5年送檢血培養標本的病原菌培養結果及耐藥譜分析

鐘玉杰

洛陽市婦幼保健院醫學檢驗科,河南洛陽 471000

近年來，隨著大量抗菌藥物、各種侵襲性診療技術及相關免疫抑制劑的使用，機體血流感染發病率逐漸升高[1]。及時準確地確定血流感染病原菌種類并快速得到藥敏試驗報告結果，對血流感染性疾病診斷具有重要意義。血流感染診斷的“金標準”為血培養，可通過血液病原菌的分離與藥敏試驗，對臨床針對性用藥進行指導，從而提高患者康復率，降低病死率[2-3]。本研究回顧性分析洛陽市婦幼保健院2015年6月至2020年6月226例住院患者2 418份送檢血培養標本病原菌分離菌株的資料，旨在為臨床合理用藥提供可靠依據。現報道如下。

1 材料與方法

1.1標本來源 收集洛陽市婦幼保健院各科室2015年6月至2020年6月送檢血培養標本病原菌分離菌株的臨床資料，剔除同一病患檢測到的重復病原菌株與有疑似污染的棒狀桿菌、微球菌等。

1.2儀器與試劑 LABSTAR plus型全自動血培養儀與配套血培養瓶，Walk Away-96plus全自動細菌鑒定儀與藥敏分析系統，革蘭陽性菌與革蘭陰性菌鑒定卡及藥敏卡片(購自美國貝克曼庫爾特有限公司)。

1.3方法 將血培養瓶放置于LABSTAR plus型全自動血培養儀，在陽性報警后將標本轉種于血平板和麥康凱平板，并將其置于CO2箱與恒溫培養箱孵育，行染色鏡檢。若培養超過5 d仍為陰性，采用血瓊脂平板盲種，若培養2 d后無菌生長即為陰性。采用Walk Away-96plus全自動細菌鑒定儀鑒定菌株，藥敏試驗操作均參考美國和臨床實驗室標準協會(CLSI)進行，判定標準按照CLSI2015版。

1.4質控菌株 大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、銅綠假單胞菌ATCC27853及肺炎克雷伯菌ATCC700603。

1.5統計學處理 采用WHONET5.4軟件進行數據處理及統計分析。計數資料采用頻數或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1患者臨床資料 從226例住院患者中獲取2 418份標本，其中男126例，女100例；年齡0～70歲；疾病類型：呼吸系統疾病158例、消化系統疾病30例、外傷8例、血液系統疾病22例、腫瘤8例。

2.1血培養標本病原菌培養結果 2 418份送檢血培養標本檢出菌株337株，剔除可疑污染11株，共檢出病原菌326株，檢出率為13.94%(337/2 418)，檢出革蘭陽性菌與革蘭陰性菌分別為133株(40.80%)、181株(55.52%)；檢出病原菌前4位為大腸埃希菌(50.28%)、肺炎克雷伯菌(19.89%)、表皮葡萄球菌(28.57%)、金黃色葡萄球菌(17.29%)。見表1。

表1 血培養標本病原菌培養結果

2.2主要革蘭陰性菌對常用抗菌藥物耐藥情況 主要革蘭陰性菌藥敏試驗結果顯示，大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對氨芐西林耐藥率最高，其耐藥率分別為86.81%、100.00%，大腸埃希菌對呋喃妥因、阿米卡星等抗菌藥物敏感，肺炎克雷伯菌對頭孢替坦、亞胺培南等抗菌藥物敏感。見表2。

表2 主要革蘭陰性菌對常用抗菌藥物耐藥情況

2.3主要革蘭陽性菌對常用抗菌藥物耐藥情況 主要革蘭陽性菌藥敏試驗結果顯示，表皮葡萄球菌與金黃色葡萄球菌對芐青霉素(耐藥率分別為92.11%、78.26%)、紅霉素(耐藥率分別為78.95%、73.91%)耐藥率最高，表皮葡萄球菌與金黃色葡萄球菌對呋喃妥因、替加環素、奎奴普汀/達福普汀、萬古霉素等抗菌藥物敏感。見表3。

