特發(fā)性膜性腎病無創(chuàng)生物學(xué)標(biāo)志物的研究進(jìn)展

覃勛

河池市人民醫(yī)院腎內(nèi)科，廣西河池 547000

特發(fā)性膜性腎病（idiopathic membranous nephropathy，IMN）患者中少數(shù)患者能夠自發(fā)緩解，40%～50%患者疾病最終會進(jìn)展為終末期腎病[1]，早期診斷可以顯著改善IMN的預(yù)后。目前IMN確診需依據(jù)腎活檢穿刺組織病理，但腎穿刺活檢作為有創(chuàng)操作不可能被每一位IMN 患者接受，另外腎功能監(jiān)測、尿蛋白定量等方法特異度不高，導(dǎo)致臨床對IMN的掌握度不足。因此探究更多診斷、監(jiān)測IMN 疾病活動、評估療效和預(yù)測進(jìn)展的無創(chuàng)學(xué)生物標(biāo)志物，對IMN患者診斷、治療及預(yù)后具有重大意義。

1 診斷相關(guān)生物學(xué)標(biāo)志物

1.1 血清M 型磷脂酶A2 受體(M-type phospholipase A2 receptor，PLA2R)

PLA2R 是腎小球足細(xì)胞上主要的靶抗原，71.4%～90.7%的IMN 患者發(fā)生與PLA2R 相關(guān)[2]。周俊等[3]研究結(jié)果顯示IMN 抗PLA2R 抗體陽性率為87.72%，血清抗PLA2R 抗體水平診斷IMN 的靈敏度為87.72%，特異度為94.12%。侯俊英等[4]發(fā)現(xiàn)抗PLA2R 抗體陽性率達(dá)到70.3%，ROC 曲線AUC 為0.82。PLA2R 抗體的敏感性表現(xiàn)出較大的差異的原因，一是地區(qū)差異的影響，二是檢測方法及納入的患者存在個體差異。上述研究提示血清抗PLA2R 抗體對于診斷IMN 具有較高的特異度，但其敏感度稍低，可能出現(xiàn)漏診。

1.2 1 型血小板反應(yīng)蛋白7A 域(thrombospondintype 1 domain-containing 7A，THSD7A)

THSD7A 是繼PLA2R 后發(fā)現(xiàn)的IMN 的另一個靶抗原[5]。相關(guān)研究證實(shí)，THSD7A與IgG4在抗PLA2R抗體陰性膜性腎病患者機(jī)體均有表達(dá)，提示了THSD7A 可以作為IMN 鑒別診斷的生物標(biāo)志物之一。一項(xiàng)涉及4 121 名參與者的Meta 分析指出THSD7A 在所有IMN 患者中的陽性率為3%，在PLA2R 陰性IMN 患者中陽性率為10%[6]。此外，在THSD7A 陽性的患者中，有3/10 的文獻(xiàn)均報告THSD7A 陽性的患者中有惡性腫瘤存在，其發(fā)病率從6%～25%不等[7]，提示THSD7A 可以聯(lián)合PLA2R可以輔助鑒別診斷IMN，也可以為早期惡性腫瘤的預(yù)警提供依據(jù)。

1.3 人類白細(xì)胞DR 抗原(human leukocyte antigen DR，HLA-DR)

HLA-DR 是單核細(xì)胞表面的一種高度多態(tài)性的重要抗原[8]。1979年首次發(fā)現(xiàn)HLA-DR 與IMN 存在相關(guān)性，并在隨后更多的隊(duì)列研究中得到證實(shí)。每個人類白細(xì)胞抗原分子與具有特定序列或物理特征的肽組結(jié)合，并將它們呈現(xiàn)在細(xì)胞表面，由T 細(xì)胞識別通過T 細(xì)胞受體參與。因此，IMN 的每種自身抗原都可能有自己特定的HLA 風(fēng)險等位基因，提示HLA-DR可作為診斷IMN的潛在生物標(biāo)志物。

1.4 溶酶體膜蛋白-2(lysosome membrane protein-2,LIMP-2)

