六萬林場八角茴香油和莽草酸含量分析與莽草酸提取工藝研究

黃夢嬌 符韻林 柳國海 李區寧

（1.廣西大學林學院 廣西南寧 530004；2.廣西國有六萬林場 廣西玉林 537000）

八角是八角屬木蘭科植物，是中國南方地區的珍貴樹種之一，成熟的八角果實在人們生活中用處比較大，是我國重要的藥食同源物質[1-3]。一般情況下，秋季的八角果實產量比較高、果實大而飽滿，質量也好；春季的八角果實一般品質比較差、果實瘦小、產量也比較低[4]。廣西是八角的原產地和主產區，種植面積已達 36.6萬 hm2，占全國的85%以上。廣西玉林市的八角年產量約7萬t，占全國的一半以上，已發展成為全國最大的八角原料市場。位于玉林市的廣西國有六萬林場總的經營林地面積大，達到 85.13萬畝（1畝≈667 m2），場內的林地面積達到22.91萬畝；其中八角種植用地面積達到6.28萬畝，占整個場內規劃的林地面積的27.41%，是玉林乃至全國八角原料的重要產地。因此有了“廣西八角看玉林，玉林八角看六萬”的說法。目前六萬林場建設有一條年產100 t莽草酸的生產線，所有的廠房、倉庫、生產線等都是按照標準化進行建設，每年可以加工八角干果約2 000 t，預計每年可生產莽草酸100 t、茴香油140 t和八角粉1 600 t。通過挖掘八角的最佳潛能和最大經濟效益，可有效發揮林場土地資源的實際價值，促進林業第二、第三產業的發展，同時促進林場職工種植八角的熱情，真正造福于廣大職工群眾，使八角真正成為職工的搖錢樹、綠色銀行寶庫。

基于六萬林場八角深加工項目研究，弄清場內不同生長環境、季節及干燥處理等對八角莽草酸和茴香油含量及品質的影響，使用水蒸汽蒸餾法同步提取八角茴香油和莽草酸，采用高效液相色譜法（HPLC）檢測八角浸提液中莽草酸含量、氣相色譜法檢測茴香油的主要成分含量[5-6]。本研究結果為種植戶采摘及處理八角提供一定的指導意見，以得到更高含量的茴香油和莽草酸；此外，還可為車間生產采購八角提供一定的理論依據，以便得到高得率的莽草酸生產原料，促進八角深加工產業的良性發展，提高八角的附加值。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品八角果采摘于六萬林場的忠東分場、河嵩分場、寧康分場和鐵驢分場等4個分場。不同生長時間的八角果采摘于六萬林場的東山分場；不同干燥處理方式的八角果（春果和秋果）采摘于六萬林場河嵩分場。

1.1.2 試劑磷酸（色譜級），成都市科隆化學品有限公司；莽草酸標品（色譜級），廣西六萬山生物科技有限公司實驗室；水為實驗室自制的純凈水。

1.1.3 主要儀器電子調溫電熱套（98-1-B），天津市泰斯特儀器有限公司；超聲波清洗器（KQ-250B），天津市泰斯特儀器有限公司；加熱恒溫鼓風干燥箱（DHG-9036A），上海精宏實驗設備有限公司；高效液相色譜儀（LC-20A），日本島津；氣相色譜儀（gc2014），日本島津。

1.2 方法

1.2.1 樣品處理將4個分場八角果及不同采摘時間的八角果分別以四分法混合后置于烘干機中，于80℃下烘9 h，得到樣品干果。干燥方式設置：A（曬干）：將八角鮮果稱重后平鋪在地面上，置于太陽底下曬干；B（70℃烘干）：將八角鮮果混合均勻置于托盤中，并放進烘干機里面，以70℃烘11 h，得到樣品干果；C（80℃烘干）：將八角鮮果混合均勻后置于托盤中，并放進烘干機，以80℃烘9 h，得到樣品干果；D（100℃烘干）：將八角鮮果混合均勻后置于托盤中，并放進烘干機，以100℃烘5 h，得到樣品干果。

