去勢和外源雄激素對揚州公鵝肉質性狀的影響

邵春榮 曲小露 戴子淳 朱歡喜陳蓉 施振旦 雷明明

摘要： 本研究選取144只150日齡的新品種揚州鵝公鵝為研究對象，研究去勢對公鵝肉質性狀的影響。結果表明，240日齡去勢鵝胸肌和腿肌肌纖維橫截面積顯著低于對照組，去勢鵝腿肌剪切力顯著低于對照組，而去勢鵝肌內脂肪含量明顯高于對照組。飼喂丙酸睪酮后腿肌肌纖維橫截面積增大，肌內脂肪含量下降?；虮磉_研究結果顯示，在240日齡去勢鵝腿肌組織中 PPARγ 、 RXRG、FASN 和 A-FABP 的表達量上升，顯著高于對照組，而飼喂丙酸睪酮后 PPARγ 、 FASN 和 A-FABP 的表達水平顯著下降。 MYOG 在對照組胸肌和腿肌組織中的表達量顯著高于去勢組。這些研究結果說明，去勢能顯著提高鵝肌間脂肪沉積，降低肌肉橫截面積和肌肉剪切力，提高肉品質。

關鍵詞： 睪丸摘除（去勢）; 揚州公鵝; 肉質性能; 肌間脂肪

中圖分類號： S835?? 文獻標識碼： A?? 文章編號： 1000-4440（2022）03-0748-08

Effects of caponization and exogenous androgen on meat quality of Yangzhou ganders

SHAO Chun-rong， QU Xiao-lu， DAI Zi-chun， ZHU Huan-xi， CHEN Rong， SHI Zhen-dan， LEI Ming-ming

（Key Laboratory of Crop and Animal Integrated Farming， Ministry of Agriculture and Rural Affairs/Institute of Animal Science， Jiangsu Academy of Agricultural Sciences， Nanjing 210014， China）

Abstract： In this study， 144 150-day-old Yangzhou ganders were selected as the research objects to explore the effects of caponization on meat quality of Yangzhou ganders. The results showed that the cross-sectional area of breast and leg muscles in the caponized group was significantly lower than that in the control group at 240 d， and the shear force of leg muscle in the caponized group was significantly lower than that in the control group， while the content of intramuscular fat in the caponized group was significantly higher than that in the control group. After supplementation with testosterone propionate， the intramuscular fat content decreased and the cross-sectional area of leg muscle fibers increased. The results of gene expression showed that the expression levels of ?PPARγ ， ?RXRG ， ?FASN ?and ?A-FABP ?in leg muscle of the caponized geese at 240 d were significantly higher than those of the control group. After supplementation with testosterone propionate， the expression levels of ?PPARγ ， ?FASN ?and ?A-FABP ?decreased significantly. The expression levels of ?MYOD ?in the control group were significantly higher than those in the caponized group. In conclusion， caponization can significantly improve intermuscular fat deposition of goose， reduce muscle cross-sectional area and muscle shear force， and improve meat quality.

Key words： caponization; Yangzhou gander; meat quality performance; intermuscular fat

睪酮是一種類固醇性激素，由雄性的睪丸組織間質細胞分泌，腎上腺亦分泌少量睪酮。有研究結果表明，睪酮可以刺激生殖系統、肌肉、骨骼和結締組織的生長 [1-2] ，促進和維持第二性特征發育 [3-4] 。去勢是一種人為摘除雄性動物腹腔內睪丸的一種方法。去勢后睪酮缺乏或睪酮水平降低，第二性征（雞冠、肉瘤、打架行為和發聲等）退化 ?[5] ，但可以改善肉質風味 [6] 。研究結果表明，去勢增加公雞的活體質量，降低腿肌質量 [5-7] ，在17周和22周時，肉雞大腿肌肉減少，17周時胸肌增加 [8] 。從腹部、皮下和肌內脂肪的角度來看，去勢也會導致整體脂肪積累增加 [9-11] ，肌間脂肪積累增多 [12-14] ，雞肌肉嫩度提高。

