獻血者ALT 檢測結果追蹤與檢測功效的重新評估

馮娟，楊波

（安陽市中心血站，河南 安陽455000）

丙氨酸氨基轉移酶 （alanine aminotransferase,ALT）是我國現行獻血法規定的無償獻血者必須檢測的項目之一，ALT 作為非特異性檢測指標，曾作為非甲非乙型肝炎的替代性檢測指標， 在血液安全中發揮了重要的作用， 但由于該項檢測指標的非特異性使得ALT 成為血液報廢的首要原因[1-2]。2013 年8 月血站開始執行衛生部頒布的行業新標準[3]，ALT 參考區間上限由原來40 U/L 調整為50 U/L，在一定程度上降低了由ALT 非特異性升高導致的血液報廢[4]。 但隨著4 代ELISA 試劑的普遍應用及血液核酸檢測的全面覆蓋，ALT 引入獻血者篩查的意義已經發生了改變,對比國際上許多國家的篩查模式，是否取消ALT 的篩查或調整ALT 的篩查上限成為國內業內人士關注熱議的焦點[5]，因此我們應該重新正確評估ALT 在現行血液檢測模式中的功效與意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象 我站2017 年7 月至2018 年7 月251 例ALT 單項檢測不合格再次獻血的獻血者。

1.2 儀器 奧林巴斯AU400 全自動生化分析儀（日本OLYMPUS），ML-STAR CH.8 全自動加樣系統（瑞士HAMILTON），ML-FAME 24/20 全自動酶免后處理系統（瑞士HAMILTON），Uranus AE280 全自動酶免儀 （深圳愛康），ChiTas BSS1200 核酸血液篩查系統 （上海浩源生物科技有限公司），ABI7500 實時熒光定量PCR 儀 （美國應用生物系統公司）。

1.3 試劑 ALT 試劑： 美國貝克曼ALT 速率法；HBsAg 試劑：北京萬泰、法國伯樂；抗-HCV 試劑：北京萬泰、珠海麗珠；PCR 試劑：上海浩源乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒PCR-熒光法。 以上試劑均有國家批準文號和批批檢標識， 且在有效期內使用。

1.4 方法

1.4.1 常規檢測 采用酶聯免疫吸附法（ELISA）對血液標本分別進行2 次HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP 檢測， 采用速率法對獻血者標本進行1 次ALT 檢測（采血前已進行1 次速率法檢測）。

1.4.2 核酸檢測 采用PCR 方法對酶免檢測陰性的血液標本進行乙型肝炎病毒（HBV-DNA）、丙型肝炎病毒（HCV-RNA）、人類免疫缺陷病毒（HIVRNA）定性檢測。

1.4.3 追蹤檢測 2017 年7 月至2018 年7 月期間74 038 名獻血者中因ALT 單項檢測不合格的251例獻血者， 對其再次獻血進行ALT、HBsAg、 抗-HCV 和HBV-DNA、HCV-RNA 追蹤檢測。

1.5 統計學處理 應用SPSS 18.0 軟件進行統計分析，計數資料比較采用χ2檢驗，計量資料采用±s表示， 組間比較采用t 檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 獻血者ALT 與肝炎病毒指標相關性比較 結果 988 例ALT 不合格、73 050 例ALT 合格標本與HBsAg、HBV-DNA、抗-HCV、HCV-RNA 相關性結果比較，χ2值分別為2.69、0.32、9.36、0.03。見表1。

表1 獻血者ALT 與肝炎病毒指標相關性比較

2.2 獻血者ALT 不合格追蹤結果比較 251 例ALT 單項檢測不合格的獻血者6 個月后再次獻血ALT 不合格率為26.69%（67/251）；12 個月后再次獻血ALT 不合格率為25.71%（27/105）； 肝炎病毒相關性指標檢測全部陰性。 見表2。

表2 獻血者ALT 不合格追蹤結果比較

2.3 重復獻血者ALT 不合格次數結果比較 ALT 1次不合格、連續2 次不合格、連續3 次不合格檢測值分別為 （57.77±6.85）、（96.86±45.32）、（90.00±37.44）； 不同組別之間比較t 值分別為0.25、6.17、6.83。 見表3。