1.2.2 茴香油提取及檢測將稱取八角干果50 g，捏碎后放入1 000 mL的圓底燒瓶中，加入350 mL水，攪拌混勻，加熱回流2.5 h；回流結束后取出茴香油，重復上述操作；將2次所得的茴香油混合，稱重，裝入玻璃瓶中，存放于陰涼、干燥處，待測[7-9]。

茴香油含量計算公式：

其中：m為提取的茴香油的質量，g；M為八角干果的質量，g。

1.2.3 莽草酸提取及檢測將提取茴香油的 2次水溶液混合在一起，待混合液體冷卻至室溫后裝進1 000 mL的容量瓶，并用純凈水定容至1 000 mL；搖勻并吸取1 mL溶液置于100 mL的容量瓶中，用娃哈哈瓶裝純凈水稀釋至刻度，搖勻，配成樣品溶液；用一次性針吸取部分樣品溶液，經0.45 μm微孔濾膜過濾，作為樣品溶液，待測。

莽草酸含量計算公式：

式中：C為莽草酸提取液濃度，g/mL；V為提取液體積，g；稀釋倍數為100；M為八角干果的質量，g。

1.2.4 浸提液靜置時間對八角莽草酸含量的影響將提取出來的4個分場八角浸提液置于燒杯中，貼好標簽，每隔1、3、6、9、11 d分別抽樣檢測液體中的莽草酸含量，分析其含量變化差異。

1.2.5 標準溶液的配制采用電子分析天平稱取莽草酸對照樣品0.051 9 g（莽草酸對照樣品由六萬林場廣西六萬山生物科技有限公司車間自己生產，并且經過廣西分析測試研究中心檢驗鑒定，純度為 99.6%）；采用瓶裝的娃娃哈純凈水將莽草酸對照樣品溶解后移入容量瓶，并定容到100 mL，配成0.519×10-3g/mL的莽草酸標準溶液。

1.2.6 標準曲線的繪制用移液管準確吸取莽草酸標準溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 mL，分別移入 100 mL容量瓶，用娃哈哈純凈水定容至100 mL，配成待測樣液；再采用1 mL的微量進樣針吸取各濃度待測樣液 20 μL，分別進樣，重復進樣3次，測定高效液相色譜峰的峰面積平均值；以標準溶液的濃度為橫坐標，標準品的峰面積平均值為縱坐標，并以液相色譜峰的峰面積對對照品的量進行回歸，計算得出回歸方程為

Y=6E+10x+40 797，線性系數R2=0.999 6（圖1）。

圖1 莽草酸的標準曲線

1.2.7 最佳優化試驗條件通過考察料液比[八角和水的體積比（g/mL），即 1∶6、1∶8、1∶10]、浸提時間（4、6、8 h）、浸提溶劑來源（純凈水、石和鄉鎮自來水、玉林市區自來水）、浸提溫度（80、90、100℃）對八角春果和秋果莽草酸含量的影響，比較其工藝性能，進一步優化出最佳的試驗條件。

1.2.8 色譜及條件液相色譜法：LC-20A高效液相色譜儀，色譜柱CO-1000（155 mm×125 mm×510 mm）；流動相為甲醇：0.1%的磷酸水溶液（98∶2）；檢測波長201 nm，流速0.95 mL/min，柱溫35.8℃，檢測時間20 min，進樣量20 μL，外標法定量。

氣相色譜法：色譜柱HP-5（30 m×0.25 mm×0.25 μm），初溫 60℃，保持 1 min；以 5℃/min升至160℃，保持4 min；以5℃/min升至210℃，保持5 min，載氣為氮氣；進樣口溫度250℃，檢測器溫度280℃；進樣量0.1 μL，分流比50∶1，面積歸一化法定量。

2 結果與分析

2.1 八角茴香油及茴腦含量的測定

2.1.1 不同分場的八角茴香油及茴腦含量由圖2可看出，4個分場的茴香油含量存在一定的顯著性差異，河嵩分場和寧康分場的差異性不顯著，可能是河嵩分場和寧康分場相距較近的原因。忠東分場的茴香油含量最高，達到4.6%；河嵩分場和寧康分場含量相近，分別為 4.1%、3.93%；最低是鐵驢分場，為 3.29%。就采摘時間和采摘樹齡而言，在八角果完全成熟前采摘的茴香油含量會較高。