公鵝去勢后性情溫順，生長發育快 [15] 。皖西白鵝公鵝去勢后體質量明顯增加，平均每只增質量1 000 ?g以上 [16] 。但是，對去勢公鵝肉質方面的研究相對較少。本研究擬以150日齡新品種揚州鵝公鵝為研究對象，通過手術方法摘除公鵝腹腔雙側睪丸同時飼喂丙酸睪酮，研究去勢和外源雄激素對公鵝肉品質的影響。

1 材料與方法

1.1 動物種群與試驗設計

本試驗選用144只揚州鵝公鵝（150日齡），飼養于安徽天之驕鵝業有限公司（安徽省全椒市）。鵝只平均活質量（4.75± 0.20） kg，地面種群密度為1 m 2 4只。整個試驗分為2個階段，第一階段是從150日齡到210日齡，試驗時長60 d。該階段鵝群分為2組：去勢組和對照組。去勢組（ n = 96 只，分為2欄，每欄48只，每欄分為3個亞群，每個亞群16只）：參考Chen等 [5] 的方法通過手術摘除雙側睪丸。對照組（ n = 48只，分為3個亞群，每個亞群16只）：只在鵝腹部劃一處1 cm 2 的傷口，但不摘除睪丸。180日齡和210日齡時對照組隨機抽取10只鵝屠宰，去勢組每欄隨機抽取5只鵝屠宰。第二階段從210日齡到240日齡，試驗時長30 d。該階段鵝群分為3組：對照組、去勢組和睪酮組。該階段從去勢組中選一欄飼喂丙酸睪酮作為睪酮組，另一欄去勢組及對照組不變，每組選留30只鵝，每個組分為3個亞群，每個亞群10只。在睪酮組中，每只去勢鵝每天飼喂5 mg/kg 的丙酸睪酮[西格瑪奧德里奇（上海）貿易有限公司產品]，丙酸睪酮溶解在芝麻油中并與飼料混合，飼喂30 d 。在240日齡時，每個組隨機抽取10只鵝屠宰。所有鵝都自由采食和自由飲水。

1.2 樣本采集和肉質性狀測定

屠宰后將雙側胸大肌和單側右腿肌剝離稱質量，并在相同位置測定肌肉pH 值、剪切力、肌肉亮度值、肌肉紅度值、肌肉黃度值、蒸煮損失、胸肌總蛋白和脂肪含量，腿肌總蛋白和脂肪含量。在每只鵝左胸肌和左腿肌相同位置取小塊肌肉，經多聚甲醛固定后用于肌肉組織石蠟塊的制備。同時采集胸肌和腿肌組織樣本放進液氮中速凍2 h以上，然后保存在-80 ℃ 超低溫冰箱。

1.3 肌肉組織石蠟切片制作和肌纖維橫截面積測定

用4%多聚甲醛溶液分別固定24只鵝的胸肌和腿肌組織。待組織固定好后，從每個樣品中切取 0.125 cm 3 ?的組織塊，置于體積分數為50%、70%、85%、95%和100%的5種不同濃度的乙醇溶液中逐級脫水，接著置于二甲苯溶液中進行透明處理，最后置于石蠟中進行透蠟處理并制備成石蠟塊。根據試驗需要，將石蠟塊切成5 μm厚的切片，固定于載玻片上，用蘇木精-伊紅染色。將切片置于光學顯微鏡下觀察、拍照，用motic digilab Ⅱ 測量軟件計算胸肌和腿肌的橫截面積。

1.4 RNA分離、引物合成和定量實時PCR

采用動物組織總 RNA 提取試劑盒[天根生化科技（ 北京） 有限公司產品] 提取總 RNA，RNA 純度要求： OD 260 / OD 280 ≥ 1.8并且 ?OD 260 / OD 230 ≥ 1.0。根據GenBank數據庫的基因序列，使用Primer 5.0軟件（www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/Primer-blast/）設計基因特異性引物（表1）。定量實時PCR試驗參考文獻[17] 的方法。不同基因在組織中的相對表達水平用2 -△△ Ct? 法計算。

