荊芥中有機磷類農藥殘留測定方法的建立及殘留狀況調查

周國威 賈月梅 趙亞文 李海鷹

摘要：目的研究中藥材荊芥中有機磷類農藥的殘留情況，為荊芥的綠色種植和監管提供參考依據。方法通過建立氣相色譜-火焰光度檢測器（GC-FPD）同時分析測定9種有機磷類農藥的方法，并用于20批次荊芥中農藥殘留狀況研究，然后對檢測結果進行分析。結果在檢測的20批次樣品中，有4批樣品檢出了3種有機磷類農藥，分別是氧化樂果、久效磷和對硫磷，其中有2批樣品檢測出對硫磷殘留，檢出濃度分別為0.083 mg/kg和0.090 mg/kg，氧化樂果和久效磷殘留的檢出濃度分別為0.065 mg/kg和0.068 mg/kg。結論建立的方法操作簡便、快速和準確，可用于荊芥中9種有機磷類農藥殘留的測定，所測荊芥雖不同程度受到有機磷類農藥污染，但未超過歐洲藥典（EP9.0）中的最大農藥殘留限量標準。

關鍵詞：荊芥;有機磷;農藥殘留;GC-FPD

中圖分類號：R282? 文獻標志碼：A? 文章編號：1007-2349（2022）06-0062-04

荊芥，始記于《神農本草經》，常作為解表藥，應用于中醫臨床治療中，現代藥理研究發現，它有解熱、抗炎、鎮痛、抗菌、抗病毒和抗腫瘤作用[1-3]，用途十分廣泛。隨著野生中藥資源的匱乏，人工種植逐漸成為中藥材的主要來源[4]，與傳統農作物相似，規模化種植過程中，會使用農藥防治病蟲害，因此可能導致中藥材中存在農藥殘留。

有機磷類農藥作為一種廣譜的殺蟲劑，因其具有廉價、高效等優點，有不少種類被廣泛應用[5]，但因其急性毒性強，在環境和作物中的農藥殘留可通過食物富集作用而影響人類健康[6]，因此，為加強對中藥材中此類農藥殘留的監控力度，建立快速、有效、靈敏度高和多殘留同時檢測的農藥殘留檢測方法已經成為評控中藥材中農藥殘留量的重要任務。

本研究建立了快速、有效、低成本的氣相色譜-火焰光度檢測器（GC-FPD）法，可同時測定荊芥中9種有機磷農藥的殘留量，并調查分析荊芥中有機磷類農藥殘留狀況，為荊芥的綠色規范種植和監管提供農藥殘留監控依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 GC-2010plus 型氣相色譜分析儀（帶火焰光度檢測器）和AOC-20i 型自動進樣器（日本SHIMADZU公司）;2-6型離心機（德國Sigma公司）;AG204型電子分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）。

1.2 試藥 乙腈（批號：20181202001，純度：色譜純），天津賽孚瑞科技有限公司;正己烷（批號：20180715001，純度：色譜純），天津賽孚瑞科技有限公司;甲苯（批號：2018032101，純度：色譜純），上海安譜實驗科技股份有限公司;敵敵畏標準品（批號：20181222）、甲胺磷標準品（批號：20180906）、滅線磷標準品（批號：20181011）、甲拌磷標準品（批號：20181011）、氧化樂果標準品（批號：20180906）、久效磷標準品（批號：20180906）、樂果標準品（批號：20180906）、毒死蜱標準品（批號：20181210）、對硫磷標準品（批號：20180906），以上9種農藥標準品規格均為：100 μg/mL，購自農業部環境保護科研監測所。

1.3 試樣 荊芥樣品信息及其對應序號，見表1。

2 方法與結果

2.1 溶液的制備

2.1.1 混合標準品儲備液制備 精密量取各農藥標準溶液1 mL，置100 mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，搖勻，得1 μg/mL的9種有機磷農藥混合標準溶液，置于0～4 ℃下，避光保存。

2.1.2 供試品溶液制備 將荊芥樣品粉碎，過3號??? 篩，精密稱定1.0 g樣品，置于20 mL離心管中，加入乙腈5 mL，渦旋提取5 min，4000 r/min離心10 min，將上層清液轉入雞心瓶中，再用乙腈5 mL提取一次，合并提取液，減壓濃縮至2 mL，待凈化。

固定好石墨化碳/氨基固相萃取柱，加約1 cm高無水硫酸鈉，用乙腈∶甲苯（3∶1）溶劑3 mL預淋洗，當柱內液面即將到達硫酸鈉頂部時，將上述濃縮液倒入柱中，用2 mL乙腈：甲苯（3∶1）洗脫液洗滌三次后，再用10 mL乙腈：甲苯（3∶1）洗脫2次，用雞心瓶收集流出液，于旋轉蒸發儀上40 ℃濃縮至干，加1 mL正己烷溶解，即得。