圖2 不同分場的茴香油含量

通過對茴香油的主要成分茴腦進行檢測可知，4個分場的茴腦含量也是存在一定的顯著性差異，河嵩分場和寧康分場的差異性不顯著（圖3），顯著性變化與茴香油一致。忠東分場的茴腦含量仍然是最高的，為 4.53%。由此可見，茴香油高的分場，其主要成分茴腦含量一般也較高，而且這 4個分場的茴腦含量都高于 3%。研究表明，不同產地的茴香油和茴腦含量都存在差異，八角茴香油中茴腦含量大于88%，其凍點超過15℃，即符合優油的產品標準[10]。本實驗的4個分場茴腦含量占茴香油90%以上，說明這幾個分場的茴香油達到優油的產品標準。

圖3 不同分場的茴腦含量

2.1.2 不同采摘時間對八角果對茴香油含量及其主要成分含量的影響分別對不同生長時間的八角茴香油含量進行測定，并用氣相色譜法測定茴香油主要成分的含量。八角茴香油的含量及其主要成分檢測結果如圖4、5所示。由圖4可知，這幾個采摘時間的八角茴香油含量存在差異，含量最高的是10月9日采摘的果實，為5.16%；其次是10月19日采摘的，為4.74%，8月11日采摘的茴香油含量最低，為 3.10%。由此可見，進入到10月后，八角果較為成熟。8—10月期間，茴香油含量在一定范圍內呈現上升的趨勢。相關研究表明，八角茴香油的含量與季節性的降雨量有關，6—8月茴香油含量較低，9—11月茴香油含量較高，這是因為6—8月降雨量較大，9—11月降水量較少，從而引起茴香油含量的差異[11]。廣西六萬林場地區7—8月份也是屬于多雨的季節，八角果的生長也比較快，果實含水量多，因此茴香油沒有得到很好地積累，加上此時的秋果成熟度不高，保留下來的春果又過于成熟，茴香油被分解或者揮發出去，所以8月份的茴香油含量相對較低。到了9月下旬至10月份進入秋季，此時的降雨量大大減少，八角果的生長速度也降低，果實含水量降低，因此茴香油能得到很好地積累，加上此時八角秋果的成熟度較高，所以茴香油的含量會增大。但是隨著八角果成熟度的增加，茴香油揮發或者發生分解，導致果實中茴香油含量下降。

圖4 不同采摘時間的八角茴香油含量

由圖5可知，不同生長時間的茴腦含量存在顯著性差異，顯著性差異比較明顯的是9月中下旬至10月中下旬。不同采摘時間的八角茴香油所含的茴腦含量平均在 3.69%以上，茴腦含量最高的是10月9日采摘的，為4.94%，最低是9月19日采摘的，為2.47%。

圖5 不同采摘時間的茴腦含量

有研究表明，八角枝葉的茴香腦含量會隨著月份的變化而產生變化[11]。本研究表明，不同采摘時間八角果所含的茴腦含量存在差異，與上述枝葉的研究結果相對一致。在8月至9月上旬的時候，八角果實不成熟，嫩果的含水量高，果內組織含量不足，此時的茴腦含量較低。到了 9—10月，八角果實逐漸成熟，果實內所積累的茴腦含量也會增加。說明八角果里面所含的茴香油和茴腦含量變化相對一致，都與果實的成熟度有關。對八角茴香油含量進行單因素方差分析，如表2所示。

由表2可知，各個采摘時間的八角茴香油含量的組間差異F值等于20.087，通過查表得知F（7,23）=2.45，因為組間的F值大于Fa，所以拒絕零假設，即8月11日、8月21日、8月31日等這幾個采摘時間的八角茴香油含量在a=0.05的水平上存在顯著性差異。因為這幾個生長時間內，降水量不同、八角果成熟度不同，其所含的茴香油也隨著成熟度的變化而變化。

表2 單因素方差分析不同生長時間八角果茴香油含量結果

組間均方（1.876）遠遠大于組內均方（0.039），由此也可以說明，八角茴香油含量的變異是由不同生長時間引起的，這是因為八角果在幼齡時期、半成熟期、成熟期、衰老期對茴香油存儲能力不同。果實達到成熟期時，其茴香油含量會隨之增加，但是果實過于成熟時，茴香油會有所揮發，或者被分解，從而出現含量下降的趨勢。

