建立生血養巢膏的成型工藝及質量內控評價方法

葉曉玲 羅 瑜 賴吉儉

廣東省韶關市中醫院藥學部，廣東韶關 512023

中醫作為我國的特有醫學， 具有數千年的歷史，至今仍廣為流傳[1]。 中醫無論是在民間還是臨床醫學中都具有較高的接受程度。中藥的藥劑根據需求不同可以分為湯、丸、散、丹、膏等多種劑型，每種劑型均需要較高的工藝進行制備，以確保藥物在制劑過程中藥效最大化，并使患者更為接受[2]。中藥膏劑是其中的重要組成部分，它以中醫藥理論為指導，辨證論治為基礎，由中醫師根據患者的不同體質、不同病癥特點處方用藥，藥師規范熬制，供祛病或保健服用的一種劑型，稱為煎膏劑，又稱為膏滋[3]。時至今日，隨著社會的快速發展、經濟條件的改善以及大眾對養生保健的重視，膏方的祛病保健作用被證實，膏方成為人們調理慢性病、亞健康的首選。 生血養巢膏是韶關市中醫院的主要協定膏方，具有養肝腎、補氣血、調沖任、抗衰老的功效，適用于肝腎不足、氣血虧虛型月經不調、卵巢功能減退、貧血、亞健康調理等。 膏劑的制備方法對于其療效、性狀等具有重要的意義[4]。 質量內控評價方法通過加強內部質量控制來改善產品質量及效率， 本研究探討質量內控評價方法對改善生血養巢膏生產工藝、提高中藥膏方的合理性、穩定性及有效性的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

在韶關市中醫院2021年3月至10月制備的生血養巢膏成品中隨機抽選34 例樣本作為實驗組，2020年3月至10月制備的生血養巢膏成品中隨機抽選34 例樣本作為參照組。 實驗組采用質量內控評價方法制備生血養巢膏，參照組采用傳統膏方制備工藝方法制備。 將膏體流動性、外觀形狀以及硬度和口感納入考察指標。

1.2 方法

生血養巢膏的主要成分包括女貞子50 g、墨旱蓮50 g、狗脊50 g、太子參50 g、桑葚70 g、白芍70 g、制首烏70 g、麩炒白術35 g、雞血藤70 g、牛大力85 g、焦山楂20 g、陳皮18 g、龜甲膠10 g、麥芽糖30 g。

參照組采用傳統膏方制備工藝， 主要步驟如下。①浸泡：將飲片放入容器中加入適量冷水，以水面高出藥物15 cm 為宜，浸泡過夜。②煎煮：將浸泡過后的飲片放入帶蓋容器中以沸騰后文火煎煮2 h， 隨后提取藥汁，備用。 藥渣再放入適量水再煎煮1 h，將藥渣壓汁，將兩次的藥液合并至一起，放置在適宜容器中沉淀過夜，隨后取上層清液進行濃縮。③濃縮：取上清液過200 目藥篩后放入鍋內，武火濃縮，去上層泡沫，濃縮至清膏狀時，應用文火煎煮濃縮，使用專業器具攪拌藥液，避免其發生焦化，讓其形成稠膏狀。 ④收膏：在藥液中加入膠類、黃酒及糖類，充分攪拌使溶化均勻，經100 目藥篩過濾，放入容器中繼續加熱攪拌直至掛旗并滴水成珠的狀態， 不斷攪拌收膏成煎膏劑。⑤涼膏：將煎膏劑導入已消毒好的專用容器，分裝時需要注意動作快速，避免凝結。

實驗組在參照組的基礎上加用質量內控評價方法， 主要內容為取靜置沉淀后的上層煎液置潔凈的不銹鋼鍋內加熱濃縮，武火煮至沸騰，濃縮至一定程度，為防止藥液稠厚易粘鍋糊化，同時減少濃縮形成的雜質，趁熱將其過200 目篩。 繼續文火濃縮，當濃縮液滴于桑皮紙上，液滴周圍無滲出水跡時，即得清膏。 采用2020年版《中華人民共和國藥典》[5]四部通則0601 相對密度測定法測定濃縮液至清膏的時間點下的相對密度， 并測定不同收膏時間點下的樣品含水量，結合傳統經驗技術，優選出清膏狀態下的最佳相對密度和含水量。 根據處方治療的需要，為了增強滋補調理， 生血養巢膏選擇龜甲膠作為制劑的賦形劑。 龜甲膠打成粗粉后，用適量黃酒浸泡過夜至軟化，并隔水燉至完全融化，于濃縮液至清膏狀態時加入，攪拌均勻，用文火煎熬并不斷攪拌，直至稠膏規定的相對密度，即得。