1.5 統計分析

所有數值均以平均值±標準差表示。使用 SPSS 軟件進行統計分析。采用單因素方差分析法分析各個組間的差異，用最小二乘法進行多重比較。所有圖片使用GraphPad Prism V8.0軟件繪制。

2 結果與分析

2.1 去勢和外源雄激素對公鵝肉品質的影響

由表2可知，180日齡時去勢組胸肌剪切力顯著高于對照組（ P < 0.05），210日齡和240日齡去勢組鵝腿肌的剪切力顯著低于對照組和睪酮組（ P < 0.05）。180日齡去勢組鵝胸肌黃度值顯著高于對照組 （ P < 0.05），胸肌的亮度值和紅度值差異不顯著。240日齡去勢組腿肌的蒸煮損失低于對照組和睪酮組（ P < 0.05）。

2.2 去勢和外源雄激素對公鵝肌間脂肪和總蛋白質含量的影響

從圖1看出，180日齡和210日齡時胸肌和腿肌的肌間脂肪和總蛋白質含量在不同組別之間差異不顯著。240日齡時，去勢組胸肌和腿肌中肌內脂肪含量顯著高于對照組（ P < 0.05）。飼喂睪酮后，胸肌和腿肌的肌間脂肪含量下降，顯著低于去勢組（ P < 0.05），與對照組差異不顯著。240日齡去勢組鵝胸肌總蛋白質含量顯著低于對照組和睪酮組（ P < 0.05），腿肌總蛋白質含量與對照組差異不顯著（ P > 0.05）。

2.3 去勢和外源雄激素對公鵝肌纖維橫截面積的影響

從圖2可以看出，胸肌和腿肌肌纖維石蠟切片質量良好。由圖3可看出，在240日齡時對照組公鵝胸肌肌纖維橫截面積最大，顯著大于去勢組（ P < 0.05）。去勢鵝在飼喂睪酮30 d后，胸肌肌纖維橫截面積顯著低于對照組（ P < 0.05），與去勢組間差異不顯著。在240日齡時對照組鵝腿肌肌纖維橫截面積最大，顯著大于去勢組（ P < 0.05）。去勢鵝在飼喂睪酮30 d后，腿肌肌纖維橫截面積增大，顯著大于去勢組（ P < 0.05），與對照組差異不顯著（ P > 0.05）。

2.4 去勢鵝胸肌和腿肌組織中基因表達變化

從圖4和圖5可以看出，去勢鵝胸肌和腿肌組織中細胞信號抑制因子3（SOCS3）表達水平顯著上調（ P < 0.05），在飼喂睪酮后SOCS3表達水平顯著下調（ P < 0.05）。研究還發現，過氧化物酶體增長因子基因（ PPARγ ）、視黃素X受體基因（ RXRG ）、脂肪酸合成酶基因（ FASN ）和脂肪型脂肪酸結合蛋白基因（ A-FABP ）在去勢鵝腿肌組織中的表達顯著高于對照組（ P < 0.05），飼喂睪酮后，腿肌組織中 PPARγ、FASN 和 A-FABP 的表達水平下降并顯著低于去勢組（ P < 0.05）。 FASN ?和 A-FABP 在去勢鵝胸肌組織中的表達顯著高于對照組（ P < 0.05），飼喂睪酮后，胸肌組織中 FASN 表達水平下降并顯著低于去勢組（ P < 0.05），而 A-FABP 的表達水平與去勢組差異不顯著。肌細胞生成素（ MYOG ）基因表達量在對照組胸肌組織中最高，顯著高于去勢組和睪酮組（ P < 0.05）。而腿肌組織中，對照組 MYOG 基因表達量顯著高于去勢組（ P < 0.05），但與睪酮組差異不顯著（ P > 0.05）。

