血清高爾基體蛋白73聯合AFP、AFU對診斷AFP低水平原發性肝癌的價值分析*

閆 圓 李小全

河南大學第一附屬醫院檢驗科，河南省開封市 475001

原發性肝癌是臨床常見的惡性腫瘤，發病率和死亡率均居高不下，嚴重影響患者生命健康[1-2]。血清甲胎蛋白(Alpha fetoprotein，AFP)是臨床常用于診斷原發性肝癌的標志物，但有15%～30%的早期原發性肝癌患者因癌病灶體積較小、癌組織液化壞死程度較低，使AFP表達呈低水平狀態(AFP<200ng/ml)，使此類人群應用AFP、AFP-L3等輔助診斷時靈敏度、特異度下降[3-5]。為此，尋找AFP低水平原發性肝癌的早期診斷指標對該疾病患者的早期干預具有重要意義。α-L-巖藻糖苷酶(α-L-Fucosidase，AFU)是一種水解酶，是原發性肝癌診斷的新腫瘤標志物[6]。高爾基體蛋白73(Golgi protein 73，GP73)是一種跨膜蛋白，在肝臟損傷、炎性反應、癌病灶等表達升高[7]。GP73、AFP、AFU等均常用于原發性肝癌診斷之中，但原發性肝癌患者的AFP表達水平是否影響上述指標的診斷效能相關研究報道罕見。本研究以60例AFP低水平原發性肝癌患者作為研究對象，探討GP73、AFP、AFU單一診斷和聯合診斷對該疾病的診斷效能，以期為臨床早期發現和干預此類患者提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取我院2018年2月—2020年1月收治的AFP低水平的原發性肝癌患者、肝臟良性疾病患者和健康體檢者,各60例，分別作為AFP低水平肝癌組(n=60)、肝臟良性疾病組(n=60)和對照組(n=60)。AFP低水平肝癌組男35例，女25例；年齡47～67歲，平均年齡(55.75±5.33)歲。肝臟良性疾病組男33例，女27例；年齡51～70歲，平均年齡(55.93±5.10)歲；疾病類型：肝硬化13例、慢性乙型肝炎43例、慢性丙型肝炎4例。對照組男37例，女23例；年齡47～73歲，平均年齡(55.37±5.82)歲。本研究經我院倫理委員會批準，所有患者及家屬均知情同意。

1.2 入選標準 納入標準：原發性肝癌患者符合《原發性肝癌的診療規范(2017)》[8]診斷要求，且血清10ng/ml

1.3 方法 從我院自制的《原發性肝癌診斷效能分析相關數據記錄表》中收集三組患者的性別、年齡、肝臟良性疾病組疾病類型、GP73、AFP、AFU等指標情況。所有患者均晨起空腹采血5ml，3 000r/min離心10min得血清，采用酶聯免疫吸附法測定三組患者血清GP73水平(參考范圍：GP73<150ng/ml)；采用微粒子酶聯免疫法測定三組患者血清AFP水平(參考范圍：AFP<20ng/ml)；采用化學閉塞速率法測定三組患者血清AFU水平(參考范圍：11.3U/L

1.4 統計學方法 采用SPSS21.0軟件處理數據。采用F檢驗分析三組正態性、方差齊性的計量資料差異；采用LSD-t檢驗分析組間差異；繪制GP73、AFP、AFU以及聯合診斷的ROC曲線，分析指標的診斷效能；采用Delong檢驗分析指標診斷效能的差異，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組GP73、AFP、AFU水平變化情況 AFP低水平肝癌組GP73、AFP水平均高于肝臟良性疾病組和對照組，組間比較差異顯著(P<0.05)；AFP低水平肝癌組AFU水平高于對照組，組間比較差異顯著(P<0.05)；AFP低水平肝癌組與肝臟良性疾病組AFU水平差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 三組GP73、AFP、AFU水平變化情況

2.2 GP73、AFP、AFU診斷AFP低水平原發性肝癌的診斷效能 聯合診斷的準確度為87.78%，靈敏度為82.76%，特異度為90.16%，曲線下面積為0.892(0.791～0.953)。經Delong檢驗發現，聯合診斷的診斷效能高于GP73、AFP、AFU單獨診斷效能，差異具有統計學意義(Z=-2.810、-2.577、-2.371，P<0.05)，見表2、圖1。

表2 GP73、AFP、AFU診斷AFP低水平原發性肝癌的診斷效能

圖1 GP73、AFP、AFU診斷AFP低水平原發性肝癌的ROC曲線圖

3 討論

早期原發性肝癌因疾病病灶體積、液化及患者自身因素等影響，使該疾病部分患者血清AFP表達水平低于200ng/ml，導致AFP、AFU等原發性肝癌特異性指標診斷效能下降。本研究中，AFP、AFU的靈敏度分別為67.16%、54.93%，均處于較低水平，提示臨床應用AFP、AFU診斷AFP低水平原發性肝癌患者發生漏診、誤診的可能性較高，影響臨床醫師判斷患者具體肝臟疾病進展情況的準確性，使患者錯失早期診斷時間[11-12]。為此，尋找更為靈敏的指標診斷AFP低水平原發性肝癌具有重要意義。

GP73是一種跨膜蛋白，在各類肝炎病毒感染、肝炎肝硬化、肝損傷等影響下，其擴散進入患者血循環，進而導致表達升高，是臨床常用于診斷原發性肝癌的特異性指標。粟勁松等[13]對40例原發性肝癌患者血清谷氨酰轉肽酶(Glutamyltranspeptidase，GGT)、GP73、AFP進行分析，發現GP73診斷原發性肝癌準確率達75.0%，AFP準確率為70.0%，兩者聯合診斷的準確率高于單一診斷。郭鴻雁等[14]研究表明，GP73診斷原發性肝癌的靈敏度為78.5%、特異度為88.8%、準確度為81.6%，均高于AFP單一診斷效能。本研究也證實上述結論，發現GP73診斷效能均高于單一AFP、AFU診斷，提示GP73對AFP低水平原發性肝癌的診斷效能較好，更適用于AFP低水平原發性肝癌患者的臨床診斷，但GP73診斷的最佳臨界值以及混雜因素校正方法探討等仍需進一步大樣本、多中心研究。

本研究發現，AFP低水平肝癌組GP73、AFP水平均高于肝臟良性疾病組和對照組，AFU水平高于對照組，符合原發性肝癌的生物學特征[15]，并提示GP73、AFP、AFU升高對AFP低水平原發性肝癌診斷具有提示性作用。本研究發現，GP73聯合AFP、AFU診斷AFP低水平原發性肝癌的診斷效能高于單一使用GP73、AFP、AFU的診斷效能，提示聯合診斷能互補各指標的不足，改善單一指標靈敏度、特異度、準確度等一項或多項指標無法滿足臨床的局限，減少漏診、誤診的發生，也表明AFP低水平原發性肝癌患者需多項指標同時監測，以減少AFP、AFU等單一指標的應用局限，避免患者錯失早期診斷時間，利于患者的康復。

綜上所述，GP73聯合AFP、AFU能提高AFP低水平原發性肝癌診斷效能，對臨床診斷此類疾病具有指導意義，本研究下一步將擴大樣本量，借鑒國外多因素分析在ROC曲線的應用，減少年齡、性別、疾病進展等對診斷效能的影響，進一步驗證GP73聯合AFP、AFU診斷AFP低水平原發性肝癌的可靠性。