LIMP-2是在溶酶體和核糖體中合成的CD36超級家族成員。有學(xué)者通過免疫熒光現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)，IMN患者尿液中LIMP-2水平呈現(xiàn)高表達(dá)，在微小病變腎病、IgA 腎病、膜增生性腎小球腎炎等其他腎病和正常健康者尿液中無表達(dá)[9]，提示了LIMP-2 在IMN 中特異性表達(dá)對于診斷IMN和鑒別IMN和其他腎小球疾病方面具有的意義。

1.5 環(huán)狀RNA(circRNAs)

circRNAs 是一種具有miRNA 海綿功能的非編碼RNA，可通過吸附與IMN 相關(guān)的miRNA 而參與IMN 的產(chǎn)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸過程。Ma H 等[10]通過基因測序技術(shù)發(fā)現(xiàn)IMN患者的血清和尿液外泌體中多種circRNA 存在差異性表達(dá)，特別是7號染色體上編碼為chr7:100550808|100551062 的circRNA 所對應(yīng)的MUC3A 基 因均 有上 調(diào) 趨 勢。Jin X 等[11]在IMN 患 者血清檢測circRNA，驗(yàn)證了5個差異表達(dá)的circRNA，其中circ101319 的表達(dá)水平最高，診斷IMN 的敏感性和特異性分別為93.33% 和70.00%。提示circRNA 可作為診斷IMN 的潛在生物標(biāo)志物，且具有高穩(wěn)定性，獲得方法簡易的優(yōu)勢，應(yīng)用前景值得期待。

1.6 微小RNA（miRNAs）

miRNAs 是一類內(nèi)源性非編碼小分子單鏈RNA。研究證實(shí)，IMN 患者的血液、尿液和腎組織中的miRNA表達(dá)與正常人存在差異[12]。IMN患者尿液中的miRNA-193a 較健康人群表達(dá)明顯上調(diào)，隨著IMN 患者病變程度加重，尿液中miRNA-193a 的表達(dá)也顯著上調(diào)[13]。Jing L 等[14]研究發(fā)現(xiàn)在IMN 患者的腎臟組織和血漿中miRNA-217 的表達(dá)明顯下調(diào)，當(dāng)miR-217 水平低于750copies/μL 時，診斷MN 的敏感性為88.9%，特異性為75.9%。提示miRNA 可通過促進(jìn)足細(xì)胞的凋亡導(dǎo)致IMN 的發(fā)生，可以用于IMN 的診斷。因此，在對miRNA 進(jìn)行調(diào)控時應(yīng)注意其在疾病中的表達(dá)和機(jī)制。

1.7 長鏈非編碼RNA（LncRNA）

LncRNA 是一類由RNA 聚合酶II 轉(zhuǎn)錄的非編碼RNA[15]。研究表明，AngII 促進(jìn)MN 足細(xì)胞凋亡與TLR4 高表達(dá)有關(guān)，主要表現(xiàn)為XIST 及TLR4 表達(dá)水平上升，miRNA-217 水平降低[16]。分析可能是XIST通過抑制miRNA-217 表達(dá)對TLR4 進(jìn)行調(diào)控。上述研究說明了尿液中XIST 有望成為IMN 的潛在生物標(biāo)志物，而通過靶向下調(diào)XIST 表達(dá)可能成為治療IMN患者足細(xì)胞損傷的有效生物靶點(diǎn)。

2 治療及預(yù)后相關(guān)標(biāo)志物

2.1 PLA2R

血清抗PLA2R 抗體滴度與尿蛋白定量、肌酐、總蛋白、白蛋白相關(guān)，提示血清抗PLA2R 抗體能夠很好地反映IMN 嚴(yán)重性以及活動性抗。PLA2R 抗體在IMN 活動期表現(xiàn)出高水平狀態(tài)，但在緩解期表現(xiàn)低水平[17]。腎活檢結(jié)果中的血清抗PLA2R抗體可作為評估IMN 治療效果的敏感性指標(biāo)，血清中抗PLA2R 抗體低表達(dá)表明患者治療效果較佳，腎損傷緩解程度更高[18]，抗PLA2R 抗體的基線處于較高滴度時，顯著增加IMN 患者到達(dá)腎功能終點(diǎn)的風(fēng)險。由此可見，血循環(huán)中抗PLA2R 抗體在IMN 活動監(jiān)測、療效/預(yù)后評價等方面扮演重要角色。

