子癇前期患者血清HLA-G、TGF-β1、sFlt-1水平變化及預(yù)測價(jià)值分析

張 凡，郭 睿，辛德梅，鄧春霞

子癇前期是常見產(chǎn)科并發(fā)癥，據(jù)報(bào)道子癇在全部妊娠婦女中的發(fā)生率為7%左右，嚴(yán)重威脅母嬰健康[1-2]。研究報(bào)道，人類白細(xì)胞抗原-G(HLA-G)在母胎局部免疫調(diào)控機(jī)制中起著極為重要的作用，可能與子癇前期的發(fā)病有關(guān)[3]。轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)在胎盤絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞及蛻膜細(xì)胞中大量表達(dá)，顏露春等[4]指出其參與了子癇前期的發(fā)病過程。可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體-1(sFlt-1)能通過過度激活內(nèi)皮細(xì)胞途徑或調(diào)節(jié)全身炎癥反應(yīng)，在子宮胎盤血管重鑄中發(fā)揮重要作用[5]。盡管HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平與子癇前期間關(guān)系的研究較多，但是缺乏各指標(biāo)在子癇前期發(fā)展過程中的聯(lián)合預(yù)測價(jià)值研究。本研究旨在探討子癇前期患者血清HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平變化，并分析三項(xiàng)指標(biāo)在子癇前期患者病情評(píng)估中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2016年4月—2020年4月在本院治療的子癇前期孕婦臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合子癇前期診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；單胎孕婦；孕檢規(guī)律且資料完整；年齡18～45歲，初產(chǎn)婦或經(jīng)產(chǎn)婦；妊娠期孕婦及胎兒B超檢查正常(無胎盤形態(tài)、位置異常)。排除標(biāo)準(zhǔn)：有人工流產(chǎn)史、胎盤粘連史；有原發(fā)性高血壓病史、糖尿病史；合并嚴(yán)重感染、自身免疫性疾病、惡性腫瘤者。根據(jù)納入及排除標(biāo)準(zhǔn)最終納入109例子癇前期孕婦(輕度63例、重度46例)作為觀察組。另選取本院同期正常妊娠孕婦86例作為對(duì)照組。2組孕婦一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 抽取2組空腹肘靜脈血2.5 ml置于真空采血管中室溫靜置半小時(shí)待血液完全凝集后，3500 r/min離心5 min(離心半徑10 cm)分離血清，后置于Eppendorf管內(nèi)密封保存于-70 ℃冰箱中待測。采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測sFlt-1水平，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測HLA-G、TGF-β1水平。相關(guān)試劑盒均購于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3觀察指標(biāo) 比較2組孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平；比較不同程度子癇前期孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平；采用多因素Logistic回歸分析探討孕婦子癇前期發(fā)生的影響因素；采用受試者工作特征(ROC)曲線分析HLA-G、TGF-β1及sFlt-1檢測對(duì)孕婦子癇前期發(fā)生的診斷價(jià)值。子癇診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]：①輕度：妊娠20周后出現(xiàn)收縮壓≥140 mmHg和(或)舒張壓≥90 mmHg伴尿蛋白≥0.39 g/24 h。②重度：妊娠20周后血壓持續(xù)升高，收縮壓≥160 mmHg和(或)舒張壓≥110 mmHg；尿蛋白≥2.0 g/24 h或隨機(jī)尿蛋白≥++。HLA-G正常參考值：30.3～47.1 ng/ml[8]；TGF-β1正常參考值：60.1～73.8 pg/ml[9]；sFlt-1正常參考值：2458.6～3414.8 pg/ml[10]。

2 結(jié)果

2.12組孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平比較 觀察組HLA-G低于對(duì)照組，TGF-β1、sFlt-1高于對(duì)照組(P<0.01)，見表1。

表1 2組孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平比較

2.2不同程度子癇前期孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平比較 重度子癇孕婦HLA-G低于輕度子癇孕婦，TGF-β1、sFlt-1高于輕度子癇孕婦(P<0.01)，見表2。

表2 不同程度子癇前期孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平比較

2.3孕婦子癇前期發(fā)生的影響因素分析 多因素Logistic回歸分析顯示，妊娠期高血壓病、妊娠期糖尿病、HLA-G降低、TGF-β1升高、sFlt-1升高為孕婦子癇前期發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見表3。

表3 影響孕婦子癇前期發(fā)生的多因素Logistic回歸分析

2.4HLA-G、TGF-β1及sFlt-1聯(lián)合檢測預(yù)測孕婦子癇前期發(fā)生的價(jià)值分析 HLA-G、TGF-β1及sFlt-1聯(lián)合檢測預(yù)測孕婦子癇前期發(fā)生的敏感度、特異度、曲線下面積(AUC)均高于單一指標(biāo)檢測，見表4。