3 討 論

蒸煮損失、肉色、pH、剪切力是肉質評定的主要指標 [18-19] 。本研究結果表明，去勢對揚州公鵝肌肉蒸煮損失和剪切力影響較大，對肌肉的亮度、紅度和黃度影響較小。去勢鵝肌肉剪切力下降主要與肌纖維橫截面積縮小有關。隨著年齡的增長肌纖維橫截面積不斷增大，剪切力也增大 [20] 。朱礪等 [21] 的研究結果顯示，肌纖維直徑越小，肌肉越嫩。本研究去勢組中公鵝胸肌和腿肌組織中 MYOG 的表達水平低于對照組，這說明去勢組中肌纖維的分化和增殖受到抑制，導致腿肌肌纖維面積低于對照組。這些結果表明，去勢顯著影響肌纖維橫截面積，進而影響肌肉剪切力。

去勢對肉質性狀的影響主要與雄激素有關。雄激素參與蛋白質代謝，可促進蛋白質合成，調控肌肉的生長 [22] 。雄激素濃度高時肌肉生長較快，反之肌肉生長較慢 [23-24] 。本研究中揚州公鵝去勢后，由于睪丸被摘除，雄激素濃度急劇下降，肌肉中 MYOG 表達下調。本研究還發現，240日齡去勢組胸肌的總蛋白質含量顯著低于對照組，飼喂睪酮促進肌肉生長，胸肌的總蛋白質含量增加。Cui 等 [25] 在北京油雞公雞去勢試驗中發現，睪酮通過細胞連接下游信號通路參與脂肪生成相關基因 PPAR 的表達，抑制脂肪沉積。Guo等 [26] 對廣西黃公雞的研究結果表明，睪酮水平降低時促進脂肪生成相關基因（包括 PPARγ、FASN 和 A-FABP ）表達水平上調，促進肌間脂肪沉積。研究結果表明，高濃度睪酮抑制雄性大鼠前脂肪細胞的增殖和分化 [27-28] 。因此，去勢后雄激素低水平或者缺乏可以抑制肌纖維分化，提高肌間脂肪含量，提高肌肉品質。

研究結果表明，睪酮水平降低和瘦素耐受可能是動物去勢后脂肪沉積增多的主要原因 [29-30] 。Baltaci 等 [29] 研究發現，老鼠去勢后隨著睪酮水平降低，血液中瘦素濃度顯著上升，進而導致瘦素耐受，采食和脂肪沉積增多 [30] 。瘦素耐受主要是SOCS3負反饋調控瘦素受體信號的結果 [31] 。Ernst 等 [32] 研究發現，老鼠下丘腦中轉錄激活蛋白信號的不斷升高可以提高SOCS3 的表達水平，而高水平的SOCS3可以抑制瘦素受體信號傳導。本研究發現，揚州公鵝去勢后胸肌和腿肌組織中SOCS3表達水平顯著上調，同時發現 FASN 和 A-FABP 等基因的mRNA表達水平也上調。這個結果和前人研究的結果一致。

本研究用摘除揚州鵝公鵝腹腔雙側睪丸的方法，對去勢公鵝的肉質性狀、肌間脂肪、肌肉總蛋白質含量以及肌纖維橫截面積等指標進行研究，結果表明，去勢能顯著提高公鵝肉質，降低肌肉纖維橫截面積、肌肉剪切力和總蛋白質含量，提高肌間脂肪含量。飼喂睪酮后，腿肌肌肉剪切力增強，肌間脂肪含量降低，肌肉總蛋白質含量增多。

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（責任編輯：陳海霞）

收稿日期：2021-10-19

基金項目：國家自然科學基金項目（31972551）;滁州市科技計劃項目（2020ZN016）;財政部和農業農村部：國家現代農業產業技術體系項目（CARS-42-20）

作者簡介：邵春榮（1964-），男，江蘇無錫人，學士，副研究員，研究方向為動物遺傳育種與繁殖內分泌。（E-mail）njscr@163.com

通訊作者：雷明明，（E-mail）mm0529@163.com