粵西某市液態奶中壬基酚的污染調查

劉海卿，伍尚森，程仕群

廣東產品質量監督檢驗研究院，廣東佛山 528300

0 引言

我國近年來工業發展迅速，隨著工業“三廢”排放加劇，污染物會對奶牛養殖場周圍的土壤、空氣、水源造成污染。2021年10月國家生態環境部發布了《新污染物治理行動方案（征求意見稿）》，壬基酚作為高危污染物，被禁止用于農藥助劑。壬基酚屬于酚類外源性內分泌干擾物之一，是商業第二大使用量的非離子表面活性劑——烷基酚聚乙酰醚的副產物[1]。壬基酚的存在與人類活動密切相關，其高疏水的特性使其在高有機物的環境中累計存在。壬基酚會破壞腸道屏障和擾亂腸道菌群[2]，李仕旭[3]通過動物試驗和細胞試驗，發現壬基酚可以通過核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3通路導致胃黏膜發生炎癥反應。

《2020年中國奶業質量報告》顯示，2019年全國乳制品產量同比增長5.6%，液態奶消費量呈逐年增長趨勢，因此，開展市售液態奶中壬基酚污染調查分析具有重要的意義。本研究在粵西某市采集了共計100 種市售液態奶樣本，根據殺菌方式歸類，分為巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳兩類，使用液相色譜串聯質譜法測定了樣品中的壬基酚含量，以了解不同地區生產的液態奶中壬基酚含量情況和全國的總體水平，評價其安全性，為相關部門和消費者提供參考。

1 試驗方法

1.1 樣品采集

2021年上半年在粵西某市的各行政區采集滅菌乳及巴氏殺菌乳樣品共100 個，涵蓋利樂枕、屋脊包、百利包、玻璃瓶等不同包裝形態，涉及25 個品牌。

1.2 儀器與試劑

液相色譜串聯質譜儀（TripleQuad4500），美國Sciex公司；高速冷凍離心機，美國Sigma公司；電子分析天平，常熟市金羊砝碼儀器有限公司；超純水機，密理博中國有限公司。

乙腈（色譜純），美國Thermo Fisher Scientific公司；甲醇（色譜純），美國TEDIA公司；壬基酚標準品，國家標準物質研究中心。

1.3 樣品提取與處理

1.3.1 樣品的制備

取適量樣品混合均勻，密封并標明標記，于-20 ℃冰箱冷藏保存。

1.3.2 樣品前處理

準確稱取1 g（精確至0.001 g）樣品于15 mL具塞玻璃試管中，加入0.1 mL同位素內標混合標準工作液和5 mL乙腈，渦旋混勻，超聲提取15 min，8 000 r/min離心5 min，取上層乙腈相；殘留部分再用5 mL乙腈重復提取一次，合并乙腈相，置冰箱-20 ℃冷凍2 h，取出于8 000 r/min離心5 min，取上清液待凈化。

取固相萃取柱，使用前用18 mL甲醇活化，6 mL水平衡。將所得上清液加30 mL水稀釋，充分搖勻后以1～2 mL/min的速度上樣，棄去濾液，用12 mL 60%甲醇水溶液（V/V）淋洗，棄去淋洗液，再用6 mL乙腈洗脫，洗脫液于50 ℃用氮氣吹至近干。用1 mL甲醇溶解殘渣，待測。

1.4 儀器分析條件

1.4.1 液相色譜條件

色譜柱：BEH-C18（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；流速：0.2 mL/min；柱溫：30 ℃；進樣體積：5 μL；流動相：0.05%氯水，甲醇；梯度洗脫條件見表1。

表1 梯度洗脫程序表

1.4.2 質譜分析條件

多反應監測（Multipler Eaction Monitoring，MRM）：電噴霧負離子模式；電噴霧電壓：-4 500 V；離子源溫度：650 ℃；干燥氣流量：11 L/min；氣簾氣壓力：25 psi；霧化氣壓力：25 psi；輔助氣壓力：55 psi。

