血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF對早發型重度子癇前期的預測價值*

羅 敏，徐曉都，王 維，周 雋

1.成都市龍泉驛區第一人民醫院/四川大學華西醫院龍泉醫院檢驗科，四川成都 610100；2.成都市龍泉驛區婦幼保健院檢驗科，四川成都 610100；3.成都市龍泉驛區第一人民醫院/四川大學華西醫院龍泉醫院產科，四川成都 610100

早發型重度子癇前期(EOSP)可反映孕周與妊娠結局的關系，以及胎盤存在的分子水平的差異，EOSP發病越早，病情越嚴重，母嬰并發癥越多，預后越差[1]。既往研究顯示，孕早期胎盤功能受損會引起子癇前期，而EOSP作為嚴重的表型之一，多因胎盤源性的大量損傷因子進入血液而導致[2]。血管內皮生長因子(VEGF)是血管內皮細胞特異性的肝素結合生長因子，可誘導新生血管的生成，在胎盤血管生成、分化等方面起著重要作用。血小板反應蛋白(TSP-1)可作用于胚胎發育及血管形成。目前研究表明，子癇前期孕婦的TSP-1及VEGF水平均存在異常變化，即TSP-1水平升高[3-4]，VEGF水平降低[5-6]；但也有部分研究顯示，TSP-1水平降低，VEGF水平升高，且與缺氧刺激有關[7-8]。本研究通過分析TSP-1、VEGF水平及TSP-1/VEGF對EOSP的預測價值，以期為EOSP的臨床診斷提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年8月至2020年8月成都市龍泉驛區第一人民醫院/四川大學華西醫院龍泉醫院(下稱本院)收治的38例EOSP孕婦作為病例組，同期門診產檢的40例孕28～33+6周健康孕婦為對照組，收集病例組不良妊娠結局相關指標(新生兒出生體重、Apgar 1 min評分等)。另選取同期在本院行孕中期唐氏篩查并最終在本院分娩的90例孕婦為驗證組，其中妊娠結局為EOSP的30例孕婦為EOSP組，正常分娩的60例孕婦為非EOSP組。納入標準：(1)年齡20～45歲；(2)孕28～33+6周；(3)單活胎妊娠；(3)病例組符合謝幸等主編的《婦產科學》第9版EOSP的診斷標準。排除標準：(1)雙胎或多胎妊娠；(2)有糖尿病、高血壓、腎病、冠心病等并發癥，以及研究外其他產科并發癥；(3)孕期曾服用阿司匹林、鈣離子拮抗劑、抗菌藥物。病例組與對照組年齡、孕周、孕次等一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)；病例組體質量指數(BMI)高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 病例組和對照組一般資料比較

1.2方法 病例組在入院當天抽取空腹肘靜脈血5 mL，室溫靜置1 h后3 000 r/min離心10 min，分離血清，標記后放入-80 ℃冰箱保存。對照組在門診采血中心收集當天離心后的空腹靜脈血血清500 μL放入-80 ℃冰箱低溫保存。驗證組為本院產前診斷中心實驗室保存的行孕中期唐氏篩查孕婦的血清。用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測各組VEGF及TSP-1水平。試劑盒購自Bio-Swamp公司(貨號：HM10057、HM100868)。

2 結 果

2.1兩組血清TSP-1、VEGF水平及TSP-1/VEGF比較 病例組血清TSP-1水平、TSP-1/VEGF高于對照組，病例組血清VEGF水平低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.001)。見表2。

表2 病例組和對照組血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF水平比較

2.2血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF對EOSP的預測價值 ROC曲線分析結果顯示，血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF均對ESOP有一定預測價值，對應截斷值分別為2.44 ng/mL、319.21 pg/mL、9.13，且TSP-1/VEGF比VEGF、TSP-1單獨檢測預測價值稍高。見表3和圖1。

表3 血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF對EOSP的診斷價值

圖1 血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF診斷EOSP的ROC曲線

2.3血清TSP-1、VEGF、TSP-1/VEGF與不良妊娠結局的相關性分析 相關性分析顯示，血清TSP-1與VEGF呈負相關(r=-0.265，P<0.001)，與新生兒出生體重、Apgar 1 min評分、Apgar 5 min評分呈負相關(r=-0.588、-0.621、-0.593，均P<0.001)，血清VEGF與新生兒出生體重、Apgar 1 min評分、Apgar 5 min評分呈正相關(r=0.728、0.700、0.712，均P<0.001)，血清TSP-1/VEGF與新生兒出生體重、Apgar 1 min評分、Apgar 5 min評分呈負相關(r=-0.817、-0.834、-0.823，均P<0.001)。

2.4EOSP組與非EOSP組血清TSP-1、VEGF、TSP-1/VEGF比較 驗證組中，EOSP組TSP-1水平高于非EOSP組，VEGF水平低于非EOSP組，TSP-1/VEGF高于非EOSP組，差異均有統計學意義(P<0.001)。見表4。

