白細胞分類人工鏡檢與全自動血細胞分析儀檢驗結(jié)果比較

于奇 李曉勇

血常規(guī)屬于臨床檢驗中較為重要的檢驗技術(shù)之一,主要是通過對血細胞數(shù)量變化及形態(tài)分布進行檢驗,以此更好的判斷血液狀況及疾病情況。隨著檢驗方法的現(xiàn)代化、自動化發(fā)展,現(xiàn)階段血常規(guī)檢驗一般是通過機器完成的［1］。血常規(guī)包括紅細胞計數(shù)(RBC)、血紅蛋白(Hb)、白細胞(WBC)、白細胞分類及血小板(PLT)等,在臨床中一般分成三大系統(tǒng),即紅細胞系統(tǒng)、白細胞系統(tǒng)和血小板系統(tǒng)。傳統(tǒng)的人工顯微鏡鏡檢屬于常用的白細胞分類手段,但具有檢驗步驟繁瑣、檢驗操作費時費力等不足［2］,近年來已經(jīng)被不斷發(fā)展的全自動血細胞分析儀替代,其能有效降低檢驗工作的強度,但臨床中對于全自動血細胞分析儀的檢驗結(jié)果存在較大爭議,檢驗過程及結(jié)果極易受到多種因素的影響,使得結(jié)果出現(xiàn)較大偏差［3］。因此,在血常規(guī)檢驗中有效的檢驗手段顯得尤為重要,為了對比白細胞分類人工鏡檢和全自動血細胞分析儀的檢驗結(jié)果,本院展開了針對性研究。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2020 年7 月～2021 年3 月本院檢驗科50 例體檢健康者作為參照組,其中男26 例,女24 例；年齡最大73 歲,最小25 歲,平均年齡(45.41±3.69)歲。選擇同期門診進行血常規(guī)檢驗的110 例患者作為研究組,其中男58 例,女52 例；年齡最大75 歲,最小23 歲,平均年齡(45.40±3.75)歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。研究組中單核細胞百分比為20%左右的患者50 例,其首診疾病：疑似貧血5 例,抑郁癥10 例,精神分裂癥9 例,發(fā)熱待查12 例,躁狂癥5 例,阿爾茨海默癥5 例,焦慮癥4 例。所有研究對象均對本次研究的目的、內(nèi)容、形式和結(jié)果詳細了解并均已簽署知情同意協(xié)議；本次研究均在本院倫理委員會審批下通過。

1.2 方法 全自動血細胞分析儀為日本希Sysmex XN -1000 血細胞分析儀,采用河北鑫樂醫(yī)藥生產(chǎn)的EDTA-K2真空抗凝管；人工鏡檢染色采用瑞氏-姬姆薩染液,采用Qlympus CX31 光學(xué)顯微鏡進行操作。

1.2.1 人工鏡檢 將抗凝血作為血液樣本制備血涂片,給予瑞氏-姬姆薩染色,對均勻分散、顏色適中和展開程度較好的體尾交接處白細胞實施分類檢驗。選擇2 張血片,一張分類100 個白細胞,選擇平均值,在顯微鏡下仔細分辨淋巴細胞、中性粒細胞、單核細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞等各類細胞,對是否存在異常表現(xiàn)、幼稚細胞及其他非正常細胞進行觀察和記錄。

1.2.2 全自動血細胞分析儀 通過EDTA-K2真空抗凝管采集3 ml 的靜脈血作為血液樣本,并保證采集血液樣本避免出現(xiàn)溶血和凝集等現(xiàn)象。輕輕混勻8 次后放置在溫室內(nèi)存儲,采用Sysmex XN -1000 全自動血細胞分析儀進行檢驗,全部檢驗操作應(yīng)在2 h 內(nèi)完成。在全自動分析儀操作檢驗的過程中,Sysmex XN-1000 血細胞分析儀報警內(nèi)容包括：有核細胞、核左移白細胞、原始細胞、幼稚細胞、原始淋巴細胞、異型淋巴細胞等。人工鏡檢復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)：嗜酸性粒細胞百分比＞6.5%,嗜堿性粒細胞百分比＞1.5%,淋巴細胞百分比＞65%,中性粒細胞百分比＞85%,2.0×109/L＜白細胞計數(shù)＜2.5×109/L。

1.3 觀察指標(biāo) 對比參照組白細胞分類人工鏡檢與全自動血細胞分析儀結(jié)果,研究組單核細胞20%左右患者白細胞分類人工鏡檢與全自動血細胞分析儀結(jié)果；白細胞分類人工鏡檢結(jié)果與儀器報警提示結(jié)果。白細胞分類人工鏡檢結(jié)果與儀器報警提示結(jié)果：靈敏度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%；特異度=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%；陽性預(yù)測值=真陽性/(真陽性+假陽性)×100%；陰性預(yù)測值=真陰性/(真陰性+假陰性)×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS27.0 統(tǒng)計學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 參照組人工鏡檢與全自動血細胞分析儀白細胞分類結(jié)果對比 參照組人工鏡檢與全自動血細胞分析儀檢驗的淋巴細胞、單核細胞及中性粒細胞百分比對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；參照組人工鏡檢檢驗的嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞百分比均低于全自動血細胞分析儀,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 參照組人工鏡檢與全自動血細胞分析儀白細胞分類結(jié)果對比(±s,%,n=50)

表1 參照組人工鏡檢與全自動血細胞分析儀白細胞分類結(jié)果對比(±s,%,n=50)