2 結果與討論

2.1 乳制品中壬基酚檢測結果及包裝形態

對采集的100 份液態奶樣本中壬基酚含量進行檢測，結果如表2所示。在100 份樣本中，有88 份樣本檢出壬基酚，檢出率為88.00%，平均含量為82.43 μg/kg。

表2 市售液態奶中壬基酚檢測結果

對不同類型樣本中壬基酚污染狀況進一步分析，巴氏殺菌乳中壬基酚含量區間為7.4～243 μg/kg，平均值為87.06 μg/kg；UHT滅菌乳中壬基酚含量區間為7.88～262 μg/kg，平均值為77.80 μg/kg。

UHT滅菌乳的包裝形態均為盒裝，巴氏殺菌乳的包裝形態較多，涵蓋瓶、杯、袋等多個品種，巴氏殺菌乳各類包裝形態的數量見表3，有部分樣本在包裝上注明了包裝材料的品牌，包括利樂、SIG、EVERPACK。

表3 市售巴氏殺菌乳包裝形態統計

2.2 巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳中壬基酚含量分布狀況

對不同類型樣本中壬基酚污染狀況進行進一步分析，UHT滅菌乳樣本中壬基酚檢出率和含量均高于巴氏殺菌乳。對其分布狀況進行分析，不同種類的樣品測定含量分布區間見圖1。結果多集中在檢出限7.4～50.0 μg/kg之間，隨著檢出值增大，檢出樣本呈遞減趨勢。

圖1 巴氏殺菌乳和UHT滅菌乳中壬基酚污染情況

2.3 不同人群對壬基酚的膳食暴露評估

按照世界衛生組織（WHO）推薦的風險評估方法原則進行壬基酚膳食暴露評估。暴露評估所用的不同人群的食物消費量數據和年齡、性別、體質量等數據來自2002年中國居民營養與健康狀況調查數據庫[4，5]。將總體目標人群按照年齡分為10組，并按照性別劃分為20 個性別年齡組。其中，液態奶消費數據來自于我國最近一次居民營養與健康狀況監測（2010—2013年）。對于每一性別年齡組，按照公式E=CT/W進行暴露評估研究，C代表組人群對液態奶的平均攝入量，T代表液態奶中壬基酚的平均含量，W代表該組人群的平均體質量，E代表該組人群通過液態奶對壬基酚的總體平均攝入量。

如表4所示，不同性別年齡組中，31～45歲男性消費人群通過液態奶對壬基酚的攝入量最低，2～4歲男性消費通過液態奶對壬基酚的攝入量最高，一般人群對壬基酚的平均攝入量為0.08 μg/kg·d，消費人群對壬基酚的平均攝入量為0.34μg/kg·d。總體分析原因為嬰幼兒對液態奶等乳制品的消費量相對較高，同時體重遠低于成年人和老年人。目前，壬基酚的毒性資料還不完全，僅丹麥環境保護局提出了壬基酚的每日耐受攝入量TDI值（5 μg/kg·bw），本次研究的壬基酚的平均攝入量數據遠低于該TDI值，說明目前通過液態奶途徑攝入的壬基酚量較少，風險較低。

3 結論

本研究樣本的主要來源是粵西某市的市場、攤檔、超市和商場，覆蓋了市民購買液態奶的主要渠道，具有一定代表性，可以大致反映市售液態奶中壬基酚的污染現狀。

檢測結果顯示，液態奶中壬基酚總檢出率為80.00%，巴氏殺菌乳檢出率為100%，UHT滅菌乳檢出率為76.00%。液態奶中壬基酚含量最高達262 μg/kg。被測的兩種市售液態奶樣品中均有壬基酚殘留情況，檢出值集中在7.4～100 μg/kg之間。

鑒于液態奶中壬基酚污染情況普遍，兩類銷售量較高的類型均涉及的情況，建議相關研究者對其他類型的乳制品，如發酵乳、調制乳、乳酪等的污染情況開展調查，以獲更多污染數據，做出更加精確、全面的暴露評估，為風險管理提供可靠的依據。

液態奶中殘留酚類物質的來源以及是否與生產加工流程有關值得進一步研究，提醒有關部門進一步加強和完善管理，建立健全相關的限量標準，確保動物性食品的食用安全。