表4 HLA-G、TGF-β1及sFlt-1聯(lián)合檢測對(duì)孕婦子癇前期發(fā)生的預(yù)測價(jià)值分析

3 討論

子癇前期是一種起源于胎盤、累及全身多臟器的妊娠期特發(fā)性疾病，其病理生理基礎(chǔ)發(fā)生在妊娠早期，而起病在妊娠中晚期[11]。子癇前期患者會(huì)發(fā)生臟器功能受損衰竭、胎兒畸形、胎死宮內(nèi)等嚴(yán)重不良事件[12-13]。

既往研究指出，子宮胎盤灌注低下會(huì)引起子癇前期發(fā)生，其發(fā)生可能與母體對(duì)半異體基因胎兒異常的免疫應(yīng)答有關(guān)[14]。本文觀察組HLA-G低于對(duì)照組，TGF-β1、sFlt-1高于對(duì)照組，與李倩等[15]研究結(jié)果基本相符。可見在子癇前期發(fā)生過程中，HLA-G、TGF-β1及sFlt-1發(fā)揮了重要作用。HLA-G是免疫耐受體系中重要的蛋白，其可減少胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞在免疫應(yīng)答中的損傷，對(duì)維持孕婦正常妊娠發(fā)揮重要作用[16]。TGF-β1在血管內(nèi)皮細(xì)胞及間質(zhì)中少量表達(dá)，其大量表達(dá)于胎盤絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞中，參與細(xì)胞增殖、分化、遷移及胚胎發(fā)育過程[17]。sFlt-1是一種抗血管生成因子，sFlt-1水平升高會(huì)導(dǎo)致血管炎癥及病理變化，孕婦出現(xiàn)血管內(nèi)皮損傷，血管活性物質(zhì)得到釋放，從而引起子癇前期[18]。

WESTIN等[19]報(bào)道，HLA-G在調(diào)節(jié)母胎免疫耐受方面具有關(guān)鍵性作用，其在孕婦血清中表達(dá)水平異常降低后，會(huì)導(dǎo)致母體子宮內(nèi)免疫細(xì)胞妊娠免疫耐受，促使母體子宮對(duì)胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行妊娠免疫攻擊，引起胎盤供血不足，一方面會(huì)影響胎兒正常的生長發(fā)育，另一方面可加重炎癥反應(yīng)，造成動(dòng)脈收縮、痙攣，使孕婦動(dòng)脈血壓急劇升高，加重子癇病情進(jìn)展。已有研究證實(shí)，抑制TGF-β1、sFlt-1水平可阻止滋養(yǎng)層細(xì)胞過度浸潤，調(diào)節(jié)子宮胎盤間的血液循環(huán)，保障胎兒正常生長發(fā)育。本研究結(jié)果顯示：重度子癇孕婦HLA-G低于輕度子癇孕婦，TGF-β1、sFlt-1高于輕度子癇孕婦，可以看出HLA-G、TGF-β1及sFlt-1在子癇前期孕婦血清中表達(dá)異常會(huì)加劇病情進(jìn)展，進(jìn)一步證實(shí)了上述觀點(diǎn)。

本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，妊娠期高血壓病、妊娠期糖尿病、HLA-G降低、TGF-β1升高、sFlt-1升高為孕婦子癇前期發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。分析原因?yàn)椋衅诤喜⒏哐獕翰　⑻悄虿〉燃膊〉脑袐D發(fā)生子癇的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)明顯提高，可能與內(nèi)科基礎(chǔ)疾病會(huì)引發(fā)全身血管內(nèi)皮損傷致全身小動(dòng)脈痙攣有關(guān)。HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平異常，會(huì)引起內(nèi)皮細(xì)胞介導(dǎo)的血管舒張功能受損，加強(qiáng)白細(xì)胞黏附能力，導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)，從而誘發(fā)子癇前期。通過繪制ROC曲線進(jìn)一步得出，HLA-G、TGF-β1及sFlt-1聯(lián)合檢測預(yù)測孕婦子癇前期發(fā)生的敏感度、特異度、AUC均高于單一指標(biāo)檢測。故認(rèn)為，HLA-G、TGF-β1及sFlt-1聯(lián)合檢測對(duì)評(píng)估孕婦子癇前期發(fā)生具有實(shí)用價(jià)值。

綜上，臨床可對(duì)孕婦加強(qiáng)HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平監(jiān)測，三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測對(duì)孕期子癇前期發(fā)生有較大的預(yù)測價(jià)值。