子癇前期患者血清HLA-G、TGF-β1、sFlt-1水平變化及預測價值分析

張 凡，郭 睿，辛德梅，鄧春霞

子癇前期是常見產科并發癥，據報道子癇在全部妊娠婦女中的發生率為7%左右，嚴重威脅母嬰健康[1-2]。研究報道，人類白細胞抗原-G(HLA-G)在母胎局部免疫調控機制中起著極為重要的作用，可能與子癇前期的發病有關[3]。轉化生長因子-β1(TGF-β1)在胎盤絨毛滋養層細胞及蛻膜細胞中大量表達，顏露春等[4]指出其參與了子癇前期的發病過程。可溶性血管內皮生長因子受體-1(sFlt-1)能通過過度激活內皮細胞途徑或調節全身炎癥反應，在子宮胎盤血管重鑄中發揮重要作用[5]。盡管HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平與子癇前期間關系的研究較多，但是缺乏各指標在子癇前期發展過程中的聯合預測價值研究。本研究旨在探討子癇前期患者血清HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平變化，并分析三項指標在子癇前期患者病情評估中的價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2016年4月—2020年4月在本院治療的子癇前期孕婦臨床資料。納入標準：符合子癇前期診斷標準[6]；單胎孕婦；孕檢規律且資料完整；年齡18～45歲，初產婦或經產婦；妊娠期孕婦及胎兒B超檢查正常(無胎盤形態、位置異常)。排除標準：有人工流產史、胎盤粘連史；有原發性高血壓病史、糖尿病史；合并嚴重感染、自身免疫性疾病、惡性腫瘤者。根據納入及排除標準最終納入109例子癇前期孕婦(輕度63例、重度46例)作為觀察組。另選取本院同期正常妊娠孕婦86例作為對照組。2組孕婦一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 抽取2組空腹肘靜脈血2.5 ml置于真空采血管中室溫靜置半小時待血液完全凝集后，3500 r/min離心5 min(離心半徑10 cm)分離血清，后置于Eppendorf管內密封保存于-70 ℃冰箱中待測。采用電化學發光免疫分析法檢測sFlt-1水平，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗檢測HLA-G、TGF-β1水平。相關試劑盒均購于北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.3觀察指標 比較2組孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平；比較不同程度子癇前期孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平；采用多因素Logistic回歸分析探討孕婦子癇前期發生的影響因素；采用受試者工作特征(ROC)曲線分析HLA-G、TGF-β1及sFlt-1檢測對孕婦子癇前期發生的診斷價值。子癇診斷標準[7]：①輕度：妊娠20周后出現收縮壓≥140 mmHg和(或)舒張壓≥90 mmHg伴尿蛋白≥0.39 g/24 h。②重度：妊娠20周后血壓持續升高，收縮壓≥160 mmHg和(或)舒張壓≥110 mmHg；尿蛋白≥2.0 g/24 h或隨機尿蛋白≥++。HLA-G正常參考值：30.3～47.1 ng/ml[8]；TGF-β1正常參考值：60.1～73.8 pg/ml[9]；sFlt-1正常參考值：2458.6～3414.8 pg/ml[10]。

2 結果

2.12組孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平比較 觀察組HLA-G低于對照組，TGF-β1、sFlt-1高于對照組(P<0.01)，見表1。

表1 2組孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平比較

2.2不同程度子癇前期孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平比較 重度子癇孕婦HLA-G低于輕度子癇孕婦，TGF-β1、sFlt-1高于輕度子癇孕婦(P<0.01)，見表2。

表2 不同程度子癇前期孕婦HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平比較

2.3孕婦子癇前期發生的影響因素分析 多因素Logistic回歸分析顯示，妊娠期高血壓病、妊娠期糖尿病、HLA-G降低、TGF-β1升高、sFlt-1升高為孕婦子癇前期發生的獨立危險因素(P<0.05)，見表3。