表4 EOSP組與非EOSP組血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF水平比較

3 討 論

EOSP通常在孕34周前發病，易引起嚴重的并發癥，如胎盤早剝、肺水腫及心力衰竭等，從而造成胎兒宮內窘迫、死亡和低出生體重兒等情況，嚴重威脅母嬰生命安全。為了改善母嬰結局，在整個妊娠期對患者進行有效識別、管理及干預等尤為重要[9-10]。因抗血管生成因子與促血管生成因子比值失衡會導致子癇前期的發生，其中TSP-1可發揮抗血管新生、調節內皮細胞功能的作用[11]，VEGF可參與血管重構、滋養細胞浸潤等過程，有助于刺激內皮細胞的增殖、遷移[12]。本研究中，孕婦血清TSP-1水平與VEGF水平呈負相關(r=-0.265,P<0.001)。REDMAN[13]研究提出，孕8～18周是胎盤形成的關鍵時期，HOFFMAN等[14]研究表明，在孕早中期給予小劑量阿司匹林，可有效改善孕婦胎盤病理、生理情況，預防EOSP的發生。

TSP-1是TSPs家族的5個成員之一，可調節VEGF生物活性，通過CD36和Fyn誘導細胞凋亡，抑制血管內皮細胞遷移和增殖，通過CD36和CD47抑制一氧化氮(NO)通路[15]，起到抗血管新生作用。本研究結果顯示，病例組血清TSP-1水平高于對照組，提示EOSP患者血清TSP-1升高可加重EOSP的發生和發展，與范徐妃等[4]研究中早發型子癇前期(EOPE)患者血清及胎盤組織TSP-1水平升高一致。而ULU等[7]研究顯示，PE患者血清TSP-1水平明顯降低。本研究認為，EOSP組和非EOSP組血清TSP-1水平存在差異的可能原因有：(1)TSP-1的相對分子質量較大，結構功能復雜，其受體多樣化，使之在不同狀態及結構下與不同受體結合，發揮不同的作用；(2)妊娠發病機制的內在差異較大。VEGF有助于發揮誘導抗凋亡蛋白Bcl-2表達、抑制血管內皮細胞凋亡、上調促衰變因子表達及保護血管內皮細胞的作用[16]。本研究中，EOSP組患者血清VEGF水平明顯低于非EOSP組(P<0.001)，這與ADU-BONSAFFOH等[5]研究結果類似，提示血清VEGF水平的降低可能會促進EOSP的發生、發展。但劉曉丹[17]的研究結果顯示，在缺氧的情況下VEGF水平也會升高。此種差異的原因可能在于：(1)游離VEGF能更準確地反映有效循環VEGF，因檢測方法的差異導致了結果的不同；(2)不同研究中妊娠病理發生機制的差異性導致了研究結果的差異；(3)機體在缺氧狀態下會引起代償性VEGF水平的升高。

本研究結果顯示，TSP-1/VEGF對EOSP的預測價值比VEGF或TSP-1單獨檢測稍高，分析作用機制可能是：TSP-1-CD47信號軸抑制VEGF和VEGF受體2(VEGFR2)的活化，抑制VEGF介導的血管內皮細胞的增殖，以及VEGFR2下游的AKT或Src蛋白激酶，從而抑制了新生血管的形成。

目前關于TSP-1水平與妊娠不良結局的相關性的研究較少。SOUZA等[18]研究表明，通過改善循環中NO和VEGF水平可減輕對低出生體重新生兒內皮祖細胞數量和功能的不利影響。本研究結果顯示，TSP-1與新生兒出生體重、Apgar 1 min和Apgar 5 min評分呈負相關(r=-0.588、-0.621、-0.593，均P<0.001)，而血清VEGF與新生兒出生體重、Apgar 1 min和Apgar 5 min評分則呈正相關(r=0.728、0.700、0.712，均P<0.001)，血清TSP-1/VEGF與新生兒出生體重、Apgar 1 min評分、Apgar 5 min評分呈負相關(r=-0.817、-0.834、-0.823，均P<0.001)，提示血管生成因子與抗血管生成因子的失衡可造成嚴重的圍生結局，TSP-1水平升高可能是胎兒生長發育的危險因子，VEGF水平升高可能是胎兒生長發育的促進因子。同時，本研究還發現，隨著BMI增加，孕婦患EOSP的風險可能升高。

有研究顯示，妊娠期高血壓孕婦的血清TSP-1水平高于健康孕婦，且TSP-1水平越高，不良妊娠結局風險越大[19]。胡建文等[20]結果發現，子癇前期與健康產婦孕早期、孕中期的血清TSP-1水平差異無統計學意義(P>0.05)。本研究結果發現，在驗證組中，EOSP組血清TSP-1水平高于非EOSP組(P<0.05)，提示血清TSP-1水平在孕中期可用于預測EOSP的發生。本研究結論與胡建文等[20]研究的結論存在差異，因此，TSP-1在EOSP孕婦與同孕周健康孕婦的表達情況是否存在差異仍需進行大樣本、前瞻性研究證實。

綜上所述，TSP-1/VEGF對預測EOSP具有較高的診斷價值，在孕中期可能對預測EOSP有一定的意義，但此結論仍需大數據、多中心、前瞻性研究進一步驗證。