犬皰疹病毒感染治療分析

劇春鴿

皰疹病毒為帶包膜的DNA病毒，種類多達70多種。犬皰疹病毒最早在1965年在美國報道，之后在美洲、歐洲、南非等地區均有發現，以全身敗血性為特征，屬于致死性疾病。仔犬感染犬皰疹病毒后，死亡率較高，從發病到死亡通常不超過48h，將給養殖場帶來較大經濟損失。成年犬感染后癥狀不明顯，但將導致生殖系統病變，可能引起母犬流產、死胎和不育，給犬類繁殖帶來了較大威脅。

一、臨床癥狀

2021年12月，畜主攜帶2頭黑貝幼犬至當地獸醫院就診，根據敘述可知家養黑貝，母犬，2歲，產第1胎共計6頭幼犬，產仔后1周2頭幼犬突然死亡，現有2頭幼犬出現精神沉郁癥狀。經檢查確認幼犬為10日齡，體重650g，體溫達 37.1～37.3℃，心率為110～115次/min，呼吸速率為25～30次/min。幼犬四肢、鼻端等處觸摸發涼，出現流涎、嘔吐、流漿液性鼻涕等癥狀，呈現出呼吸困難等呼吸系統癥狀。幼犬食欲減退，排便為黃綠色水樣糞便。此外，患病犬無法正常活動，按壓腹部發出呻吟。從胸部X射線檢查結果來看，帶有彌散性肺間質，為病毒性肺炎特征，但血常規顯示血清球蛋白比例增加17%～20%，伴有血清谷丙轉氨酶增高和血小板減小情況。皮下注射30～50ml葡萄糖氯化鈉注射液和4mg維生素K3后，注射20萬單位青霉素和鏈霉素，但3h后1頭幼犬死亡，另1頭出現蛙泳等中樞神經癥狀。

二、病理變化

對死亡幼犬進行剖檢，能夠發現肺、肝、腎等位置被膜和皮質下存在出血點，分散有針尖、麥粒大小灰白色壞死灶，腎臟下出現圓形出血斑。肺臟出現明顯水腫，為鮮紅色，存在纖維性壞死灶。脾臟腫大，壞死灶周圍存在包涵體。支氣管帶泡沫樣血液，胃腸漿膜下出血且局部壞死，胸、腹腔內有帶血漿液，大腦存在壞死性腦炎變化。

三、診斷分析

在疾病診斷階段，可知感染犬皰疹病毒后典型特征為突然發病，1～3周齡幼犬感染后多在24h內死亡，能夠觀察到吮乳減少、腹瀉、流涕等癥狀，少數口腔或生殖器帶有囊皰，不存在發熱癥狀。從犬皰疹病毒的病理變化特征來看，肺臟、腎臟、胃腸道等處將發生明顯出血和局灶性壞死病變，伴有淋巴結、脾臟腫大現象。中樞神經系統也可能發生病變，表現為腦實質附近出血、壞死，臟器壞死區還會出現小的包涵體。因此結合患病犬臨床表現和病死犬病理變化，初步判斷為感染犬皰疹病毒。少數犬眼部發生病變，出現單核細胞浸潤等現象。在臨床上，感染犬皰疹病毒和犬傳染性肝炎的癥狀區分較難。從病理變化上來看，感染犬皰疹病毒通常不會引發膽囊水腫，但患有肝炎將引發膽囊病變情況。考慮到犬皰疹病毒潛伏期為4～6d，剩余幼犬同樣存在患病風險，且感染犬皰疹病毒與犬傳染性肝炎等存在相似之處，需進一步進行實驗室診斷。