1.3 觀察指標及評價標準

1.3.1 流動性的評價 選取不同收膏時間點（1、3、5、7、9、12、15 min），并記錄膏體的流動性特征。 用木片挑起膏劑，觀察時間為1 min：呈細線狀流下，計1 分；呈斷線狀流下，計3 分；呈斷珠狀流下，計5 分；呈珠狀流下，計7 分；呈片狀掉下（掛旗），計10 分；呈塊、片線狀掉下，計5 分；呈塊狀掉下，計5 分；呈線狀掉下，計3 分；很難流下，計1 分[6]。

1.3.2 外觀性狀的評價 根據2020年版《中華人民共和國藥典》[5]四部通則0183 煎膏劑（膏滋）的規定，膏體外觀應均勻、細膩，膏體黏稠度應適當，且表面無浮沫，無返砂現象等。選取不同收膏時間點（1、3、5、7、9、12、15 min），結合傳統收膏經驗，記錄膏體的外觀性狀。 隨著收膏時間的增加，傳統經驗狀態下的膏體粘力度外觀性狀計滿分10 分， 其他狀態下的外觀性狀分值依次下降[6]。

1.3.3 硬度、 口感的評價 選取不同收膏時間點（1、3、5、7、9、12、15 min）的膏體，待放涼后，記錄膏體硬度、口感狀態：硬度適中、口感潤滑、無焦屑，計滿分10分，其他狀態下的外觀性狀分值依次下降[6]。

1.3.4 考察結果 結合傳統經驗收膏，將輔料龜甲膠投入清膏中，不斷攪拌，小火收膏；10 min 后，每分鐘去10 g 樣品，進行相對密度和含水量測定；取樣至用木片挑起，呈塊狀掉下為止。依據綜合評分，優選不同收膏時間下的最佳相對密度和含水量值，掛旗和滴水成珠是判斷可否收膏的傳統標準，前者指膏液流下時呈旗面樣，后者指膏液下滴時成珠狀。 在傳統經驗工藝的基礎上，確定“掛旗”狀態下的相對密度和綜合評分，使傳統收膏工藝經驗進行標準量化。

1.3.5 評價方法 采用盲法對藥膏的各個指標進行評價。 將制得的藥膏進行編號，并記錄實驗組和參照組內的編號。由院內三位具有多年制膏經驗的資深專家獨立對膏體進行流動性、外觀性狀、硬度及口感的評價，并根據上述標準進行打分。 由記錄員記錄每個編號膏體的得分情況。 專家打分結束后，由研究人員回收、統一整理和分析數據。

1.4 統計學方法

采用SPSS 25.0 統計學軟件進行數據分析， 計量資料用均數±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t 檢驗；計數資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 流動性及外觀性狀評價

用木片挑起后， 實驗組膏劑呈珠狀或片狀流下，參照組呈塊狀、珠狀等形態流下，肉眼觀實驗組膏劑的流動性較好。 專家打分結果顯示，實驗組的流動性得分高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）（表1）。

外觀性狀包括眼觀、鼻聞等做出評價。 實驗組膏劑黏稠度適當，呈片狀流下，膏體細膩、均勻，表面無浮沫，出現返糖、返砂現象的膏體較少，外觀性狀優良。 參照組膏劑均勻度比實驗組差，部分膏劑聞之具有輕微的焦臭味。實驗組膏劑的外觀性狀得分高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）（表1）。

表1 兩組流動性、外觀性狀得分的比較（分，±s）

表1 兩組流動性、外觀性狀得分的比較（分，±s）

組別 流動性 外觀性狀實驗組（n=34）參照組（n=34）t 值P 值8.33±1.57 6.91±1.45 3.874＜0.001 7.95±1.48 6.78±1.32 3.440 0.001

2.2 硬度、口感評價

膏體放涼后口嘗，評價其硬度和口感。 實驗組膏體軟硬適中，口感滑潤，無異物顆粒感；參照組膏體入口稍感焦屑，質地較實驗組硬，滑潤感較實驗組差。實驗組的硬度及口感得分均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）（表2）。

表2 兩組硬度及口感得分的比較（分，±s）

表2 兩組硬度及口感得分的比較（分，±s）

組別 硬度 口感實驗組（n=34）參照組（n=34）t 值P 值7.84±1.77 6.51±1.42 3.418 0.001 8.02±1.61 6.65±1.50 3.630 0.001