注：與全自動血細胞分析儀對比,aP＜0.05

2.2 研究組單核細胞20%左右患者人工鏡檢與全自動血細胞分析儀白細胞分類結(jié)果對比 研究組110 例患者中單核細胞20%左右50 例,研究組單核細胞20%左右患者人工鏡檢與全自動血細胞分析儀檢驗的中性粒細胞、嗜酸粒細胞、單核細胞百分比對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)；研究組單核細胞20%左右患者人工鏡檢檢驗的淋巴細胞、嗜堿粒細胞百分比低于全自動血細胞分析儀,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 研究組單核細胞20%左右患者人工鏡檢與全自動血細胞分析儀白細胞分類結(jié)果對比(±s,%,n=50)

表2 研究組單核細胞20%左右患者人工鏡檢與全自動血細胞分析儀白細胞分類結(jié)果對比(±s,%,n=50)

注：與全自動血細胞分析儀對比,aP＜0.05

2.3 研究組人工鏡檢白細胞分類結(jié)果與儀器報警提示對比 以人工鏡檢白細胞分類結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn),全自動血細胞分析儀報警54 例,經(jīng)人工鏡檢復(fù)查確定真陽性47 例。全自動血細胞分析儀的靈敏度為82.46%(47/57),特異度為86.79%(46/53),陽性預(yù)測值為87.04%(47/54),陰性預(yù)測值為82.14%(46/56)。見表3。

表3 研究組人工鏡檢白細胞分類結(jié)果與儀器報警提示結(jié)果(n)

3 討論

血常規(guī)指標(biāo)是臨床較為常見的敏感指標(biāo),能較大程度反映患者機體內(nèi)病理改變,在檢驗過程中又以白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白和血小板等指標(biāo)最具有參考價值,患者在病因不明時可以做血常規(guī)檢驗,方便臨床醫(yī)生對患者的身體狀態(tài)、疾病情況等作為判斷［4,5］。此外,血常規(guī)檢驗還是臨床醫(yī)生評估藥物、手術(shù)等治療方案的治療效果,是否可以用藥或停藥,是否需要繼續(xù)治療或停止治療,疾病是否存在復(fù)發(fā)或痊愈等的重要標(biāo)準(zhǔn)［6］。

傳統(tǒng)的人工顯微鏡鏡檢屬于臨床中較為常見的白細胞分類法,但這一操作費時費力、步驟繁瑣,近期來多數(shù)綜合性醫(yī)院已經(jīng)開始用全自動血細胞分析儀替代了傳統(tǒng)的人工顯微鏡鏡檢,全自動血細胞分析儀能最大程度降低血常規(guī)檢驗的工作強度,但臨床對其結(jié)果是否準(zhǔn)確仍有爭議［7］。全自動血細胞分析儀 Sysmex XN-1000 融合了激光技術(shù)和電阻抗法,將核酸熒光染色和半導(dǎo)體流式激光技術(shù)更好的結(jié)合在一起,能有效對全血細胞計數(shù)和白細胞進行分類診斷,有效減輕了檢驗人員的工作強度,提高了臨床檢驗的準(zhǔn)確性及工作量,但實際操作過程中極易受到多種因素的影響,使結(jié)果產(chǎn)生偏差［8］。全自動血細胞分析儀有效融合了電阻抗體、流式細胞及半導(dǎo)體激光等技術(shù)手段,通過半導(dǎo)體激光技術(shù),能顯著改善儀器設(shè)備的啟動速度,延長儀器設(shè)備的使用壽命,使得儀器消耗更少的功率。通過較先進的核酸熒光染色、流式激光原理等使白細胞計數(shù)不會受到血小板簇、巨大血小板、難溶紅細胞、細胞碎片的干擾,在對低值白細胞樣本的檢驗過程中,儀器能通過人工和自動方式轉(zhuǎn)換至低值白細胞模式,使得白細胞檢驗顆粒數(shù)量相對于普通檢驗?zāi)Ｊ絹碚f增加4 倍左右,提高檢驗的準(zhǔn)確性［9］。該儀器還能對關(guān)節(jié)腔液、腦脊液、胸腹水等體液實施紅細胞計數(shù)和白細胞計數(shù)檢驗。白細胞分類通過激光光源、細胞核酸熒光染色技術(shù)與流式原理等技術(shù),最大程度提高了檢驗的準(zhǔn)確性及效率,減輕了檢驗人員的工作強度［10］。但在平常的檢驗工作中,特別是大體量標(biāo)本的檢檢中,對于存在異常現(xiàn)象的標(biāo)本完全通過儀器檢驗,會導(dǎo)致疾病誤診和漏診現(xiàn)象的出現(xiàn),這主要是由于全自動血細胞分析儀在白細胞分類計數(shù)及全血細胞分析過程中,在巨大血小板、單核細胞、幼稚細胞、原始細胞、異型淋巴細胞、有核紅細胞等形態(tài)在分辨診斷中存在不足,從而無法很好的分類,使得假陽性和假陰性現(xiàn)象的出現(xiàn)［11,12］。

綜上所述,在臨床檢驗過程中應(yīng)始終以白細胞分類人工鏡檢為金標(biāo)準(zhǔn),全自動血細胞分析儀所得的白細胞分類結(jié)果準(zhǔn)確,但無法完全取代人工鏡檢,對存在異常的檢驗標(biāo)本應(yīng)將人工鏡檢與全自動血細胞分析儀診斷相結(jié)合,從而提高臨床診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性,為臨床疾病的確診、治療方案的制定提供有力參考。