禽霍亂病的診斷和防治措施

戰(zhàn)武

（山東省棲霞市蘇家店畜牧獸醫(yī)站 265311）

禽霍亂病是一種接觸性傳染病，家禽、野禽、鳥均可感染，發(fā)病季節(jié)不明顯，以夏秋季最多，且多發(fā)生于成年雞，傳染來源主要是400 日齡以上雞群中的帶菌雞。健康雞采食被病雞污染的飼料、飲水、蠅等昆蟲而感染；飼料缺乏維生素、蛋白質(zhì)及礦物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)，濕度增加等是本病誘因。季節(jié)性發(fā)生的原因是由于外界條件，主要受氣候變化而引起。急性發(fā)病時(shí)有很高的致死率，慢性發(fā)病時(shí)死亡很少，急性病禽有較嚴(yán)重的下痢癥狀，所以稱之為禽霍亂。

1 臨床癥狀

禽霍亂臨床以急性型居多，慢性型多不為人注意，潛伏期一般為2～9d。急性病例無任何癥狀就突然發(fā)病而死亡，發(fā)病率、死亡率均較高。較急性的潛伏期為2～3d，主要表現(xiàn)精神委頓、嗜睡、垂翅縮頭、不食、腹瀉、糞便呈灰黃色綠色，肉髯呈紫黑色，體溫升高至43～44℃[1]。慢性病例逐漸消瘦、精神較差、貧血、冠髯蒼白腫大，關(guān)節(jié)腫脹，多見于急性發(fā)病后期，或者是由于毒力較弱的多殺性巴氏桿菌感染所致，死亡率不高。鴨的癥狀與雞相似，病寒戰(zhàn)、怕下水、下腭軟處腫大、舌高度腫脹、眼球下陷(不死，常失明) 流出大量液體。排出綠色、污黃色或清水樣糞便，幾天內(nèi)即死。病程長(zhǎng)的可見局部關(guān)節(jié)炎。

2 病理變化

禽霍亂急性與慢性病例在病理變化上有所不同。急性死亡的病雞，腹膜、肌胃、心冠及皮下脂肪出現(xiàn)顯著的出血性變化。肝臟具有特征性變化，呈實(shí)質(zhì)性肝炎，稍腫、質(zhì)稍脆，有灰白色無數(shù)小壞死灶布滿表面。慢性死亡病雞臨床癥狀以呼吸道表現(xiàn)嚴(yán)重時(shí)，有許多黏液滲出物充滿鼻腔與氣管，若局限于冠髯、關(guān)節(jié)等病例，最初為水腫性腫脹，而后形成干酪樣滲出物。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 病料采集

死于禽霍亂病的雞在全身器官中都可分離出多殺性巴氏桿菌。為預(yù)防雜菌污染，對(duì)死亡時(shí)間較長(zhǎng)的病禽可細(xì)菌分離病禽骨髓。慢性禽霍亂病例則采取有病灶的局部材料。

3.2 培養(yǎng)基

血液瓊脂、馬丁湯瓊脂和馬丁湯。

3.3 細(xì)菌分離

用鉑金鉺采取少許病料，接種于血液斜面上，37℃培養(yǎng)2h，即可分離出多殺性巴氏桿菌。

4 細(xì)菌鑒定

4.1 細(xì)菌形態(tài)

病原一般存在于病禽內(nèi)臟、血液、分泌物和糞便中。它是一種卵圓形或短桿狀細(xì)菌，大小為0.25～0.6×0.6～2.5μm，常單個(gè)存在。

4.2 菌落形態(tài)

直徑2～3mm 呈圓形，光滑隆起、半透明、似奶油，靠近的菌落有互相融合現(xiàn)象，分不清彼此的界限，新分離的菌株皆為此種菌落形態(tài)。

4.3 菌落熒光觀察

將細(xì)菌37℃培養(yǎng)18～22h 后，放大810 倍，觀察菌落熒光。當(dāng)禽霍亂流行時(shí)，菌落呈橘紅色熒光，毒力強(qiáng)的菌株在培養(yǎng)基上經(jīng)長(zhǎng)期傳代后或由慢性病灶中分離出的菌株，菌落熒光可能出現(xiàn)分化。蘭氏菌落較小，為1～2mm，熒光為蘭氏，毒力弱。其次為楔形變化，橘紅熒光的菌落中出現(xiàn)一條或多條糞樣色彩的楔形熒光，這是菌株不穩(wěn)定的表現(xiàn)，通過機(jī)體12 代后，此種楔形變化的菌落即會(huì)消失。偶爾可看到粗糙型菌落的熒光，菌落有黃色熒光，表面有黑色、粗糙環(huán)狀紋。此種菌落不穩(wěn)定，仍可變?yōu)楣饣汀㈤偌t色熒光。

