沼液對葡萄葉蟬及霜霉病的防治效果

徐雯琦， 李文博， 郭清霖， 鄭云霄， 陳曉峰

（中國農業大學煙臺研究院，山東 煙臺 264670）

0 引言

葡萄在我國有著較大的種植面積，隨著葡萄栽培的面積、葡萄品種及葡萄栽培區域的不斷增加，葡萄病蟲害的種類也迅速增加。霜霉病、炭疽病、白粉病及白腐病是葡萄主要病害，其中葡萄霜霉病危害最大，可影響葡萄的整個生育期，導致果實脫落，也是釀酒葡萄最嚴重的病害之一[1-4]。葡萄葉蟬、紅蜘蛛及堅蚧是葡萄主要蟲害，其中葡萄葉蟬對葡萄危害最大，可導致秋季葉片提早脫落、果實著色差、成熟延遲、含糖量降低等問題[5]。

化學防治是目前最主要的防治手段，利用化學藥劑防治雖然見效快、效果好、使用方便，但是存在殺傷天敵、殘毒和污染環境等問題，如甲霜靈等具有較強內吸性的脂溶性農藥會遷移進果肉組織、抑菌靈等殺菌劑殘留會降低酵母菌的豐富度，在葡萄釀酒過程中產生不良影響[1,3]。

豬糞沼液是由豬糞污經厭氧發酵處理產生的有機廢水，經多種微生物的作用，沼液含有許多活性物質，其中各類營養元素、氨基酸、植物激素、益菌群及抗生素可以用作葉面噴肥、種子浸泡液、?；ū９麆┘盁o土栽培母液，即提高了產量，又減少了成本，同時還具有改良土壤性狀、增強作物抗性及防治作物病蟲害等功效[6-11]。已有研究發現，豬糞沼液對果樹增強樹勢和抗逆性有一定作用，其對西瓜枯萎病、草莓灰霉病、黃瓜霜霉病、大蔥紫斑病和小麥赤霉病等病害有明顯的抑制作用，對蚜蟲、蘋果紅蜘蛛等蟲害防治也有一定效果[12-17]。但對其在葡萄（赤霞珠）病蟲害的防治效果還未見研究報道。

本文以赤霞珠為試驗材料，研究沼液對葡萄葉蟬及霜霉病的防治效果，旨在為葡萄葉蟬、霜霉病的防治提供一種新方法，為減少實際生產中環境污染和資源浪費提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 地點

試驗于2021 年3?7 月在中國農業大學煙臺研究院試驗田及日光溫室進行。采用的日光溫室規格為450 m2（50 m×9 m），露地栽培，試驗田土質為中壤土，pH值6.24，土地澆灌方便。

1.2 材料

沼液來自于山東民和生物科技有限公司，儲存期>2 年；經測定沼液總養分≥25%，主要成分中氮4.26 g/L、磷0.137 g/L、鉀0.35 g/L，鈣、硼、硒、鋅、維生素B12 及抗生素等養分≥10%，pH 值7.52。

植物材料為中國農業大學煙臺研究院提供的赤霞珠幼苗，1 月齡，無毒且未嫁接。日光溫室和露地栽培葡萄株行距均為1.20 m×0.95 m。葡萄栽植后，每隔5～7 d澆水一次，根據具體情況施肥，保證葡萄正常生長。

1.3 葡萄霜霉菌接種液的制備

供試菌液制備采用試驗田中發病較重且具有較強致病力的葡萄病原株，挑取葉背白色霉層，經鏡檢確定為霜霉病病原，再用清水沖洗葉片表面的雜物，然后在黑暗保濕（相對濕度95%以上）環境下培養24 h，之后用毛筆蘸取無菌水將背面霉狀物洗下，在血球計數板下觀察最終配成濃度為1×106cfu/mL 的孢子懸浮液[4]。

1.4 葡萄葉蟬防治分組

沼液原液與清水按照體積比配置成0%（T0，CK）、20%（T1）、40%（T2）、60%（T3）、80%（T4）、100%（T5）6 種不同濃度的處理液，每處理6 株，3 次重復。從葡萄展葉期開始定期（14 d 一次）噴施不同濃度的沼液，進行葉蟬危害試驗，調查記錄并計算露地栽培條件下植株受葉蟬危害的葉片數，并按照式（1）和式（2）計算葉蟬危害率和防治效果。

1.5 葡萄霜霉病防治分組

田間和溫室試驗各設6 個處理（處理方法同1.4），每處理6 株，3 次重復。從葡萄展葉期開始定期（7 d一次，共2 次）噴施不同濃度沼液，沼液用量以所有葉片不滴水為準，最后一次沼液噴施后5 d 進行霜霉病病原菌接種試驗。

采用噴霧器噴霧法對田間和溫室各處理的葡萄苗進行霜霉病病原菌接種，按照每株10～15 mL 的用量噴至葉片，以不滴水為宜，自然晾干后，在溫度為23～25 ℃、黑暗條件下（RH≥85%）誘發24 h。5 d 后進行霜霉病病情指數調查。按照表1 霜霉病的分級標準來記錄，并按照式（2）和式（3）計算病情指數和防治效果。

表1 葡萄葉片霜霉病分級標準Tab. 1 Classification standard of downy mildew in grape leaf

1.6 數據處理

數據處理與統計分析使用SPSS Statistics 20.0 與Microsoft Excel 2016 軟件，差異顯著性檢驗采用LSD 法，P< 0.05 時，認為差異具有顯著性。