2.2 THSD7A

有學(xué)者認(rèn)為，血清THSD7A 參與IMN 的活動抗性主要體現(xiàn)在：血清中THSD7A 表達(dá)直接影響了尿蛋白水平[19]。但此觀點(diǎn)與相關(guān)研究結(jié)果不符[20]。可能與IMN 患者中THSD7A 陽性者占比明顯偏低，使相關(guān)研究結(jié)果受限有關(guān)，將來需要大樣本隊(duì)列進(jìn)一步分析血清THSD7A 與IMN 患者疾病活動、治療療效及腎臟預(yù)后的關(guān)系。

2.3 視黃醇結(jié)合蛋白(retinol binding protein，RBP)

RBP 由肝臟合成，在腎臟發(fā)生病變時其濃度可發(fā)生異常改變。研究表明，尿IgG 或包括β2-微球蛋白、α1-微球蛋白和RBP的低分子量蛋白表達(dá)對IMN患者的腎臟結(jié)局具有很好警示作用[21]。RBP 與IMN患者蛋白尿水平顯著相關(guān)，且與IMN 患者的腎小球?yàn)V過率呈負(fù)相關(guān)[7]，提示RBP 可作為反映IMN 腎功能狀態(tài)和預(yù)測腎臟預(yù)后的生物指標(biāo)。此外，尿RBP水平可作為評估IMN療效及腎臟轉(zhuǎn)歸的生物學(xué)敏感物質(zhì)，在短期內(nèi)可以反映IMN 患者接受利妥昔單抗治療的效果。

2.4 足細(xì)胞纖溶酶（podocalyxin，PCX）

PCX 是位于腎小球足細(xì)胞的頂端細(xì)胞一種跨膜蛋白。研究通過結(jié)合PCX 和臨床參數(shù)（年齡、eGFR和糖尿病史）建立的MN 診斷模型，該模型ROC 曲線下面積為0.862，靈敏度為80.5%，特異性為73.5%，證實(shí)了PCX 是診斷膜性腎病的一個有用的生物標(biāo)志物[22]。但該研究納入研究對象中包括原發(fā)性膜性腎病和繼發(fā)性膜性腎病的患者，因此，主要用于鑒別膜性腎病和其他表現(xiàn)為腎病綜合征的腎小球疾病。同時，這項(xiàng)研究也表明了這種診斷模型在抗PLA2R抗體敏感性較低的人群中的臨床意義。

2.5 白細(xì)胞介素-8(interleukin-8，IL-8)

研究發(fā)現(xiàn)，尿白細(xì)胞介素-8(IL-8)參與IMN機(jī)體緩解的全過程[23]。尿液IL-8預(yù)測IMN患者完全緩解的ROC 曲線的靈敏度為83%，特異性為51%，最佳臨界值為61.65 pg/mL。因此，尿IL-8 可作為評估IMN患者短期療效生物學(xué)標(biāo)志物。

3 結(jié)語及展望

IMN 相關(guān)無創(chuàng)生物標(biāo)志物對IMN 的診斷、活動評估、療效評定、腎臟轉(zhuǎn)歸預(yù)測等方面發(fā)揮重要作用，但目前臨床尚缺乏一種高特異性及敏感性生物標(biāo)志物。血清抗PLA2R 抗體雖為較廣泛應(yīng)用的敏感指標(biāo)，但仍需深入探究使用價值更高的生物標(biāo)志物。目前有關(guān)尿液和非編碼RNA 生物標(biāo)志物應(yīng)用的研究鮮有報道，前景廣闊，尚需更可靠的研究明確其在IMN發(fā)生發(fā)展中的作用。