重慶地區健康成人血清鐵蛋白參考區間的建立

李德濤 侯玉磊

血清鐵蛋白是機體內一種貯存鐵的可溶組織蛋白,作為鐵的貯存形式,其在血清中的濃度與體內貯存的鐵呈正比,可用于監測體內鐵代謝［1］。血清鐵蛋白在急性髓性白血病中會上升,隨著病情的好轉而降低［2］。妊娠期糖尿病患者一般血清鐵蛋白會升高［3］。有分析表明血清鐵蛋白水平同糖尿病患者急性冠狀動脈綜合征的冠脈病變程度相關［4］,另外,鐵蛋白在乳腺癌、食管癌和肺癌等腫瘤疾病中出現不同程度的升高,且與其他腫瘤標志物聯合檢測,可大大提高腫瘤的檢出率,可以作為腫瘤療效的評估指標［5-7］。目前,國內臨床將血清鐵蛋白用于預測機體內鐵含量和惡性腫瘤的實驗室診斷,但大部分實驗室的血清鐵蛋白仍采用試劑說明書提供的參考區間,隨著生活水平的改善,健康成人血清鐵蛋白的濃度亦有可能會發生改變,經調查本院2016 年下半年2843 例健康體檢者血清鐵蛋白濃度在參考區間以外的比例為22%,因此,若醫生將血清鐵蛋白應用于腫瘤的診斷中容易誤診,進而造成患者恐慌。因此,作者希望通過研究重慶地區健康人群血清鐵蛋白水平,期望建立基于羅氏Cobas e602 檢測系統的適合本地區、本人群的血清鐵蛋白參考區間。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2017 年1～12 月來自重慶醫科大學附屬第一醫院健康體檢中心的成年健康體檢者2000 例：按照性別分為男性和女性,各1000 例。男性患者年齡22～85 歲,平均年齡45 歲。女性患者年齡19～78 歲,平均年齡42 歲。男性和女性患者的一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05),具有可比性。患者再根據年齡分為18～30 歲、31～40 歲、41～50 歲、51～60 歲、≥61 歲。納入標準：①1 個月內無急性病感染史；②B 超提示無肝硬化、脂肪肝及其他肝病；③無炎癥、感染、腎臟和肺部疾病；④半年內無手術史和輸血史；⑤女性不在妊娠期或哺乳期；⑥調查前1 個月內無獻血；⑦無腫瘤疾病史。

1.2 研究方法

1.2.1 樣本采集 嚴格按照科室靜脈采血操作規程采集空腹靜脈血2 ml,室溫放置5 min,待血液凝固后,3500 r/min,離心10 min,排除黃疸、溶血、脂血標本,分離血清后待檢,8 h 內完成檢測。

1.2.2 儀器與試劑 德國羅氏Cobas e602 全自動電化學發光分析儀,鐵蛋白檢測試劑盒(批號：307544)、校準品(批號：330886)及質控品(批號：237198)均由羅氏公司提供。

1.2.3 質量控制 按照標準操作規程在實驗前分別檢測羅氏配套低水平和高水平質控,確定質控在控的前提下進行樣本測定,本年度Cobas e602 全自動電化學分析儀鐵蛋白性能評價的批間平均變異系數分別為2.5%和2.8%,不精密度可接受。同時查閱2017 年衛生部門臨檢中心鐵蛋白室間質評,成績滿意,正確度得到保障。

1.3 統計學方法 使用SPSS13.0 統計軟件對數據進行統計分析。按照CLSI C28-A3［8］文件判斷離群值并剔除,偏態分布資料參考區間采用百分位數法表示,以非參數排序取P2.5～P97.5作為參考區間,組間比較采用秩和檢驗。P＜0.01 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 男女兩組鐵蛋白水平比較 對所有數據進行離群分析,采用Dixon 法剔除離群值,998 例健康成年男性和998 例健康成年女性清鐵蛋白測定結果納入下一步統計分析。對所有數據按性別進行分組統計發現：健康成年男性和健康成年女性血清鐵蛋白測定結果均為偏態分布,應當采用百分位數法進行進一步分析(圖1,圖2)。經秩和檢驗分析,健康成年男性血清鐵蛋白濃度明顯高于健康成年女性,差異具有統計學意義［334.50(225.40,488.70)ng/ml VS 79.17(39.88,133.10)ng/ml,P＜0.01］。見圖3。

圖1 998 例健康男性血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

圖2 998 例健康女性血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

圖3 不同性別血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

2.2 不同性別健康成年各年齡段血清鐵蛋白濃度比較 將同性別血清鐵蛋白濃度按年齡分段并同上一年齡段進行比較,≥61 歲健康成年男性的血清鐵蛋白濃度低于51～60 歲男性,差異具有統計學意義(P＜0.01)。51～60 歲健康成年女性的血清鐵蛋白濃度高于41～50 歲女性,差異具有統計學意義(P＜0.01)。見圖4。女性各年齡段的血清鐵蛋白濃度均明顯低于男性,差異具有統計學意義(P＜0.01)。見表1。