在實驗室診斷階段，使用組織切片進行熒光抗體檢查為可靠的診斷方法，而想要確診需取病死犬肝臟、肺部等病料進行病毒分離與鑒定。取病變組織制作涂片，開展熒光抗體染色試驗，能夠發現大量熒光病毒抗原。對病毒進行分離鑒定，取病料組織研磨，按照1∶10比例使用DMEM培養液進行培養，在-20℃條件下反復凍融3次。經過高速離心10min后取上層清液，使用0.22μ濾膜進行過濾后，在冷藏室中存儲，后續用于病毒鑒定。使用犬腎傳代細胞MDCK和含10%胎牛血清的DMEM培養基，在37℃的恒溫培養箱中進行細胞培養，24h后細胞開始出現圓縮、變暗情況，48h后開始陸續出現脫落現象，細胞干接種后則出現病變時收毒現象。采用TakaRa公司核酸提取試劑盒進行PCR鑒定，按照說明書提取細胞DNA后進行PCR反應。通過電泳凝膠成像觀察，能夠發現犬皰疹病毒基因片段。經過測序對比后，確認存在CHV的gD基因序列。通過基因同源性分析，確認毒株基因和犬皰疹病毒同源率高達99.9%，最終確診為感染犬皰疹病毒。

四、發病機理

一個物體在內河航道漂移，受到水流和風力的作用，假設在一定時間Δt內漂移速度相對穩定，那么物體的位置從tn時刻到tn+1時刻的更新為

Firstly,the Cumulative Distribution Function(CDF)for the stored N observations are computedbased on the law of total probability.

考慮到1頭幼犬處于發病狀態，其余幼犬也存在發病風險，需要對犬皰疹病毒發病機理展開分析，做到科學進行疾病防治。分析病原可知該病毒基本形態特征與皰疹病毒相同，細胞核內未成熟病毒粒子直徑在90～100nm之間，無囊膜。而胞漿內為成熟病毒粒子，帶有囊膜，直徑在115～175nm之間，病毒核心為星形或十字形。從DNA堿基來看，G+C含量僅33%，通常皰疹病毒為50%左右。該病毒不耐熱，缺乏酸抵抗力，對動物紅細胞無凝集性。開展交叉中和試驗，確認病毒擁有唯一血清型，但各種毒株毒力不同。采用敏感分子診斷學技術，不僅可以對癥狀明顯的患病犬進行診斷，也能對感染病毒但無癥狀的犬進行診斷。

從病毒傳播情況來看，犬皰疹病毒對脂類溶劑和多數消毒劑敏感，無法在宿主體外存活，需要通過親密接觸傳播。病毒將在犬鼻、咽喉等位置的黏膜和上皮細胞中增殖，并經過唾液、尿液等途徑排出，通過呼吸道、消化道傳播。初次感染病毒后的犬將大量排毒，通過口腔、鼻、陰道分泌物等傳播給易感染的動物，經歷過臨床或亞臨床癥狀后將變為隱性感染犬，排毒較少，不會持續較長時間。對于未感染過該病毒的新生幼犬容易引發急性感染，母犬感染后帶毒和排毒時間較長，也可能將病原傳給胎兒或幼犬，發病后表現為全身性疾病。

在疾病確診后，考慮到幼犬感染犬皰疹病毒后通常較難治愈，發現后需要立即隔離和及時治療，并采取防控措施避免其他犬感染。針對發病初期的犬和剩余犬，需要通過腹腔注射1～2ml高效價血清預防感染，并發揮緩解臨床癥狀的作用。對病癥明顯的犬，肌肉注射2ml的5%恩諾沙星，并混合肌肉注射250mg的維生素B12和1ml維丁膠性鈣。在病情嚴重情況下，為防止繼發性感染，使用0.9%氯化鈉補液，靜脈輸入雙黃連抗病毒藥物，并口服解毒敏、嗎啉胍等藥物。每日用藥2次，連續2d用藥后，發現患病犬癥狀明顯減輕，其他犬并未出現感染犬皰疹病毒的癥狀。繼續用藥2d后，患病犬食欲增加、大便成形，3d后確認已經痊愈。治療期間需要將發病犬放在溫度稍高環境中，溫度達35℃，濕度在45%～55%之間，減輕癥狀。確認母犬無癥狀，抽取50ml血液制作血清，為幼犬注射，按照3次/d頻率注射，連續注射3d實施血清或球蛋白預防注射。幼犬的免疫力較低，在患病治療期間應加強護理，達到提高治愈率的目標。具體來講，就是需要做好防寒保暖工作，避免幼犬因受冷空氣刺激而出現病情加重問題。將幼犬放入保溫箱飼養，應飼喂容易消化的羊奶、米糊等富有營養的食物，并每天進行環境消毒，使用廣譜消毒劑及時殺滅皰疹病毒、冠狀病毒等各種病毒，確保幼犬盡快恢復機體抵抗力。此外，需要加強犬舍內外消毒，利用氯制劑、火堿水等進行環境消毒，降低幼犬感染概率。

