑制作用。保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌的混合發酵產物對小鼠遲發型超敏反應（delayed type hypersensitivity，DTH）、免疫臟器指數、血清溶血素等細胞免疫和體液免疫特征指標均有提升作用，發揮協同增效作用。嗜熱鏈球菌可有效提高血清中IgG、IgM的含量，改善脾淋巴細胞增殖，提升巨噬細胞的吞噬功能，提高自然殺傷細胞殺傷活性。嗜酸乳桿菌可以在腸道定殖，激活巨噬細胞，誘發特異性免疫和非特異性免疫，提高淋巴細胞增殖活性。嗜酸乳桿菌胞外多糖可以提高小鼠遲發性變態反應，促進溶血空斑形成，并且通過胞壁肽聚糖影響腸道上皮細胞病理形態，促進小腸黏膜分泌分泌性免疫球蛋白A（secretory immunoglobulin A，sIgA），降低干擾素γ（interferon-γ，IFN-γ）及TNF-α的表達，增強小鼠巨噬細胞吞噬活性，促進小腸黏膜的發揮免疫調控作用。本研究中，含有上述4種菌株的冷凍酸奶冰淇淋能顯著提高低免疫力斑馬魚的巨噬細胞數量和T細胞數量，并具有改善巨噬細胞吞噬功能的作用，與各菌株的相關研究結果一致。

活性益生菌對腸道微生態的平衡和改善，以及對機體免疫力的調節作用已成為近年來的研究熱點，甚至對于過敏性鼻炎、自身免疫性疾病和低免疫力機體的保護作用也多見報道。冰淇淋作為一種常見休閑食品不僅具有獨特的口感和性狀，更重要的是其冷凍低溫的加工和貯藏方式保障了乳制品中益生菌的活性及胃腸利用率，在未來益生菌類功能食品的應用開發中值得關注。以上結果顯示，3 款乳制品均能增強免疫功能，為乳制品的免疫功能方向研究和應用提供了理論基礎，但進一步的作用機制和應用特性仍需深入研究。