3 討論

生血養巢膏具有抗衰老、養肝腎、補氣血及調沖任的功效。 是韶關市中醫院主要應用的協定膏方之一。 目前該膏方的成型工藝傳承了傳統的浸泡、煎煮、濃縮、收膏、涼膏五道工序。 為有效保障膏方的合理性、安全性及療效，從生產條件和生產技術的實際狀況出發， 本研究以常用膏方生血養巢膏為代表，注重膏方生產流程（煎煮提取工藝、濃縮工藝、收膏工藝）控制和質量管理，建立并規范各操作環節及制備工藝的標準；以《中國藥典》2020年版四部通則0183煎膏劑（膏滋）項下的規定為依據[5]，建立符合實際生產條件的質量評價方法，為最終合格膏方成品提供技術參數[7-8]。這對于提高膏方的質量及其臨床療效的穩定有一定的積極意義， 進一步提升膏方的應用質量，推動其臨床應用及藥學事業的發展。

本研究結果顯示，實驗組的流動性、外觀形狀、硬度及口感評分均高于參照組，差異有統計學意義（P＜0.05）， 提示應用質量內控評價方法可以有效改善生血養巢膏的流動性、外觀形狀、硬度及口感。影響膏方上述問題的主要原因為焦化、返砂、霉變及磣牙。①焦化：導致出現焦化的主要原因為藥材浸泡不充分，水分吸收不足，煎煮時水分不夠。但是，當前多數臨床中均應用煎藥機進行煎煮， 可以有效減少水分的蒸發，并利于藥液的析出，并能夠一定程度上減少煎煮的時間，提高治療及效率。除此之外，濃縮及收膏兩道工序的不良操作也會導致焦化，在濃縮時火候一定要得到有效控制，一旦火候過大，導致水分快速蒸發極易加劇焦化。 尤其是應用200 目篩網去渣后，一定要加強攪拌，避免出現沉底、焦化等不良情況。 ②返砂：返砂的主要原因為糖分結晶， 主要出現膏滋放置時間過長，導致糖分從藥液中析出，因此，在制備膏方時一定要合理控制糖分的含量，并提前煉制糖分，減少返砂。③霉變：膏方霉變的主要原因為膏方中水含量較高，易滋生微生物繁殖。因此在收膏時一定要注意水分含量，并加強對于設備以及容器的殺菌工作，并將膏方密封放置在陰涼處。④磣牙：磣牙發生的可能性較低，一般原因是藥材的可溶性較差，即使研磨成吸粉也會因為無法溶解造成磣牙。因此，在膏方中加入輔料時，應該保證輔料潔凈，要求細粉均勻，避免其中包含的粗纖維導致磣牙。 本研究中，質量內控評價方法對于容器的質地、火候、濃度程度等均有較高的要求，并且在制備過程中優先選取清膏，并為改善療效還添加了龜甲膠，為減少磣牙采用了先浸泡軟化，后隔水燉化等方式，充分保證了膏方的相對密度。

本研究也存在一定的局限性，主要體現在對膏體質量的評價上。本研究對膏體的流動性、外觀性狀、硬度等指標均采取經驗主觀的標準進行評價判斷，其結果可能由于個人經驗的不同產生較大的差距。 因此，本研究特邀請院內多位經驗豐富的資深制膏專家進行評判，以使研究結果具有更好的可靠性。目前，已有研究采用定性、 定量的方法對膏方的質量進行評價，如高效液相色譜法 （high performance liquid chromatography，HPLC）[9-10]、紫外分光光度法[11]。 中藥指紋圖譜法是國際上公認的對中藥制劑質量控制的重要評價方法，能較好地反映中藥制劑內各種藥用成分的含量，對客觀評價膏方質量具有重要的應用價值。 采用HPLC 法構建中藥制劑的指紋圖譜已有大量的研究[12-15]，HPLC 法的應用也較為成熟。 因此，除對膏方的主觀性狀進行評價外，后續研究還可采用建立指紋圖譜的方法， 增加對中藥膏方的客觀性質量評價，以比較質量內控評價方法對改善膏劑質量的作用，進一步提高研究的適用性和可推廣性。

綜上所述，質量內控評價方法可以有效改善生血養巢膏的生產工藝， 明顯提高生血養巢膏的流動性、外觀性狀、硬度及口感評分，可推廣使用質量內控評價方法熬制其他中藥膏劑。