橘紅色熒光多屬毒力強(qiáng)的菌落，但并不是絕對(duì)的，少數(shù)毒力弱的菌株也出現(xiàn)橘紅色熒光菌落。蘭氏熒光菌落是毒力弱的表現(xiàn)，有時(shí)出現(xiàn)黃綠色熒光，也是毒力弱的表現(xiàn)。另一方面，培養(yǎng)基成分、平皿干濕度和培養(yǎng)時(shí)間等也在一定范圍內(nèi)影響熒光的色澤。

4.4 莢膜染色

有莢膜的菌體一般具有橘紅色熒光，沒有莢膜的菌體為蘭氏熒光，選橘紅色熒光菌落用鹽水稀釋，在高倍鏡下檢查，菌體周圍的暈圈即為莢膜。

4.5 莢膜型檢查

根據(jù)血清學(xué)分類，多殺性巴氏桿菌可分為4 個(gè)莢膜型，能引起雞霍亂病的是莢膜A 型多殺巴氏桿菌，用金色葡萄狀菌在含0.1%血紅素的馬丁瓊脂平皿上劃線，然后將待檢菌株與葡萄球菌線垂直劃線，在37℃保溫箱中培養(yǎng)12～16h 后觀察，觀察要及時(shí)，若觀察過遲，則被抑制的菌又可生長(zhǎng)。

4.6 生化試驗(yàn)

多殺性巴氏桿菌能利用葡萄糖與蔗糖產(chǎn)酸，但不產(chǎn)氣，不溶血，在培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)。多殺性巴氏桿菌有一特點(diǎn)，在15～20℃的環(huán)境中存活時(shí)間比2～4℃時(shí)長(zhǎng)，可保存在普通冰箱內(nèi)，每?jī)芍軅鞔? 次，若在室溫保存則菌種易發(fā)生變異。

4.7 血清學(xué)檢查

血清學(xué)檢查對(duì)急性病雞沒有意義，對(duì)慢性病雞有一定意義，目前較常用的是瓊擴(kuò)試驗(yàn)。

（1）抗血清制備：可用12～16 周齡的公雞制備，將多殺性巴氏桿菌接種在用含0.1%血紅素的馬丁瓊脂上，37℃恒溫培養(yǎng)24h，用含0.3%福爾馬林的生理鹽水清洗，稀釋成每毫升含20億活菌的濃度，加礦物油乳化制成油乳劑抗原，用此抗原1ml接種于小公雞頸部皮下，3 周后放血，放血前一夜停喂飼料，分離出血清保存?zhèn)溆谩?/p>

（2）瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)抗原的制備：將多殺性巴氏桿菌的濃原菌液接種，37℃培養(yǎng)18～21h，用含0.3%福爾馬林的生理鹽水洗下菌苔，分裝入小試管內(nèi)，放100℃水浴鍋內(nèi)加熱1h，然后離心30min，上清液即可用作瓊擴(kuò)試驗(yàn)抗原。

（3）瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)：8.5%氯化鈉溶液中加入0.9%～1.0%瓊脂和0.01%硫柳汞，加熱融化后即為瓊擴(kuò)試驗(yàn)用瓊脂。用時(shí)將瓊脂加熱融化后冷至約46℃時(shí)，取6ml 放在25×75mm，玻片上或取1ml 放進(jìn)直徑9nm 平皿內(nèi)，瓊脂凝固后挖孔，孔徑為4mm，各孔與中央孔相距6mm，中央孔加抗原外圍孔加血清，玻片與平皿放進(jìn)有濕紗布的盒內(nèi)以防干燥，恒溫培養(yǎng)后有沉淀線者為陽性反應(yīng)。

5 防治措施

5.1 衛(wèi)生管理的預(yù)防

禽霍亂是由病雞或多殺性巴氏桿菌污染物接觸健康雞而引起發(fā)病。只要杜絕多殺性巴氏桿菌進(jìn)入雞舍，雞就不會(huì)發(fā)生禽霍亂病。

雞感染的主要來源有多個(gè)方面，主要為病雞或仍帶有病原菌的康復(fù)雞。病雞向外排菌，康復(fù)雞可在某些應(yīng)激因素（如飼料變動(dòng)、受寒等）影響下突然發(fā)病而向外大量排菌，健康雞被感染易發(fā)病，因此，不同來源的雞群混養(yǎng)很危險(xiǎn)，新引進(jìn)的后備雞應(yīng)放在一個(gè)與老雞完全隔離的環(huán)境中飼養(yǎng)，老雞淘汰出售后，雞舍需經(jīng)過徹底清洗和消毒，才可引進(jìn)新雞。飼養(yǎng)員和被污染的用具也有將病菌帶進(jìn)雞舍的機(jī)會(huì)，因此，在進(jìn)入雞舍前，飼料、用具和衣服等需進(jìn)行消毒，使病菌沒有進(jìn)入雞舍的機(jī)會(huì)。豬、狗、其他家禽和野生動(dòng)物等均可成為帶菌者而將病菌傳進(jìn)雞舍，因此，應(yīng)盡可能地防止其他動(dòng)物有接近雞群的可能性。

