未治療的系統性紅斑狼瘡患者臨床特征與免疫狀態及淋巴細胞亞群特點分析

張昊 李寧寧 戴冰冰

系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是自身免疫系統代表性疾病,是一種好發于青年女性的多種免疫機制參與的慢性全身性自身免疫性血管炎,其發病機制不明,目前公認的機制主要為免疫功能以及數量異常［1,2］。臨床上評估患者免疫狀態主要應用淋巴細胞亞群分析,T 細胞表面標記物的檢測用于T 細胞計數、T 細胞亞群分類和T 細胞活化程度的測定,是反映機體細胞免疫功能的重要指標。當不同淋巴細胞亞群的數量和功能異常時,機體可導致免疫功能紊亂。流式細胞術是檢測分化抗原(CD 抗原)最快速、準確、可靠的方法。通過檢測腫瘤患者T 淋巴細胞亞群的異常變化,了解機體免疫動力學,對判斷患者的病情尤為重要。SLE 作為自身免疫系統疾病的代表疾病,針對其基礎自身免疫狀態的研究尤為重要,對于評估病情、診斷疾病以及用藥指導均存在意義,本研究通過檢測未經激素和免疫抑制劑治療的SLE 患者的免疫學指標和外周血淋巴細胞亞群,探討此類患者的免疫狀態。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年 1 月～2020 年11 月于大連醫科大學附屬大連市中心醫院風濕免疫科就診的未經激素和免疫抑制劑治療的SLE 患者58 例作為SLE患者組,另選取同期本院健康體檢人群52 例作為健康對照組。SLE 患者組納入標準：①患者符合美國風濕病學會(ACR) 1997 年修訂的 SLE 分類診斷標準；②患者均行SLE 疾病活動評分(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)［3,4］；③近半年無中藥、非甾體抗炎藥、糖皮質激素、生物制劑及慢作用抗風濕藥治療。SLE 患者組排除標準：①合并其他自身免疫系統性疾病；②合并實體腫瘤及血液系統腫瘤、嚴重肝腎功能損害、重癥感染、慢性病感染包括結核病等疾病。SLE 患者組平均年齡(37.1±9.1)歲,其中男6 例,女52 例；健康對照組平均年齡(35.3±8.9)歲,其中男2 例,女50 例。兩組年齡、性別等一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05),具有可比性。本研究經大連市中心醫院倫理委員會批準,所有入選者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 免疫指標檢測 所有研究對象均于空腹12 h后抽取肘靜脈血4 ml,檢測患者血清樣本的肝功能、腎功能和免疫學指標以及全血細胞計數進行測定。

1.2.2 T 淋巴細胞亞群檢測 所有研究對象均于清晨空腹采集外周靜脈血2 ml 置于肝素抗凝管中,并于4 h 內完成檢測。取2 只流式專用管,進行流式細胞染色,經BDFACSCanto Ⅱ型流式細胞儀(美國BectonDickinson 公司)檢測。

1.3 統計學方法 采用SPSS22.0 統計學軟件處理數據。計量資料以均數±標準差()表示,采用t檢驗；計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 SLE 患者臨床資料 58 例SLE 患者中,活動期48 例(82.8%),穩定期10 例(17.24%)；輕度活動期20 例(34.48%),中度活動期15 例(25.86%),重度活動期13 例(22.41%)。全身癥狀中乏力43 例(74.1%)、發熱26 例(44.8%)為主要表現。臟器受累中血液系統受累44 例(75.9%)、皮疹及黏膜潰瘍27 例(46.6%)、狼瘡腎炎24 例(41.4%)、肺間質改變3 例(5.2%)、心包炎2 例(3.4%)、胃腸道血管炎1 例(1.7%)。

2.2 兩組免疫指標和T 淋巴細胞亞群水平比較 兩組CD3+T、CD8+T 百分比、CD8+T、CD56+NK、補體C3、補體C4、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M 比較,差異無統計學意義(P＞0.05)。SLE 患者組CD3+T、CD4+T 百分比、CD4+T、CD4+/CD8+、免疫球蛋白E、ESR、CRP 水平均高于健康對照組,CD56+NK 百分比、免疫球蛋白G 水平低于健康對照組,差異均有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組免疫指標和T 淋巴細胞亞群水平比較()