表3 主要革蘭陽性菌對常用抗菌藥物耐藥情況

3 討 論

血流感染為病死率較高的全身感染性疾病，主要為敗血癥及菌血癥，其臨床主要表現為驟發寒戰、高熱、呼吸急促、皮疹等。相關臨床研究顯示，我國住院血流感染患者病死率為28.7%，近年來，血流感染發病率呈逐年上升趨勢，其感染危險因素有嗜中性粒細胞減少、使用免疫抑制劑、留置中心靜脈導管等，其嚴重威脅患者生命健康，及時有效的診療可明顯降低血流感染的病死率[4-5]。

本研究結果顯示，2 418份送檢血培養標本共檢出有效病原菌326株，檢出革蘭陽性菌與革蘭陰性菌分別為133株、181株，革蘭陰性菌檢出率高于革蘭陽性菌，其中檢出病原菌前4位為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌，這與葛學順等[6]和夏雨等[7]研究結果相似。

本研究結果顯示，大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對氨芐西林耐藥率最高，大腸埃希菌對呋喃妥因、阿米卡星等抗菌藥物敏感，肺炎克雷伯菌對頭孢替坦、亞胺培南等抗菌藥物敏感，這與徐紅云等[8]研究結果相似。相關研究顯示，近年來，廣譜頭孢菌素藥物的使用導致多數革蘭陰性菌對其耐藥率較高，而目前臨床治療腸桿菌科感染的有效藥物為亞胺培南[9-11]。其次，大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥性也相對較高，但本研究的耐藥率高于其他文獻報道[12-13]，分析其原因可能是本研究標本采集相對較少，且與抽取血液標本患者用藥情況相關，需根據影響耐藥性的相關因素進行更深入的研究。

本研究結果顯示，表皮葡萄球菌與金黃色葡萄球菌對芐青霉素、紅霉素耐藥率最高，表皮葡萄球菌與金黃色葡萄球菌對呋喃妥因、替加環素、奎奴普汀/達福普汀、萬古霉素等抗菌藥物敏感。既往研究表明，表皮葡萄球菌屬凝固酶陰性葡萄球菌，在機體皮膚、黏膜等組織廣泛分布，其采集過程若存在操作不當極易引發感染，需臨床醫師結合患者病情綜合診斷[14-15]。另外，隨著各種侵襲性診療技術、廣譜抗菌藥物的使用，凝固酶陰性葡萄球菌成為引發醫院內感染的重要病原菌，且耐藥情況日漸嚴重，而萬古霉素、替加環素等為治療醫院內感染的有效抗菌藥物[16-17]。

本研究還分離出真菌12株(3.68%)，這與陳國敏等[18]研究結果相似。提示真菌可能對部分抗菌藥物具有一定耐藥性，臨床應該注重對真菌感染的監測，控制真菌感染用藥，避免出現真菌高耐藥性。本研究血培養出現了假陽性現象(可疑污染11株)，而假陽性結果易導致誤診，以及藥物應用不準確，并增加藥物選擇壓力，延緩患者康復時間，目前，臨床常以WS/T503-2017臨床微生物實驗室血培養操作規范作為血培養操作標準，嚴格按照規范進行操作，避免發生血培養污染而對臨床診斷造成干擾。本研究血培養標本來自本院各科室，研究結果具有偶然性，與陳興英等[19]的研究標本選取范圍存在差異，該研究血液標本源于重癥科室，檢出人葡萄球菌較多，因而與本研究結果不同，分析其原因可能為選取送檢標本檢測結果與患者所患疾病及病情嚴重程度存在一定相關性，因此要詳細了解各科室血培養結果及耐藥情況還需根據疾病分類進行深入研究。

綜上所述，醫院送檢血培養標本分離病原菌種類較復雜，且分離菌對常用抗菌藥物耐藥性嚴重，血培養及藥敏試驗為診斷血流感染的依據，可為血流感染合理用藥提供參考依據。