表1 不同性別健康成年各年齡段血清鐵蛋白濃度比較［M(P25,P75),ng/ml］

圖4 不同性別及年齡段血清鐵蛋白濃度(ng/ml)

2.3 建立重慶地區男女血清鐵蛋白參考區間 重慶地區健康成年不同性別的血清鐵蛋白濃度有差異,相同性別不同年齡段的血清鐵蛋白濃度也有差異,所以重慶地區健康成年參考區間應針對不同性別和年齡段來進行設置。將無統計學意義的年齡段進行合并,得出血清鐵蛋白不同性別及年齡段參考區間：男性：18～60 歲 為88.93～1139.35 ng/ml,≥61 歲 為34.10～854.42 ng/ml；女性：18～50 歲為6.17～260.73 ng/ml,≥51 歲為30.59～500.45 ng/ml。見表2。

2.4 重慶地區血清鐵蛋白參考區間與其他地區血清鐵蛋白參考區間比較 統計文獻可知,血清鐵蛋白在不同地區,不論檢測方法是否相同,其參考區間并不一致。見表2。

表2 不同區域的血清鐵蛋白參考區間

2.5 參考區間驗證 選取2018 年1 月～2019 年3 月在健康體檢中心體檢的體檢人員進行參考區間驗證,按照CLSIC28-A3 文件剔除離群值。根據CLSIC28-A3文件,制定判斷標準為：男性和女性血清鐵蛋白濃度在參考區間以外的人數占總人數的10%以下,認為則驗證通過。經驗證,本次血清鐵蛋白參考區間通過驗證。見表3。

表3 2018 年1 月～2019 年3 月健康體檢血清鐵蛋白參考區間驗證

3 討論

鐵蛋白作為人體細胞內最重要的儲鐵蛋白,主要功能是儲存并調節血清鐵水平。同時作為一種急性時相反應蛋白,其能夠調節造血和免疫系統［12］,血清鐵蛋白的降低常與缺鐵性貧血相關,由此可見,血清鐵蛋白的異常升高或降低都有臨床意義。隨著經濟的發展,人們的生活方式和飲食結構發生了改變,體內血清鐵貯存量也有明顯的改變。有研究發現很多因素影響血清鐵蛋白參考區間的建立,主要包括研究人群(性別、生活習慣和水平等)和檢測方法兩個方面,另外有研究證實,年齡、運動、飲酒等因素均會影響血清鐵蛋白濃度［13,14］。

本次研究顯示,女性各年齡段的血清鐵蛋白濃度均明顯低于男性,差異具有統計學意義(P＜0.01)。根據文獻報道,這可能與女性飲食較少,且月經失血有關［15］。男性血清鐵蛋白在成年后逐漸增加,在30～60 歲相對穩定,在60 歲后開始下降,這可能與老年人飲食結構改變和鐵吸收能力有關。女性50 歲以后血清鐵蛋白濃度明顯升高,這可能與女性絕經相關。這提示,血清鐵蛋白參考區間建立應該根據性別進行劃分,并且按年齡段進行統計分析。

參考區間又稱正常值范圍,是醫生判斷患者健康與否的重要標準之一,這就要求臨床實驗室提供正確適用的參考區間,否則會導致誤診、引起患者的恐慌,甚至錯誤的診療。因此建立適合本地區人群的血清鐵蛋白參考區間,以給臨床醫生提供正確可靠的診斷提示就顯得至關重要。本次建立重慶地區血清鐵蛋白參考區間時發現應當按性別和年齡段進行劃分,同其他地區采用相同檢測方法或不同檢測方法的參考區間也不一致［9-11］,基于電化學檢測方法的血清鐵蛋白參考區間上限高于基于免疫比濁和化學發光方法的血清鐵蛋白參考區間,這可能與血清鐵蛋白的檢測方法有關,但需要進一步研究；其次可能與不同地區的人群的生活方式以及飲食結構不同有關。本研究也僅是基于羅氏電化學方法的檢測,且＞60 歲健康成年男性較少。鑒于血清鐵蛋白在腫瘤疾病診斷的重要性,本次調查發現不同檢測方法的血清鐵蛋白參考范圍不一致,對于同一標本,應用不同檢測方法可能會出現不一致的結果,這就需要根據實驗方法建立相應人群的參考范圍,對于重慶地區不同檢測方法間的血清鐵蛋白比對需要在下一步的工作中進行調查研究。

綜上所述,本研究建立了重慶地區以羅氏電化學發光法測定的血清鐵蛋白參考區間,初步為臨床提供了適用于重慶地區基于電化學檢測方法的血清鐵蛋白參考區間。