五倍子單寧酸凝膠對仔豬生長性能、血液生化指標及免疫指標的影響

陳亞強，彭津津

（重慶三峽職業學院，重慶 404100）

隨著國內禁止在畜禽生產中添加促生長類飼料添加劑以來，其替代品研究受到越來越廣泛的關注，如何制備能提高動物生產性能、增強免疫力的替代品是畜牧業健康發展亟待解決的問題。五倍子是我國傳統中藥，占世界總產量的95%，其最多的活性成分為單寧酸（GTA），具有顯著的抗氧化、抗炎癥、抗病毒、抗腫瘤和改善腸道微生態環境等多種作用（茍昌勇，2021）。近年來，國內外多個研究表明，以GTA作為飼料添加劑能提高動物生產性能及免疫力水平（童玉鑫等，2022）。此外，五倍子對口腔疾病有多方面功能，由此制成五倍子凝膠有利于口腔保健（劉玉梅和徐靜舒，2017）。因此，本試驗以斷奶仔豬為研究對象，探討前期研制的GTA凝膠對仔豬生長性能、血液生化指標及免疫指標的影響，以期為GTA凝膠作為新型添加劑在動物養殖中的應用提供理論支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 GTA購自西安西奧生物科技有限公司，水解單寧酸含量為50%；28日齡斷奶仔豬（杜×長×大）購自重慶萬州德康農牧科技有限公司；牙齦卟啉單胞菌（ATCC33277）、具核梭桿菌（ATCC23276）由華南農業大學提供；牛心腦浸液肉湯購自Sigma公司。

1.2 凝膠制備 將N-甲基吡咯烷酮、三乙酸甘油酯按7∶3配成混合溶劑，加入35%濃度的聚乳酸-羥基乙酸共聚物，靜置，待完全溶解后加入GTA，攪拌均勻，制成含GTA終末濃度為80 g/kg的凝膠，常溫避光，連續緩慢攪拌5 d，4℃避光保存。

1.3 試驗設計 制備終濃度為8%的GTA凝膠；采用單因素完全隨機試驗設計，將72頭體重相近健康斷奶仔豬分為4組，每組3個重復，每重復6頭豬（公母各半），分別為空白組（不飼喂凝膠），對照組（飼喂空白凝膠），凝膠1組（GTA凝膠300 mg/kg·bw），凝膠2組（GTA凝膠600 mg/kg·bw），均在采食后飼喂給仔豬。試驗周期28 d。

參照NRC（2012）豬營養需要和《中國飼料成分及營養價值表》（2018）設計玉米-豆粕型基礎飼糧，營養水平參考發表文獻（茍昌勇，2021；鄧文等，2018）。

1.4 飼養管理 在重慶和厚農牧發展有限公司進行動物試驗。試驗豬均在同一圈舍，每個重復組在同一欄，圈舍通風采光良好，每日上午7：30（使用凝膠）、11：00和下午 2：00、7：30（使用凝膠）進行4次飼喂，向采食后仔豬口腔注入終濃度為8%的GTA凝膠，自由采食飲水。按照常規操作進行飼養管理，每日觀察豬群健康。

1.5 測定指標

1.5.1 生長性能 在試驗開始前和結束當天清晨，空腹稱重試驗豬，記錄初重、末重，并記錄日耗料量，計算平均日增重、平均日采食量和耗料增重比，具體公式如下：

平均日增重=（末重－初重）/試驗天數；

平均日采食量=耗料量/（試驗天數×試驗頭數）；

耗料增重比=耗料量/增重；

1.5.2 血液生化指標 試驗結束時，每個重復選取中等體重的3頭豬，采血10 mL，3 000 r/min離心10 min，-20℃保存，試劑盒測定血清中總蛋白、總膽固醇、尿素氮、血糖等指標。

1.5.3 免疫指標 ELISA法測定上述血清的IgA、IgM、IgG、IFN-γ、IL-1。

1.5.4 體外抑菌試驗 取牙齦卟啉單胞菌、具核梭桿菌菌株分別接種于牛心腦浸液肉湯培養基，37 ℃ 厭氧（80%N2、10%H2、10%CO2）培 養 48 h，將細菌密度調整為1.5×108CFU/mL，均勻涂布培養基，厭氧培養48 h。

將濾紙裁制成大小相同圓片，分別滴加GTA凝膠、生理鹽水、2%洗必泰，放置于3個上述制備的培養基，37℃厭氧培養4 d，測抑菌圈直徑。

1.6 數據統計與分析 采用SPSS 21.0進行單因素方差分析，采用Duncan’s法進行多重比較，數據結果以“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示組間差異顯著。