5.2 藥物治療和預(yù)防

抗生素對(duì)霍亂病的治療有不同程度的效果，療效成功與否取決于及時(shí)的治療和恰當(dāng)?shù)挠盟帲虼耍委熐皯?yīng)取用病死雞分離出的多殺性巴氏桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，篩選一種最佳藥物用于治療。

（1）抗生素：青霉素、鏈霉素等按治療劑量和療程用藥，若病菌無抗藥性時(shí)均可達(dá)到滿意的效果，但捉雞和注射過程麻煩。金霉素和土霉素按0.1～0.2%量混在飼料中，連續(xù)飼喂3～5d，也可達(dá)到較好效果。青霉素和鏈霉素混在飼料中投給則無效。

（2）磺胺類藥物：磺胺二甲基嘧啶、磷胺喹惡林和磺胺甲氧嗪等混在飼料中，含量為0.1%～0.5%，或混在飲水中，含量為0.04%～0.1%，連喂2～3d，有良好的療效。大劑量的磺胺連續(xù)飼喂會(huì)產(chǎn)生毒性，影響雞的生長(zhǎng)機(jī)能，降低劑量長(zhǎng)期服用。

任何一種藥物都不能長(zhǎng)期應(yīng)用，長(zhǎng)期應(yīng)用則療效降低需增加藥物用量，這將增加生產(chǎn)成本，同時(shí)可能引起雞中毒而導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降。因此，需經(jīng)常更換治療藥物，更換某種藥物前，需對(duì)候選藥物作敏感性試驗(yàn)。但藥物治療不徹底，往往在停止用藥后雞又發(fā)病。

治療病雞的同時(shí)，要及時(shí)清除死雞與糞便，徹底消毒雞舍、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)和用具，每天1 次。病雞舍鄰近雞群可用減半量的藥物進(jìn)行預(yù)防性投藥，以便控制疫情。若疫情不嚴(yán)重時(shí)，藥物治療量的1/10～1/4 可用于禽霍亂較長(zhǎng)期的預(yù)防[3]。

5.3 接種菌苗進(jìn)行預(yù)防

許多菌苗或疫苗血清型和免疫型一致，血清型不同，其免疫型也不同，但禽霍亂菌苗的情況則與此不同，當(dāng)用禽霍亂弱毒活菌苗免疫雞時(shí)，沒有血清型或免疫型之分，用任何一個(gè)禽霍亂弱毒活菌苗免疫均可抵抗不同血清型禽霍亂強(qiáng)毒菌株的攻擊，表現(xiàn)出血清型可以是多個(gè)，但免疫型只是1 個(gè)。如果用禽霍亂滅活菌苗免疫雞時(shí)，則出現(xiàn)另外一種情況，免疫雞只可抵抗與菌苗相同血清型強(qiáng)毒的攻擊，對(duì)不同血清型的強(qiáng)毒攻擊時(shí)，免疫雞死亡，表明菌苗無效。因此，使用滅活菌苗一定要與流行的禽霍亂強(qiáng)毒菌血清型一致才有效，二者血清型不一致，則菌苗無效。因此，滅活菌苗只能保護(hù)與菌苗相同的血清型強(qiáng)毒菌的攻擊，不能保護(hù)血清型不同強(qiáng)毒菌的攻擊。活菌苗則可以保護(hù)所有血清型強(qiáng)毒菌的攻擊。

（1）霍亂弱毒活菌苗：活菌苗有一共同的缺點(diǎn)是免疫期短，只有3 個(gè)月，且有一定毒力，在某些應(yīng)激因素下，有時(shí)會(huì)給雞群造成一定的損失，為避免發(fā)生這種意外損失，在雞群免疫前先用10 倍免疫量的活菌苗注射10～20 只雞，觀察3～5d，若雞無嚴(yán)重反應(yīng)，再對(duì)大群雞進(jìn)行免疫注射。

（2）禽霍亂滅活菌苗：禽霍亂滅活菌苗的優(yōu)點(diǎn)是安全，但其效果因制苗方法不同而有很大差別，存在免疫型問題，菌苗血清型必須與流行的禽霍亂強(qiáng)毒菌的血清型一致時(shí)才有效，否則免疫無效。目前，采用多種血清型的菌株混合制苗，禽霍亂血清多用于禽霍亂的短期預(yù)防，在長(zhǎng)途運(yùn)輸家禽時(shí)，皮下或肌肉注射2ml 血清，有效預(yù)防期為10d 左右。

6 結(jié)論

禽霍亂病是家畜常見傳染病之一，在實(shí)踐養(yǎng)殖中應(yīng)堅(jiān)持預(yù)防為主的原則，做好衛(wèi)生管理、藥物治療、接種疫苗，有效降低家畜感染禽霍亂病的概率，減少禽霍亂病給養(yǎng)殖戶帶來的經(jīng)濟(jì)損失。