超聲造影聯合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預測價值

吳豪杰 張 偉 劉 瀏 程建中

乳腺癌是源自于乳腺上皮的惡性腫瘤，是婦科內較為多見的惡性腫瘤，好發于40～55歲的女性，且近些年呈上升的趨勢[1]。目前對于乳腺癌的治療方案有多種，新輔助化療是其中一種，具有較好的療效[2]。表皮生長因子受體2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER-2)是一種絡氨酸蛋白，與細胞生長發育密切相關，參與到癌細胞增殖和轉化，研究認為其與乳腺癌的預后存在一定相關性[3]。組織多肽特異性抗原(tissue polypeptide specific antigen，TPS)是一種抗原決定簇，在惡性腫瘤的血液中呈較高濃度的表達[4]。有研究認為，將超聲造影與腫瘤標志物聯合運用于化療效果的預測中價值較高[5]。因此本研究選取我院收治的74例接受新輔助化療的乳腺癌患者臨床資料進行分析，研究超聲造影聯合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預測價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院 2019年2月至2021年3月收治的74例接受新輔助化療的乳腺癌患者作為研究對象。根據新輔助化療治療效果分為敏感組(n=49)和不敏感組(n=25)。敏感組49例，年齡36～70歲，平均年齡(50.35±10.55)歲；不敏感組25例，年齡36～71歲，平均年齡(50.43±10.61)歲。2組患者年齡一般資料差異不具有統計學意義(P>0.05)。納入標準：①患者符合《乳腺癌臨床診斷治療實用手冊》[6]中乳腺癌診斷標準；②患者入院前未接受治療；③患者無影像學檢查禁忌證；④患者接受新輔助化療治療。排除標準：①患者有新輔助化療禁忌證；②患者合并嚴重凝血功能異常；③患者為妊娠期孕婦；④患者合并其他系統惡性腫瘤；⑤患者資料不完整。

1.2 方法

分組方法：參考世界衛生組織所公布的治療標準[7]，將新輔助化療治療后達到未完全緩解和部分緩解的患者列入不敏感組，將達到完全緩解和部分緩解的患者列入敏感組。

患者于我院超聲影像科接受超聲造影檢查，采用飛利浦醫療器械有限公司的Philips EPIQ 5型超聲診斷儀，探頭頻率為12 MHz，造影探頭為9 MH中，其機械指數為0.08，動態范圍為DR51，輸出功率控制為4 W。首先采用造影探頭動態監測患者病灶位置，再注射2.4 mL造影劑，采用造影探頭對病灶和周圍組織造影劑的灌注情況進行動態性觀察，將圖像保存后采用軟件對病灶始增時間、峰值時間、峰值強度進行分析。

HER-2檢測:收集術中所獲得的乳腺癌腫瘤組織，采用上海晶抗工程有限公司的HER-2檢測試劑盒，往預先包被HER-2捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、辣根過氧化物酶標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HER-2呈正相關。采用美國賽默飛公司的酶標儀在450 nm 波長下測定吸光度(OD 值)，計算樣品濃度。

TPS檢測：收集空腹靜脈血3 mL，以半徑為80 mm離心分離血清，并置于-20℃內保存，采用上海臻科生物科技有限公司的TPS ELISA試劑盒并使用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗進行檢測。從室溫平衡20 min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50 μL；樣本孔中加入待測樣本50 μL；空白孔不加，除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100 μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60 min，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液(350 μL)，靜置1 min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)，每孔加入底物A、B各50 μL，37℃避光孵育15 min，每孔加入終止液50 μL，15 min內，在450 nm波長處測定各孔的OD值。

1.3 觀察指標

2組患者均接受超聲造影檢查，同時對比2組患者HER-2、組織多肽特異性抗原(TPS)水平，繪制ROC曲線分析超聲造影聯合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預測價值。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 2組患者超聲影像結果對比

2組患者峰值強度差異不具有統計學意義(P>0.05)；與敏感組相比，不敏感組患者病灶始增時間和峰值時間顯著更長，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者超聲影像結果對比

