2018—2020年銅綠假單胞菌的分布及耐藥性分析

張珍珍，吳素萍，王莉，楊華

北京市大興區中西醫結合醫院檢驗科，北京 100063

銅綠假單胞菌是非發酵革蘭陰性桿菌中的一種常見條件致病菌，廣泛存在于自然界及正常人體皮膚、呼吸道及腸道黏膜中，可引起肺部感染、泌尿系統感染、燒傷創面感染等[1]。2017年CHINET 中國細菌耐藥性監測報道，臨床分離出的銅綠假單胞菌僅次于大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌，位于第4 位，是院內感染的一種常見菌[2]。近年來，隨著抗菌藥物的不合理使用、侵襲性操作的不斷增加，多重耐藥的銅綠假單胞菌感染逐漸增多，為臨床治療帶來了很大困難。該研究回顧性分析了大興區中西醫結合醫院2018年1月—2020年12月臨床送檢標本中分離的340 株銅綠假單胞菌的臨床分布及耐藥情況。統計分析銅綠假單胞菌在臨床的分布特點及耐藥情況，對指導臨床醫生合理選擇抗菌藥物和醫院的感染防控有重要參考價值。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

收集該院住院患者送檢的各種類型標本，包括痰液、尿液、分泌物、抽出液、血液等，同一患者同一部位分離的菌株只選取第一株菌，共分離出340 株銅綠假單胞菌。

1.2 儀器與試劑

巧克力瓊脂平板、哥倫比亞血平板、麥康凱瓊脂平板購自鄭州安圖生物工程股份有限公司，VITEK 2 Compact 全自動鑒定藥敏分析儀及配套的鑒定藥敏卡、BacT/ALERT 3D 全自動血培養儀均購自生物梅里埃中國有限公司。

1.3 菌株分離鑒定和藥敏試驗

標本的分離培養按照《全國臨床檢驗操作規程》（第4 版）[3]進行，培養后挑取單個純菌落用VITEK 2 Compact 全自動鑒定藥敏分析儀及配套鑒定藥敏卡進行菌種鑒定和藥敏試驗。藥敏結果參照美國臨床和實驗室標準協會（CLSI）最新版進行判讀。質控菌株是金黃色葡萄球菌ATCC 29213、銅綠假單胞菌ATCC 27853和大腸埃希菌ATCC 25922。

1.4 統計方法

采用WHONET 5.6 軟件進行數據處理和統計，計數資料以株數或構成比（%）的形式表示。

2 結果

2.1 標本來源分布

2018—2020年共分離出1 341 株革蘭陰性桿菌，其中銅綠假單胞菌340 株，占25.4%。289 株銅綠假單胞菌，來源于痰液，占比達85%，其次為尿液，占比為9.1%。見表1。

表1 2018—2020年分離的銅綠假單胞菌標本來源分布

2.2 科室分布

分離的340 株銅綠假單胞菌在科室分布上，以ICU、康復醫學科、呼吸內科所占百分比高，分別為42.1%（143 株）、23.5%（80 株）、20.6%（70 株）。見表2。

表2 2018—2020年分離的銅綠假單胞菌臨床科室分布

2.3 銅綠假單胞菌對常用抗菌藥物的耐藥情況

2018—2020年銅綠假單胞菌對10 種常用抗菌藥物的耐藥率均不同，其中耐藥率最低的是阿米卡星（7.4%），耐藥率最高的是亞胺培南(49.3%)。2019年較2018年各抗菌藥物的耐藥率均顯著升高，2020年較2019年耐藥率升高趨勢有所減緩，個別藥物出現下降趨勢。見表3。

表3 2018—2020年銅綠假單胞菌對常用抗菌藥物的耐藥率

2.4 多重耐藥銅綠假單胞菌的檢出率

2018—2020年共分離出129 株多重耐藥的銅綠假單胞菌，多重耐藥率達37.9%，3年間多重耐藥的銅綠假單胞菌檢出率逐年增加，分別為25 株(30.1%)、40株（37.7%）和64株（42.4%）。其中ICU和康復醫學科多重耐藥率最高，占比分別為16.5%和10.6%。

3 討論

銅綠假單胞菌是臨床最常見的條件致病菌之一，由于抗菌藥物的大量使用，銅綠假單胞菌的耐藥率不斷地增加[1-5]。而且，銅綠假單胞菌耐藥機制比較復雜，包括產生滅活酶（β-內酰胺酶、AmpC、ESBL等）、主動外排系統過度的表達、膜孔蛋白的缺失或其表達下降、靶位的改變、細菌生物被膜的形成等[6]，其對多種抗菌藥物天然耐藥，容易獲得新的耐藥性[7]。因此，臨床上治療銅綠假單胞菌引起的感染越來越困難。

該研究結果顯示，2018—2020年該院分離的銅綠假單胞菌主要來源是痰標本，占比85.0%，與國內研究報道的痰標本占比83.2%一致[8-9]，提示銅綠假單胞菌引起的下呼吸道感染顯著高于其引起的其他類型感染。但銅綠假單胞菌極易在呼吸道定植，因此臨床痰標本中分離出的銅綠假單胞菌很難區分是致病菌還是定植菌；而且其很少引起血流感染，判斷感染與否的證據為呼吸道標本的培養結果[1]。已有研究報道合格的痰標本和支氣管肺泡灌洗液的培養結果符合率可高達96.5%[10]，亦有研究顯示，分離自痰標本中的銅綠假單胞菌和患者的遠期病死率密切相關[11]。因此，即使分離自痰標本中的銅綠假單胞菌也應被重視，其可能是院內感染的一種潛在感染源。

這3年期間，各臨床科室銅綠假單胞菌的檢出率均不相同，其中ICU 檢出率最高，占比達42.1%（143株），可能原因是ICU患者常合并多種基礎性疾病，實施各種有創性操作（如氣管插管、氣管切開、中心靜脈留置導管等），使用廣譜抗菌藥物和激素治療，人體抵抗力下降導致銅綠假單胞菌感染率高[12]。2018年和2019年ICU 檢出率分別為51.8%、54.7%，而2020年檢出率顯著降低（27.8%），康復醫學科銅綠假單胞菌的檢出率逐年增加，由2018年9.6%增長到2020年33.8%，成為2020年檢出率最高的科室，與醫院大力發展康復科、康復科多數是心腦血管疾病術后康復鍛煉患者有關。

2018—2020年銅綠假單胞菌對10 種常用的抗菌藥物耐藥率均不同，其中對碳青霉烯類(亞胺培南)的耐藥率明顯高于氨基糖苷類(阿米卡星、妥布霉素、慶大霉素)，對碳青霉烯類抗菌藥物(亞胺培南)的耐藥率呈現逐年增加趨勢，由32.2%升高到58.8%，可能與臨床上經驗性使用碳青霉烯類藥物治療革蘭陰性桿菌有關，其耐藥率低于全國細菌耐藥監測網[13]的報道，該研究結果顯示，碳青霉烯類(亞胺培南)耐藥的銅綠假單胞菌對廣譜頭孢菌素類（頭孢他啶、頭孢吡肟等）敏感，可能與銅綠假單胞菌的膜孔蛋白OprD2基因缺失有關[14-15]。

綜上所述，為降低感染銅綠假單胞菌的風險及耐藥率，應加強醫院感染控制，嚴格規范各項操作，根據病原學的結果以及患者的情況合理的選擇相應的抗菌藥物，定期分析該院病原菌的耐藥情況，為臨床抗感染治療提供參考依據。