表3 影響孕婦子癇前期發生的多因素Logistic回歸分析

2.4HLA-G、TGF-β1及sFlt-1聯合檢測預測孕婦子癇前期發生的價值分析 HLA-G、TGF-β1及sFlt-1聯合檢測預測孕婦子癇前期發生的敏感度、特異度、曲線下面積(AUC)均高于單一指標檢測，見表4。

表4 HLA-G、TGF-β1及sFlt-1聯合檢測對孕婦子癇前期發生的預測價值分析

3 討論

子癇前期是一種起源于胎盤、累及全身多臟器的妊娠期特發性疾病，其病理生理基礎發生在妊娠早期，而起病在妊娠中晚期[11]。子癇前期患者會發生臟器功能受損衰竭、胎兒畸形、胎死宮內等嚴重不良事件[12-13]。

既往研究指出，子宮胎盤灌注低下會引起子癇前期發生，其發生可能與母體對半異體基因胎兒異常的免疫應答有關[14]。本文觀察組HLA-G低于對照組，TGF-β1、sFlt-1高于對照組，與李倩等[15]研究結果基本相符。可見在子癇前期發生過程中，HLA-G、TGF-β1及sFlt-1發揮了重要作用。HLA-G是免疫耐受體系中重要的蛋白，其可減少胎盤滋養層細胞在免疫應答中的損傷，對維持孕婦正常妊娠發揮重要作用[16]。TGF-β1在血管內皮細胞及間質中少量表達，其大量表達于胎盤絨毛滋養層細胞中，參與細胞增殖、分化、遷移及胚胎發育過程[17]。sFlt-1是一種抗血管生成因子，sFlt-1水平升高會導致血管炎癥及病理變化，孕婦出現血管內皮損傷，血管活性物質得到釋放，從而引起子癇前期[18]。

WESTIN等[19]報道，HLA-G在調節母胎免疫耐受方面具有關鍵性作用，其在孕婦血清中表達水平異常降低后，會導致母體子宮內免疫細胞妊娠免疫耐受，促使母體子宮對胎盤滋養層細胞進行妊娠免疫攻擊，引起胎盤供血不足，一方面會影響胎兒正常的生長發育，另一方面可加重炎癥反應，造成動脈收縮、痙攣，使孕婦動脈血壓急劇升高，加重子癇病情進展。已有研究證實，抑制TGF-β1、sFlt-1水平可阻止滋養層細胞過度浸潤，調節子宮胎盤間的血液循環，保障胎兒正常生長發育。本研究結果顯示：重度子癇孕婦HLA-G低于輕度子癇孕婦，TGF-β1、sFlt-1高于輕度子癇孕婦，可以看出HLA-G、TGF-β1及sFlt-1在子癇前期孕婦血清中表達異常會加劇病情進展，進一步證實了上述觀點。

本研究結果還發現，妊娠期高血壓病、妊娠期糖尿病、HLA-G降低、TGF-β1升高、sFlt-1升高為孕婦子癇前期發生的獨立危險因素。分析原因為，孕期合并高血壓病、糖尿病等疾病的孕婦發生子癇的風險會明顯提高，可能與內科基礎疾病會引發全身血管內皮損傷致全身小動脈痙攣有關。HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平異常，會引起內皮細胞介導的血管舒張功能受損，加強白細胞黏附能力，導致全身炎癥反應，從而誘發子癇前期。通過繪制ROC曲線進一步得出，HLA-G、TGF-β1及sFlt-1聯合檢測預測孕婦子癇前期發生的敏感度、特異度、AUC均高于單一指標檢測。故認為，HLA-G、TGF-β1及sFlt-1聯合檢測對評估孕婦子癇前期發生具有實用價值。

綜上，臨床可對孕婦加強HLA-G、TGF-β1及sFlt-1水平監測，三項指標聯合檢測對孕期子癇前期發生有較大的預測價值。