2.2 2組患者血清HER-2和TPS水平對比

與敏感組相比，不敏感組患者血清HER-2和TPS水平顯著更高，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者HER-2和TPS水平對比

2.3 超聲造影聯合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預測價值分析

應用受試者工作特征曲線評估乳腺癌新輔助化療敏感性得出：超聲造影預測乳腺癌新輔助化療敏感性靈敏度89.8%和特異度為64.0%；HER-2預測乳腺癌新輔助化療敏感性靈敏度為80.0%和特異度為91.8%；TPS預測乳腺癌新輔助化療敏感性靈敏度91.9%和特異度為80.0%，三者聯合預測乳腺癌新輔助化療敏感性靈敏度為93.8%，特異度為92.0%，經分析得出，三者聯合的預測靈敏度和特異度均高于各項單獨檢測(P<0.05)。見表3、圖1。

表3 超聲造影聯合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預測價值分析

3 討論

乳腺癌是婦科較為常見的惡性腫瘤，其發病率在世界各地仍有上升的趨勢，每年新增病例約5萬人，好發于中老年女性。但隨著醫學的進步，對于乳腺癌的治療也更加多樣[8]。新輔助化療是在局部治療方法前的全身化療，效果較好，但目前尚無準確的指標評價其治療敏感性[9-10]。本次研究將以往研究指標進行聯合檢測，以為臨床的治療效果的預測提供參考。

超聲造影是一種影像學檢查方式，廣泛運用于乳腺癌的篩選和診斷當中。腫瘤的回聲受到多種因素的影響，包括腫瘤位置、周圍的應變性和組織特異性的影響，組織在超聲圖像上的回聲是源自于組織結構的散射[11]。多數患者接受治療前，腫瘤多含有大量炎性細胞和腫瘤細胞等，其聲波傳遞性能顯著高于正常組織，當治療后，腫瘤內部的結構、彈性和密度均出現不同程度的變化[12]。本研究表示，與敏感組相比，不敏感組患者病灶始增時間和峰值時間顯著更長。這說明，治療不敏感患者超聲造影未出現明顯的變化。HER-2是表皮生長因子的一種，研究認為其是和乳腺癌的發生發展有關的基因，可通過各種方式加入跨膜信號的傳導，進而對細胞分化和增殖造成影響[13]。有研究認為，HER-2對于乳腺癌新輔助化療敏感性的預測價值較高[14]。本研究顯示，與敏感組相比，不敏感組患者血清HER-2水平顯著更高。TPS是人體細胞角蛋白18片段的抗原決定簇，在惡性腫瘤以及轉移腫瘤血清內會呈較高濃度的表達[15]。腫瘤細胞增殖峰期時，TPS會劇烈升高并進入患者的血液循環內，因此TPS是可以作為反應患者惡性腫瘤增殖程度的指標[16-17]。由于乳腺癌病變多數由上皮結構為特點的終末導管小葉單元，因此TPS在乳腺癌患者中存在較高的表達。本研究顯示，與敏感組相比，不敏感組患者血清TPS水平顯著更高。說明，通過新輔助化療治療敏感性較低的患者TPS未出現改善。因為TPS常在多種上皮細胞腫瘤中表達，器官組織性不高，因此特異度較低，需要與其他標志物聯合檢測[18]。本研究顯示，三者聯合的預測靈敏度和特異度均高于各項單獨檢測，說明，超聲造影聯合HER-2、TPS水平的檢測能夠彌補各項單獨檢測的不足，提高預測價值。本次研究首次將超聲造影與HER-2、TPS進行聯合檢測并發現其對乳腺癌患者新輔助化療的敏感性預測價值較高。但本次研究病例收集較少，實驗結果可能存在一定偏差。

圖1 超聲造影聯合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預測價值ROC分析圖

綜上所述，超聲造影聯合HER-2、TPS對乳腺癌新輔助化療敏感性的預測價值較高，可有效提高預測靈敏度和特異度。