表3 重復獻血者ALT 不合格次數結果比較（±s）

表3 重復獻血者ALT 不合格次數結果比較（±s）

ALT 例數（n）1 次不合格連續2 次不合格連續3 次不合格P 60 57 28 ALT 值（U/L） t 57.77±6.85 96.86±45.32 90.00±37.44 0.25 6.17 6.83 P＞0.05 P＜0.05 PP＜0.05

3 討論

42 例HBV-DNA 反應性和2 例HCV-RNA 反應性標本ALT 檢測均為合格，說明ALT 異常升高晚于核酸檢測，這與金新莉等研究結果[6]是一致的， 因此ALT 檢測對篩查HBV、HCV 窗口期感染無相關性意義。 386 例HBsAg 反應性和169 例抗-HCV 反應性標本中ALT 檢測不合格僅為16 例，明顯低于非肝炎性ALT 異常升高，16 例病毒性肝炎合并ALT 異常升高者其ALT 值并無規律可尋，這是由于重型肝炎存活的肝細胞較少，ALT 活性反而隨著病情的惡化而降低， 因此不能簡單地以ALT 升高的程度來判斷肝炎病情， 也不能以ALT異常升高而判斷受檢者是否患有病毒性肝炎[7]。ALT 與肝炎病毒指標統計分析發現，HBsAg、HBVDNA、HCV-RNA 反應性與ALT 不合格之間無統計學意義， 但抗-HCV 反應性與ALT 不合格之間具有統計學意義，提示ALT 檢測在HCV 檢測中具有一定意義，其影響因素應做進一步研究，完全取消ALT 檢測從血液安全角度考慮有失偏頗。

對于251 例ALT 升高獻血者追蹤6 個月后發現，26.69%獻血者ALT 仍升高； 其中105 例ALT升高獻血者繼續追蹤12 個月后發現，25.71%獻血者ALT 仍升高，且肝炎相關性指標均為陰性，無1例發展成為病毒性肝炎。 說明251 例ALT 升高人群中約3/4 為非特異性ALT 升高，1/4 為非肝炎特異性升高，均無肝炎相關性，非特異ALT 升高與性別、年齡、獻血季節等相關因素有關[8]。 經追蹤發現，存在非肝炎性ALT 特異性升高人群，該人群無肝炎感染， 但能較為穩定地維持在正常水平以上的ALT 值，這應與飲酒、睡眠、運動等一過性影響因素無相關性。 有研究表明BMI、肥胖所引起的代謝綜合征、 非酒精性脂肪肝病導致的肝細胞損害都是ALT 升高的因素之一[9-10]，該結論需進一步進行非肝炎性ALT 特異性升高人群分布與調查后得以證實。

隨機抽取145 份ALT 不合格次數不同的三組重復獻血者， 發現連續2 次不合格和連續3 次不合格的獻血者ALT 的均值之間無統計學意義，但與一次不合格的獻血者ALT 均值比較具有統計學意義。 連續多次ALT 不合格ALT 水平明顯高于一次不合格ALT 水平，50 U/L~90 U/L 區間的ALT 升高人群多為非特異性ALT 升高， 由非病理性因素引起且與肝炎病毒無關， 但其報廢的血液超過75%， 這與劉如萱發表獻血者80%以上的ALT 不合格不是由于急性病毒性肝炎引起的觀點[11]比較接近，臨床肝炎防治指南[12-13]設定ALT 的2 倍正常值作為參考標準， 因此筆者認為有必要調整血液篩查ALT 檢測上限。

綜上所述， 目前血液肝炎相關性檢測技術已發展較為成熟，且核酸檢測已全覆蓋，應摒棄過去把ALT 檢測作為病毒性肝炎的淘汰依據， 可以增加肝炎特異性檢測項目作為血液篩查的依據，應調整非肝炎性ALT 特異性升高人群的檢測上限，雖然ALT 血液篩查是一項低成本的檢測項目，但其較低的特異性所帶來高報廢率及負面影響不可估量。