五、治療方案

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病毒可以在犬的多種細胞中增殖，尤其是新生犬腎臟，適宜溫度為36℃。從病毒流行的特點來看，2周齡左右幼犬由于免疫機能不全，缺乏抵抗力，并且因為體溫偏低，適宜病毒增殖，因此容易感染該病毒。而隨著幼犬年齡增長，體溫隨之升高，因此3～4周齡幼犬感染后癥狀較輕，死亡率較低，癥狀以打噴嚏、流涕等為主，經過2周后可以痊愈，但可能出現中樞神經癥狀，繼而喪失飼養價值。5周齡以上幼犬感染概率明顯下降，感染后癥狀輕微，不容易被察覺，但將給生殖器官和呼吸道黏膜帶來侵害。成年犬較少感染該病毒，且感染后癥狀不明顯。而妊娠母犬和老年犬、病弱犬等因抵抗力下降可能感染犬皰疹病毒，但具有一定自限性，經過4～5d后能夠自行痊愈。母犬感染疾病后，引導黏膜將出現血斑、淤血等癥狀，嚴重時將引起流產、死胎等癥狀。而公犬感染疾病后，將發生包皮炎，患病處分泌物增多。年老犬患病將出現鼻炎、結膜炎等癥狀。

六、討論分析

通過上述分析可知，犬皰疹病毒屬于急性傳染病，對1～2周齡犬來講具有較高致死率，對于日齡達到20d以上的幼犬來講多表現為上呼吸癥狀。而母犬和公犬感染疾病，可能引發繁殖系統疾病，給犬類繁殖帶來不利影響，因此同樣應及時診斷、治療和防控。

實驗組35人（92.11%）對教學模式滿意，與對照組27人（72.97%）相比，差異有統計學意義（P＜0.05）。實驗組36人（94.74%）認為所接受的教學能激發學習興趣，與對照組29人（78.38%）相比，差異有統計學意義（P＜0.05）（見表3）。

在疾病診斷方面，可知犬皰疹病毒多發于幼犬，并且同窩犬發病率較高，專門進行犬繁殖飼養的犬舍應掌握疾病臨床癥狀，如體溫偏低，在37℃左右，出現流涕、呼吸困難、腹疼等癥狀，發病1～2d內死亡。從病理剖檢來看，病死犬的腎臟、肺臟將發生明顯病變，分散出現較多出血點和壞死灶。在把握疾病臨床癥狀和病理變化的情況下，可以做出初步診斷，然后通過熒光抗體試驗或病毒學鑒定進行確診。

在疾病治療方面，可知感染犬皰疹病毒具有發病快、致死率高的特點，需要立即治療，交替使用廣譜抗生素預防繼發感染，并混合注射維生素等藥物促進血凝，增加毛細血管致密度，減少血液滲出，幫助幼犬獲得更強抗病能力。感染疾病后發生多系統癥狀，幼犬即便幸存也將出現多器官發生不可逆損傷的問題，缺乏治療價值。考慮到同窩幼犬感染概率較高，需要加強疾病防控。而在缺少有效疫苗的情況下，可以利用患病康復犬血清提供中和抗體，有效預防疾病發生。此外，應做好隔離、消毒等工作，病死犬應深埋或燒毀，防止疾病傳播，達到降低疾病發生風險的目標。