表1 兩組免疫指標和T 淋巴細胞亞群水平比較()

注：與健康對照組比較,aP＜0.05

2.3 SLE 患者組不同疾病活動度T 淋巴細胞亞群計數比較 重度活動期患者CD3+T、CD4+T 計數高于穩定期患者,中度活動期患者CD3+T 高于穩定期患者,差異均有統計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 SLE 患者組不同疾病活動度T 淋巴細胞亞群計數比較()

表2 SLE 患者組不同疾病活動度T 淋巴細胞亞群計數比較()

注：與穩定期比較,aP＜0.05

3 討論

正常機體的免疫是通過免疫細胞相互作用,維持免疫系統的平衡穩態。其中最主要的免疫細胞為淋巴細胞,淋巴細胞的種類以及數量、功能的異常可導致免疫系統紊亂,繼而出現一系列病理變化。作為典型自身免疫性疾病的一種,T 淋巴細胞功能失調在SLE的發生、發展中扮演重要角色［5］,SLE 患者異常免疫主要表現為B 細胞的活化、增殖,B 細胞的功能異常受到T 細胞亞群和多種細胞因子的調節。其中可表現為輔助性CD4+T 細胞和抑制性CD8+T 淋巴細胞比例異常在T 淋巴細胞異常激活狀態下,促使SLE 患者機體B 淋巴細胞異常活化和增殖,繼而產生大量的自身抗體和炎性介質,進一步損傷多個靶器官［6,7］。多種研究表明,包括SLE 在內的多種自身免疫系統疾病中,T 淋巴細胞亞群平衡是保證機體正常免疫功能的必要條件。T 淋巴細胞亞群主要包括CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞絕對值、CD4+/CD8+比值等共同維持T 淋巴細胞功能及數量的平衡,若上述T 淋巴細胞亞群發生改變,可加劇機體免疫紊亂狀態。這種失衡狀態繼而誘導B 淋巴細胞增生,促使體液免疫功能亢進,因此,針對T 細胞亞群在SLE 發病及致病機制中的研究,已成為SLE 的研究重點［8］。本研究發現,未經藥物治療的SLE 患者外周血總CD3+T 百分比高于健康對照組,同時輔助性CD4+T 百分比升高,T 細胞處于激活狀態,CD4+/CD8+淋巴細胞比值升高,這與國外學者研究相同,充分說明CD4+T 和CD8+T 淋巴細胞在未經藥物治療的SLE 的發病機制中存在至關重要作用［9］。CD4+T 淋巴細胞可輔助誘導細胞免疫和體液免疫,同時可釋放γ-干擾素來導致炎癥的形成,所以CD4+T 淋巴細胞可以反映自身免疫疾病機體的免疫狀態［10］。T 淋巴細胞亞群另一個重要組成部分為CD8+T 淋巴細胞,CD8+T 淋巴細胞可促進免疫抑制因子釋放,是一種免疫抑制細胞,具有免疫抑制作用。T 淋巴細胞亞群數目的不同可反應免疫功能異常,而比值異常即可反映機體免疫的穩態,其中CD4+/CD8+淋巴細胞比值反映機體的T 淋巴細胞免疫是否存在紊亂。本研究發現表明未經激素和免疫抑制劑治療的SLE 患者外周血 CD4+/CD8+淋巴細胞比值升高,可得出未經激素和免疫抑制劑治療的SLE 患者T 淋巴細胞處于激活狀態。SLE患者臟器損害主要來源于多種自身抗體,可見不只是T 淋巴細胞在SLE 的發病機制中起著重要作用,B 淋巴細胞及NK 細胞也發揮著重要作用；但是,本研究發現SLE 患者組CD56+NK 百分比低于健康對照組,差異有統計學意義(P＜0.05)。具體機制還需進一步研究；本研究發現未治療的SLE 患者,處于疾病活動期的患者較多,隨著疾病活動度的增加,炎性指標升高,SLE 患者外周血CD4+T 淋巴細胞計數逐漸增高,與先前的研究結果一致,但此次研究中,處于穩定期患者數目少,可能存在一定偏倚。

綜上所述,外周血T 淋巴細胞亞群的異常在SLE的發生發展中起著重要作用,與SLE 疾病活動度密切相關,更加確定SLE 是由免疫介導的多因素參與并相互作用的復雜疾病。