2.1.3 不同干燥處理方式對茴香油含量的影響將河嵩分場的八角春果和秋果，按照不同干燥處理方式，提取其中的八角茴香油并檢測含量，同時檢測其中茴腦含量，結果如圖6、7所示。由圖6可知，相同的干燥處理方式上，100℃烘干方式春、秋果茴香油含量相差不大；在不同干燥處理方式上，八角茴香油的含量差異較大。春果中，不同處理方式的茴香油含量差異性較顯著，在100℃烘干下，八角茴香油含量最高，為 5.15%，最低是80℃烘干，含量為3.16%；這是因為在100℃烘干處理下，八角果比較脆，水蒸氣蒸餾時容易把果實中的茴香油提取出來，而春果曬干過程受春天的天氣影響，曬干時間比較長，加上晚上收回去堆積，在這些處理過程中茴香油有所揮發。秋果中，不同處理方式的茴香油含量差異不太顯著，茴香油含量最高是70℃烘干，含量為4.11%，最低是曬干這個干燥方式，含量為 3.57%；這是因為秋果飽滿，含水量比較多，曬干、80℃烘干和100℃烘干的時候，大量水分快速揮發，帶走部分茴香油。有研究表明，烘干法的揮發油含量較高、水分含量較低是因為烘干時間短而引起的差異[12]。在一定程度上，烘干處理過的八角茴香油含量比曬干的高，估計是因為曬干時需大面積平鋪在曬場上，茴香油揮發面積大，進而導致茴香油含量下降。針對不同的八角春果、秋果，需采取不同的干燥處理方式來提取茴香油。

圖6 不同干燥處理的茴香油含量

同時對茴香油的主要成分茴腦含量進行檢測，發現八角春果和秋果的這幾種處理方式中，茴腦含量最高的是春果100℃烘干，為5.11%（圖7），茴腦含量最低的是秋果 70℃烘干這個處理方式，為 3.70%。這幾種處理方式中八角茴香油的茴腦含量都比較高，普遍在3%以上，說明以上干燥處理方式提取的油雜質較少。

圖7 不同干燥處理的茴腦含量

2.2 八角莽草酸含量測定

2.2.1 不同分場八角莽草酸含量由圖8可知，這4個分場的莽草酸含量具有一定顯著性差異，寧康分場和鐵驢分場的差異不顯著。莽草酸含量最高的是河嵩分場，為9.22%；其次是忠東分場，為 8.40%。引起莽草酸含量不一樣的原因可能是這幾個分場的氣候條件、土壤情況和樹齡不一樣。對于不同地點的八角莽草酸含量差異的研究認為，引起差異的原因是海拔、緯度、立地條件和采摘果實的成熟度等不同[13]。本研究中的4個分場地理位置相距不大，海拔、緯度應該不是引起差異的主要原因。河嵩分場靠近六萬大山森林公園，氣候溫暖，濕度合適，土壤里的腐殖質含量高，土質較為疏松，加上河嵩分場是廣西國有六萬林場的舊總部，職工對八角種植管理到位，并在八角林下發展養雞產業，土壤肥力得到提高，因此八角樹長勢好、八角果品質較好，八角果所含的莽草酸含量高。忠東分場的職工也在八角林下養雞，土壤肥力也較好，八角林樹齡較低，大概在20 a，八角林的產量高，所含的莽草酸僅次于河嵩分場。八角的品種不一樣也是莽草酸含量差異比較重要的原因，六萬林場的八角品種多，河嵩分場、忠東分場和鐵驢分場主要以大紅八角為主。有研究表明，大紅八角的莽草酸含量高，樹體高大，枝葉較茂密，單株產量高，果實較大且分布均勻，壽命和結果期長，利用價值大。此外，坡向也有影響，坡位不同，水熱與土壤條件均有差異；中下坡八角長勢好，產量亦高，因此坡度也是影響八角生長的重要因子。寧康分場和鐵驢分場雖然也靠近六萬森林公園，但其八角林的坡位處于中上坡，水熱與土壤條件較差，其果實的莽草酸含量較低。