2 結果

2.1 對仔豬生長性能的影響 由表1可知，凝膠1組和凝膠2組能顯著提高仔豬日增重和平均日采食量（P＜0.05），凝膠2組能顯著降低耗料增重比（P ＜ 0.05）。

表1 GTA凝膠對仔豬生長性能的影響

2.2 對仔豬血清生化指標的影響 由表2可知，凝膠1組能顯著降低血漿BUN濃度（P＜0.05），凝膠2組能顯著提高血漿TP濃度（P＜0.05）、極顯著降低血漿BUN濃度（P＜0.01）；對血漿TC、GLU濃度無顯著影響（P＞0.05）。

表2 GTA凝膠對仔豬血清生化指標的影響

2.3 對仔豬免疫指標的影響 由表3可知，凝膠1組能顯著提高血漿IgA、IgM、IgG濃度（P＜0.05）；凝膠2組能顯著提高血漿IgA、IgG、IFN-γ濃度（P＜0.05），極顯著提高血漿IgM濃度（P＜0.01），極顯著降低血漿IL-1β濃度（P＜ 0.01）。

表3 GTA凝膠對仔豬免疫指標的影響

2.4 體外抑菌試驗結果 由表4可知，GTA凝膠對牙齦卟啉單胞菌的抑菌圈大小為2.9 mm，對具核梭桿菌的抑菌圈大小為3.5 mm。

表4 GTA凝膠體外抑菌試驗結果 mm

3 討論

凝膠制備飼料是目前仔豬飼料的發展趨勢之一（Miriam等，2012）。本研究制備的GTA凝膠在采食后直接注入口腔，主要考慮仔豬采食特點及口腔護理兩方面需求。

單寧是單胃動物的“抗營養因子”，能抑制動物生長（鄭翠玲，2022）。但近幾年研究表明，日糧添加GTA具有改善動物生長性能、調節腸道菌群及免疫促進作用（Huang Q等，2018）。胡成等（2021）按照0.1%添加單寧酸至仔豬日糧，測得70日齡體重增加7.46 kg，且腹瀉率顯著降低。李建光等（2021）研究發現，五倍子單寧酸能顯著提高仔豬日增重，且顯著優于氧化鋅，并能減少腹瀉，提高仔豬生長性能。本研究發現，凝膠2組不僅能顯著提高仔豬日增重和平均日采食量，且能顯著降低耗料增重比。

血液生化指標具有指示機體健康的作用，如TP反映蛋白質吸收、TC反映脂代謝、BUN反映了腎臟代謝、GLU反映糖代謝。宋妍妍等（2021）研究發現，0.51%的五倍子單寧酸添加能損傷仔豬肝臟，0.1%則無影響。鄭翠玲（2022）研究發現，飼喂五倍子提取物能顯著提高仔豬血液總蛋白和球蛋白濃度，顯著降低尿素氮濃度。本研究同樣證實五倍子單寧酸對仔豬肝臟代謝有促進作用，且使用劑量對仔豬肝臟無損害。

當機體受到抗原侵入時，IgG、IgA、IgM發揮著重要的免疫防御功能（Cheng Y等，2020）。解湧芳（2022）研究表明，添加2%或4%的單寧酸能使綿羊IgA、IgG、IgM含量顯著提高。IL-1β是一種促炎細胞因子，可加劇炎癥反應。IFN-γ是抗炎因子，若IL-1β濃度降低、IFN-γ濃度提高能反映免疫應答增強（范秋麗等，2022）。童玉鑫等（2022）研究表明，GTA顯著增加脾臟IFN-γ的mRNA表達，從而提高免疫應答。范秋麗等（2022）在研究發現，添加250 mg/kg和500 mg/kg五倍子提取物能顯著提高空腸分泌型免疫球蛋白A和IFN-γ含量，且顯著降低IL-1β、IL-8和TNF-α濃度。本研究的兩個試驗組均能顯著提高血漿IgA、IgM、IgG濃度，且凝膠2組能顯著提高血漿IFN-γ濃度，極顯著提高IgM濃度，極顯著降低血漿IL-1β濃度，由于IFN-γ和IgM多在脾臟生成，因此，凝膠2組是否能增強脾臟功能有待于進一步研究。

本研究以2%洗必泰作為陽性對照，發現GTA凝膠對牙齦卟啉單胞菌和具核梭桿菌均有較好的抑菌效果，可同時作為預防口腔疾病的藥物使用。

4 結論

GTA凝膠可有效提高仔豬生長性能、代謝水平和免疫能力，最佳使用量為600 mg/kg·bw，且具備一定的預防口腔疾病作用。