2 結果與分析

2.1 葡萄葉片田間葉蟬危害

從圖1 可以看出，在露地栽培條件下，噴施沼液處理的試驗組（T1～T5）葉蟬危害率均低于未噴施沼液的對照組（T0），這說明噴施沼液對防治葉蟬危害有一定作用，葉蟬危害率隨著噴施沼液濃度的提高而逐步下降，T5具有最低的葉蟬危害率，為17.40%。從方差分析可知，噴施沼液試驗組與未噴施沼液的對照組葉蟬危害率差異顯著；T1處理、T2處理、T3處理與T4處理差異不顯著；T5處理與噴施其他濃度沼液處理組差異顯著，并且T5處理葉蟬危害率最低，可顯著降低葉蟬的危害率，因此噴施沼液原液對于葉蟬具有最好的防治效果。

圖1 不同濃度沼液處理下葡萄葉片葉蟬平均危害Fig. 1 Average damage rate of leaf hopper in grape leaves treated with biogas slurry of different concentrations

2.2 葡萄葉片霜霉病病情指數

從圖2a 可以看出，在露地栽培條件下，噴施沼液的試驗組葡萄霜霉病病情指數與對照組相比較低，T4處理具有最低的病情指數1.53，T5處理病情指數較T4增高，T1處理病情指數達到3.06，但均比對照組病情指數低。低于80%濃度范圍內，提高沼液濃度，可以使得霜霉病病情指數逐步下降。從方差分析可以看出，噴施的沼液濃度在60%濃度范圍內時，沼液處理組病情指數相比T0下降，但是對于葡萄霜霉病病情指數的降低差異不顯著；噴施80%濃度沼液的試驗組（T4）霜霉病具有最低的病情指數，并且與T0、T1、T2、T3、T5處理組對比，顯著降低了病情指數，說明噴施沼液對葡萄霜霉病有一定的防治作用，并且沼液噴施濃度為原液濃度的80%處理對防治葡萄霜霉病具有最顯著的效果，噴施100%濃度沼液反而較噴施80%濃度沼液防治效果下降。

圖2 不同濃度沼液處理下葡萄葉片霜霉病平均病情指數Fig. 2 Average disease index of downy mildew in grape leaves treated with different concentration of biogas slurry

從圖2b 可以看出，在溫室條件下，沼液處理均比對照處理霜霉病病情指數降低，病情指數呈現逐漸下降的趨勢（T1～T4處理），以T4處理，病情指數最低，為1.78，顯著低于對照組。當使用原液處理時（T5），霜霉病病情指數呈現上升的趨勢，但未超過對照組，說明噴施沼液對于防治葡萄病效果良好，且噴施80%濃度沼液對于防治葡萄霜霉病有較好的效果，噴施100%濃度沼液反而較噴施80%濃度沼液防治效果下降。

3 討論

目前對于沼液在葡萄生產上應用的研究主要集中在改善土壤理化性狀、提高葡萄產量與提升產品品質方面，對沼液的防治病蟲害方向研究較少[7-10,18]。沼液中富含抗菌、消化抑制因子和特殊的營養成分，對農作物多種病蟲害均能起到良好的殺滅和抑制作用。郭生虎[14]將其與低能保護性有機殺菌劑復配作為農藥的增效劑，對黃瓜霜霉病的殺菌效果得到顯著提升，農藥的使用量得到降低。桑得福等[19]的研究表明，在黃芪上施用沼液對于根腐病有很好的防治效果，并且增加沼液灌根次數，防效幅度隨著增大。同時從尹芳等[20]研究也可以看出，施用沼液之后大多數植物的病原菌得到了顯著抑制。

本研究發現，對于露地栽培，葡萄葉蟬危害率隨沼液濃度提高而降低，葡萄霜霉病病情指數在沼液濃度0%～80%范圍內隨沼液濃度提高而降低，噴灑沼液原液的病情指數也低于未噴施沼液。說明在露地栽培條件下噴施沼液對葡萄葉蟬和葡萄霜霉病均有一定的防治效果，這與邵志鵬[21]露地栽培施用沼液可以減少蟲害、降低葡萄病情指數的研究結果一致。由于田間條件下試驗環境相對不穩定，易受大風、降雨等天氣影響，導致試驗數據有偏差，因而對葉蟬和霜霉病防治效果的研究增加了溫室內的平行試驗，可進一步完善數據。對于溫室栽培，試驗過程中發現溫室中幾乎沒有葉蟬，不像霜霉病等病害在露地和溫室都普遍發生，葉蟬危害非常輕，數據價值不高，因此本文未對溫室葉蟬防治效果進行討論。葡萄霜霉病病情指數在對照組至沼液濃度為80%范圍內隨沼液濃度提高而降低，雖然防治效果較露地稍差，但趨勢與露地栽培結果一致，也符合劉艷輝[22]施用沼液可以提高溫室葡萄抗病性的結論。綜合所有試驗結果，噴施沼液原液對于葡萄葉蟬的防治效果為49.12%；噴施80%濃度沼液可以顯著降低露地栽培和溫室栽培的霜霉病病情指數，防治效果均超過50%，與嵇東[10]和沈其林等[6]試驗結果一致，說明沼液對于霜霉病具有較好的防治效果。

4 結束語

盡管沼液對于霜霉病具有較好的防治效果，但由于使用的沼液品種單一，沼液主要成分有差異，以及不同病害蟲害的發病規律的不一致，沼液的綜合利用效果很難得以全面評價。后續應嚴格控制沼液成分，針對不同病蟲害開展試驗研究，為沼液的綜合利用奠定技術基礎。