圖8 不同分場的莽草酸含量

對 4個分場的八角莽草酸含量進行單因素方差分析，結果見表3。由表3可知，組間的F統計量為215.204，通過查表得知F（3，11）= 3.59，因為組間的F值大于Fa，所以拒絕零假設，即說明4個分場的莽草酸含量在a=0.05的水平上存在顯著性差異。

表3 四個分場八角果莽草酸含量單因素方差分析結果

組間均方（14.645）大于組內均方（0.068），說明不同分場八角果莽草酸含量的變異是由分場之間種植管理方式、品種和坡向等因素不同所引起。這4個分場的八角品種比較多，比較優良的品種有柔枝淡紅花八角、柔枝紅花八角和柔枝白花八角，這是發展生產的主要八角品種；因此，八角品種不同，其所含的莽草酸含量也有所差異。對種植戶來說，選擇品種優良的八角進行種植，更容易管理；對于生產來說，要想得到高含量的莽草酸，則可以選擇河嵩分場或者忠東分場的八角果實進行提取。

2.2.2 浸提液靜置時間對莽草酸的含量影響將4個分場所浸提出來的浸提液置于燒杯中，每隔幾天抽樣檢測其液體的莽草酸含量，結果如圖9所示。由圖9可知，在不同的靜置時間下，八角浸提液的莽草酸含量存在一定的差異性，但差異不是太明顯。莽草酸含量隨著靜置時間的延長而出現降低的趨勢，這可能是八角浸提液中也含有八角渣和其他活性成分，隨著時間的延長，液體里面的八角渣所含的雜質發生反應，莽草酸轉化成其他物質，還有一些活性物質因發生反應而分解部分莽草酸，導致莽草酸含量降低。雖然莽草酸含量下降幅度不大，但是對于工廠大批量的生產來說會造成較大的流失。因此，在生產莽草酸的時候，應及時把浸提出來的八角液體上吸附柱進行吸附，以減少不必要的浪費。

圖9 不同浸提液靜置時間的莽草酸含量變化

2.2.3 不同采摘時間對莽草酸含量的影響分別對不同采摘時間的八角莽草酸含量進行測定，檢測結果如圖10所示。由圖10可知，不同采摘時間八角莽草酸含量有所變化，存在一定的顯著性差異。八角莽草酸含量最高的是在10月9日采摘，含量最低是9月9日采摘，其他采摘時間采摘的八角莽草酸含量普遍在7%左右。關于不同季節的八角莽草酸含量研究，春季、夏季和秋季3個季節的莽草酸含量兩兩對比，都存在顯著性差異，季節性引起的莽草酸含量差異是由于兩造果發育的時間長短引起的，還與不同緯度、不同海拔和不同營養管理水平有關[14]。本研究只對秋季果實進行研究，與上述研究有一定的相似之處。不同生長時間的莽草酸含量隨著生長時間不同而呈現不同的變化，原因主要是八角一年四季花果不離枝，花期較長，落果率高，六萬林場職工對八角林經營管理水平較高，八角常年處于營養豐富狀態，加上最近氣候反常等原因，春果占的比例有所增多，8月11日期間，還保留部分成熟的春果，因此莽草酸含量也比較高；隨著生長時間的延長，春果慢慢成熟，秋果又沒達到完全成熟，果內的組織含量較少，所以在8月11日之后莽草酸含量有所降低；到了10月9日左右，八角秋果達到生理成熟的最佳狀態，八角果內的莽草酸含量增加，之后又隨著果實成熟度的加大而下降，可能是過于成熟的八角里所含的物質對莽草酸有一定的分解作用。