2.2 色譜條件 毛細管色譜柱：DB-1701（30 m×0.32 mm，0.25 μm）;進樣口溫度：250 ℃;檢測器溫度：250 ℃;程序升溫：初始柱溫50 ℃，以30 ℃/min升至130 ℃，以8 ℃/min升至220 ℃，保持1 min，以20 ℃/min升至250 ℃，保持3 min;載氣為氫氣（純度≥99.999 %），其流量：65 mL/min;空氣流量：90 mL/min;進樣方式：不分流進樣;進樣量：1 μL。該條件下9種農藥分離良好，其混合標準溶液的GC-FPD色譜圖見圖1。

2.3 方法學考察

2.3.1 線性關系考察 精密量取“2.1”項下儲備液適量，用正己烷為溶劑，配制9種有機磷類農藥濃度依次為0.05，0.1，0.2，0.5和1 μg/mL的混合標準品溶液，進行GC-FPD測定，以進樣濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，進行線性回歸計算，結果見表2。

2.3.2 精密度試驗 精密量取“2.1”項下農藥標準品儲備液，配制濃度為0.5 μg/mL的9種農藥混合標準溶液，在上述色譜條件下進行測定，連續進樣6次，根據峰面積，計算各農藥的精密度值，結果表明：各目標農藥峰面積的RSD值為1.10 %～3.76%，表明儀器精密度良好。

2.3.3 加樣回收率試驗 準確稱取空白荊芥樣品1.0 g，精密加入農藥標準品適量，使其分別成0.2、0.5和1 mg·kg-1低、中、高3個濃度水平樣品，每個水平下分別制備3份供試品溶液，進行GC-FPD測定，結果見表3。

2.4 荊芥樣品測定 按“2.1.2”項下方法制備，在“2.2”項所述色譜條件下，對20批荊芥進行GC-FPD測定，根據峰面積，計算其中的農藥殘留量，并對測出農藥殘留的樣品，用氣相色譜-質譜法聯用儀（GC-MS）法進行驗證，結果見表4。

3 討論

3.1 方法適應性情況 在方法建立過程中，采用在中藥材農藥殘留檢測中常用的乙腈作為提取溶劑，并以溶劑消耗少、回收率高的渦旋提取、離心分離作為提取方式[7-9]。未凈化的荊芥基質成分比較復雜，故采用農藥殘留檢測中操作簡單、重現性好的固相萃取技術[10，11]，以石墨化碳/氨基固相萃取柱對荊芥樣品進行凈化，結果顯示，9種有機磷類農藥標準曲線相關系數R2在0.9984～0.9999之間，說明9種有機磷類農藥在0.05～1 μg/mL之間線性關系良好;三個添加水平的平均回收率在75.8 %～114.5 %之間，RSD在1.76 %～5.43 %之間，表明該方法準確度高，重現性好，適合荊芥中9種有機磷類農藥殘留的測定。

3.2 荊芥樣品中有機磷類農藥殘留情況 為保證檢測的結果具有指導意義，荊芥樣品采自市場流通最大的河北安國市及其周邊地區[12]，經過實地調研，選取荊芥中最后可能存在的9種農藥作為檢測目標，檢測結果顯示，20批荊芥樣品中，有4批檢出了有機磷類農藥殘留，其中樣品中檢測出的2批對硫磷殘留的濃度分別為0.083 mg/kg和0.090 mg/kg，檢出的氧化樂果和久效磷殘留濃度分別為0.065 mg/kg和0.068 mg/kg。

現在，我國還沒有關于此3種有機磷類農藥在中藥材中的最大殘留限量標準，參照最新版歐洲藥典（EP 9.0）中的標準，氧化樂果（以氧化樂果和樂果的總和為計）、對硫磷和久效磷的限量標準分別為0.1 mg/kg，0.5 mg/kg和0.1 mg/kg，由此可見，荊芥樣品中這三種農藥殘留量符合歐洲藥典（EP 9.0）中的限量要求。

本研究建立的GC-FPD法操作簡便、快速和準確，可用于荊芥中9種有機磷類農藥殘留的測定;所測荊芥樣品總檢出率（4/20）不高，檢出的有機磷類農藥殘留符合歐洲藥典（EP 9.0）中對中藥材中農藥殘留限量標準;但是與歐洲藥典相比，我國的藥典對中藥材農藥殘留的限量標準不夠完善，因此，還需國家相關部門制定合適的標準，為荊芥的規范化種植進行有效的監控和管理，以保障荊芥食用和藥用安全。

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（收稿日期：2021-09-06）