圖10 不同采摘時間的八角莽草酸含量

2.2.4 不同干燥處理方式對莽草酸含量的影響八角春果和秋果在不同干燥處理下，莽草酸含量如圖11所示。由圖11可知，幾種干燥處理方式的莽草酸含量有所區別。就春果而言，莽草酸含量最高的處理方式是曬干，為 7.52%；春果含量最低的是70℃烘干，含量為5.77%。但對于秋果來說，莽草酸含量最高的是100℃烘干處理方式，含量為9.58%；其次是80℃烘干，含量為9.46%。這是因為八角果經過高溫處理后，更容易將其中的莽草酸提取出來。不管何種干燥處理方式，八角秋果的莽草酸含量都高于八角春果。在八角深加工的時候，可以選擇采購八角秋果作為生產原材料，并采用80℃烘干或者100℃烘干的處理方式。80℃烘干和 100℃烘干的八角莽草酸含量差異不大，但 100℃烘干時間短，效率高，烘干后的八角果容易脆化，因而不易保存其完整度。由此可見，要根據實際情況選擇干燥處理方式和烘干溫度，以便達到既節能又提高莽草酸得率的目的。

圖11 不同干燥處理方式的八角莽草酸含量

春果、秋果不同干燥處理方式的莽草酸含量方差分析結果（表4）顯示，春果和秋果都具有顯著性差異。八角樹是花果同存的樹種，春果是由上一年的花所結的果，春果（小造果）比較瘦小，秋果（大造果）肥大飽滿，質量好，所以其所含的莽草酸含量較春果高。

表4 八角春果、秋果不同處理方式的莽草酸含量方差分析結果

通過查表可知，F0.05（3,11）=3.59，因為春果和秋果中的F值都大于F0.05（3，11），故八角春果、秋果在不同干燥處理方式下的八角莽草酸含量存在顯著性差異。說明不同干燥處理方式的八角莽草酸含量也是不同的，干燥處理方式對八角果內的組織破壞程度不同，導致提取莽草酸的容易程度不同，所以干燥溫度不同，莽草酸含量也有所不同。

2.2.5 八角春秋季節不同部位的莽草酸含量對春季和秋季的八角不同部位的莽草酸含量進行檢測，結果如圖12所示。由圖12可知，八角不同部位的莽草酸含量具有顯著性差異。八角不同季節、不同部位的莽草酸含量不同，秋季的莽草酸含量高于春季。從不同部位上看，八角果實的莽草酸含量最高，其中春果為3.02%；其次是枝葉，為2.29%；八角桿的含量最低，為1.50%。由此認為，八角果實是莽草酸生產的最佳原料。在實際的生產過程中，如果八角果實原料充足，企業可以把八角果實作為莽草酸的主要生產原料；當八角果原料十分匱乏時，可以利用八角枝葉來彌補原料的不足，以便更好地利用八角葉的資源。

圖12 不同部位的莽草酸含量

2.3 八角果莽草酸提取工藝的優化試驗

通過單因素試驗設計，優選出最佳的料液比(g/mL)、提取時間（h）、浸提溶劑來源和浸提溫度（℃），按照正交試驗要求設計了四因素三水平的L9（34）正交試驗（表5），即對料液比（A）1∶6、1∶8、1∶10，提取時間（B）4、6、8 h，浸提溶劑來源（C）純凈水、石和鄉鎮自來水、玉林市區自來水；浸提溫度（D）80、90、100℃進行試驗，進一步優化八角莽草酸的提取條件。

表5 正交試驗因素水平

測定不同提取工藝條件下的莽草酸含量，八角春果、秋果的莽草酸含量的正交試驗結果見表6、7。由表6可知，水蒸氣蒸餾法提取八角春果的莽草酸正交試驗中，4個因素的主次順序為RD＞RC＞RB＞RA，說明浸提溫度（D）對八角果莽草酸提取有比較顯著的影響，料液比的影響效果不明顯，因此浸提溫度（D）是影響八角莽草酸含量的重要因素。

再根據平均值K值進行分析，得出八角春果中，A2比 A1、A3好，B3比 B1、B2好，C1比 C2、C3好，D2比 D1、D3好。整個試驗最佳組合工藝條件為A2B3C1D2。

由于 A2B3C1D2不在表6中，因此根據A2B3C1D2再進行試驗，得出此組合條件下，八角春果的莽草酸含量為 7.92%，高于表6中的莽草酸最高含量（7.81%）。因此，八角春果的整個實驗最佳組合工藝條件為 A2B3C1D2，即料液比為1∶8，浸提時間為8 h，浸提溶劑來源為純凈水，提取溫度為90℃。

表6 八角春果提取莽草酸的正交試驗結果

由表7可知，水蒸氣蒸餾法提取八角秋果莽草酸的正交實驗中，4個因素的主次順序為RD＞RB＞RC＞RA。由此可知，浸提溫度（D）和浸提時間（B）對八角秋果莽草酸含量具有顯著的影響。

再根據平均值K值進行分析，得出在八角秋果中，A3比 A2、A1好，B2比 B1、B3好，C1比C2、C3好，D2比 D1、D3好。因此，八角秋果的整個實驗最佳組合工藝條件為A3B2C1D2。

由于A3B2C1D2也不在表7中，因此需要根據A3B2C1D2再進行實驗，得出在此組合條件下，八角秋果的莽草酸含量為 9.54%，低于表7中的莽草酸最高含量（9.63%）。因此，八角秋果的整個實驗最佳組合工藝條件為A3B3C1D2，即料液比為1∶10，浸提時間為8 h，浸提溶劑來源為純凈水，提取溫度為90℃。

表7 八角秋果提取莽草酸的正交試驗結果

3 討論與結論

3.1 討論

不同分場的八角茴香油和莽草酸含量差異的原因有可能是八角品種、林區的栽培條件、坡向、水熱條件、土壤條件和大小年不同等因素造成八角果的品質不一樣，從而導致八角茴香油和莽草酸含量的差異亦很明顯。八角種植戶在種植八角的時候，可以對八角茴香油和莽草酸含量低的八角林加強管控，多施有機肥，改善土壤條件，提高八角林的長勢。生產上若以八角莽草酸為指標，可以選擇莽草酸含量高的河嵩分場或忠東分場進行采購，以提高八角莽草酸的生產得率。

不同生長時間的八角茴香油和莽草酸含量也存在顯著性差異，這和八角果的成熟度有關，過早或者過晚采收，會因八角果內的組織含量不足、揮發或者被分解而導致含量降低[12]。因此從采摘時間上考慮，在10月中旬左右采摘的八角果所含茴香油含量更高。生產上若以高得率的莽草酸為主，則選擇在10月9日左右采摘，可以提高生產得率，獲得更多的經濟效益。

干燥處理方式對八角茴香油和莽草酸含量的影響程度是不同的。對于八角春果，應采取的處理方式為 100℃烘干后提??；對于八角秋果，應該采用70℃烘干后提取，這樣所得到的茴香油含量較高。有關學者采用GC測定微波火力60%烘干、曬干、光波烘干和陰干處理的茴腦含量，結果顯示，各處理無明顯差異[15-16]。本研究結果與上述研究有一定的差異，估計處理方法存在差異，而且八角春果和秋果受干燥溫度和干燥方式的影響較大，不管是烘干還是曬干，干燥處理過程中，茴香油都會有一定程度揮發，只是揮發程度不同而已。而不同干燥處理方式下，八角秋果的莽草酸含量都高于春果，這與熊燕子[17]和袁經權等[18]得出的實驗結論一致。因此，在進行八角深加工時，若想得到更高含量的莽草酸，應該選擇八角秋果。

對八角提取工藝進行研究得出，八角春果和秋果的最佳條件不同。因此在進行生產時，可以把收購的八角春果和秋果分開保存，并選取不同的條件進行提取，即得到高含量的莽草酸。

3.2 結論

本研究中發現，八角品質受品種、氣候條件、成熟度、處理溫度等因子的影響，不同條件下獲得的八角茴香油和莽草酸含量存在顯著性差異；過早或者過晚采摘八角都不利于茴香油和莽草酸的提??；生產上若以茴香油為主，最好用春果，而且不宜高溫處理八角果；生產若以莽草酸為主，最好用秋果，高溫處理八角果更容易提取。研究結果可為八角采摘、處理以及生產上選擇八角原材料提供一定的理論依據。

水蒸汽蒸餾法提取的八角水溶液中，同時含有其他成分物質，如原兒茶酸、原兒茶醛、兒茶素和沒食子酸等。下一步擬將這些水溶物質提取出來，并測定其含量，以便更充分地利用八角所含有效成分，為生產上獲取更多的經濟效益提供理論依據。