血清脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2和超氧化物歧化酶在腦小血管病患者輕度認(rèn)知障礙中的臨床價值

滿春露， 楊青松

（新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院附屬商丘市第一人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 商丘 476100）

腦小血管病（cerebral small vessel disease，CSVD）是認(rèn)知障礙相關(guān)疾病[1]，但伴認(rèn)知障礙的CSVD的診斷和分類較為困難。目前，臨床尚無生物標(biāo)志物可用于診斷和評估伴認(rèn)知障礙的CSVD[2]。CSVD患者的認(rèn)知障礙癥狀會逐步加重，早期診斷和有效治療有助于延緩病情進(jìn)展及轉(zhuǎn)歸，因此尋找預(yù)測CSVD認(rèn)知障礙發(fā)生的生物標(biāo)志物具有重要價值。有研究結(jié)果顯示，系統(tǒng)性炎癥介質(zhì)，如超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（lipoprotein-related phospholipase A2，Lp-PLA2）與認(rèn)知障礙有關(guān)[3-5]，但其在CSVD認(rèn)知障礙中的作用機制尚不明確。Lp-PLA2可作為心腦血管疾病中的炎癥標(biāo)志物，反映血管的炎癥程度[6]。CAI等[7]的研究結(jié)果顯示，Lp-PLA2是2型糖尿病患者合并認(rèn)知障礙的危險因素，Lp-PLA2水平越高，發(fā)生認(rèn)知障礙的風(fēng)險越大。SOD是一種催化超氧化物自由基轉(zhuǎn)化為過氧化氫和氧氣的酶，具有很強的抗炎活性[8]。有研究結(jié)果顯示，SOD是精神分裂癥患者疾病早期認(rèn)知障礙的影響因素[9]。SUN等[10]的研究結(jié)果顯示，SOD水平升高與老年人群認(rèn)知障礙發(fā)生風(fēng)險增加有關(guān)。本研究擬通過檢測CSVD患者血清Lp-PLA2和SOD水平，分析其對輕度認(rèn)知障礙（mild cognitive impairment，MCI）的預(yù)測價值，為MCI的預(yù)防和早期治療提供參考。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2018年1月—2021年3月新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院附屬商丘市第一人民醫(yī)院CSVD患者120例。根據(jù)患者入院時的蒙特利爾認(rèn)知評估量表（Montreal Cognitive Assessment，MoCA）評分結(jié)果，將MoCA評分＜26分的患者歸入MCI組[65例，其中男36例、女29例，年齡（61.2±7.1）歲]，MoCA≥26分的患者歸入對照組[55例，其中男34例、女21例，年齡（59.6±6.1）歲]。MoCA評分評分越低，代表認(rèn)知障礙越嚴(yán)重。本研究經(jīng)新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院附屬商丘市第一人民醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）CSVD的診斷符合《中國腦小血管病診治共識》[11]和《腦小血管病相關(guān)認(rèn)知功能障礙中國診療指南（2019）》[12]標(biāo)準(zhǔn)；（2）磁共振成像提示腦白質(zhì)病變、腔隙性腦梗死或腦微出血、血管周圍間隙擴大等，患者伴有認(rèn)知減退、步態(tài)障礙、情緒和行為障礙、膀胱功能障礙等；（3）MCI患者存在1個或多個認(rèn)知功能下降；（4）預(yù)計患者生存時間＞1年。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并惡性腫瘤及肝功能、腎功能不全；（2）合并帕金森病、中毒性腦病、阿爾茨海默病、精神性疾病、腦外傷、腦積水等；（3）不能配合相關(guān)檢查。高血壓的診斷符合《高血壓基層診療指南（2019年）》[13]，糖尿病的診斷符合《中國老年2型糖尿病防治臨床指南（2022年版）》[14]。

1.3 方法

收集患者的一般資料[年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）、吸煙、飲酒和文化程度]、既往病史（高血壓、糖尿病、高脂血癥和冠心病）。采集所有患者入院次日晨起空腹肘靜脈血5 mL，離心分離血清。總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）檢測試劑盒購自安諾倫（北京）生物科技有限公司，檢測儀器為cobas c501全自動生化分析儀（瑞士羅氏公司）。采用免疫熒光干式定量法檢測C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）水平，試劑盒購自日本和光純藥工業(yè)株式會社，檢測儀器為Getein16000全自動熒光免疫定量分析儀（南京基蛋生物科技股份有限公司）。采用羥胺法測定總SOD水平，試劑盒購自上海高創(chuàng)化學(xué)科技有限公司，檢測儀器為Evolution 201/220紫外可見分光光度儀（美國ThermoFisher Scientific公司）。

另采集所有患者入院次日靜脈血3 mL，離心分離血清，-80 ℃保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測Lp-PLA2水平，試劑盒購自英國Abcam公司，最低檢測限為45 pg/mL，線性范圍為0.16～10.00 ng/mL，批間變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）＜10%，批內(nèi)CV＜5%，標(biāo)準(zhǔn)曲線r2值為0.981，檢測儀器為Multiskan SkyHigh全波長酶標(biāo)儀（美國ThermoFisher Scientific公司）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。呈正態(tài)分布的計量資料以±s表示，2個組之間比較采用t檢驗。計數(shù)資料以例或率表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Pearson相關(guān)分析評估Lp-PLA2、SOD與MoCA評分的相關(guān)性。采用多因素Logistic回歸分析評估MCI的危險因素。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評價Lp-PLA2、SOD診斷MCI的價值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MCI組與對照組一般資料比較

MCI組與對照組之間吸煙比例、高血壓比例差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；年齡、性別、BMI、飲酒比例、糖尿病比例、高脂血癥比例、冠心病比例和文化程度差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 MCI組與對照組一般臨床資料比較

2.2 MCI組與對照組各項指標(biāo)檢測結(jié)果比較

MCI組與對照組之間CRP、Lp-PLA2、SOD和MoCA評分差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；TC、HDL-C、LDL-C和TG差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 MCI組與對照組各項指標(biāo)檢測結(jié)果比較

2.3 MCI的危險因素分析

多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，Lp-PLA2是MCI的危險因素[比值比（odds ratio，OR）=3.241，95%可信區(qū)間（confidence interval，CI）為2.014～5.362]，SOD是MCI的保護(hù)性因素（OR=0.652，95%CI為0.407～0.964）。見表3。

表3 MCI危險因素分析結(jié)果

2.4 MCI組Lp-PLA2、SOD與MoCA評分的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，Lp-PLA2與MoCA評分呈負(fù)相關(guān)（r=-0.535，P=0.017），SOD與MoCA評分呈正相關(guān)（r=0.684，P=0.008）。

2.5 Lp-PLA2和SOD單項及聯(lián)合檢測診斷MCI的效能

采用Logistic回歸分析得出Lp-PLA2和SOD的聯(lián)合檢測方程為Logit（P）=-16.215+2.325×Lp-PLA2-0.762×SOD。Lp-PLA2、SOD單項檢測和聯(lián)合檢測診斷MCI的曲線下面積（area under curve，AUC）（95%CI）分別為0.813（0.741～0.796）、0.738（0.712～0.784）、0.903（0.914～0.968），最佳臨界值分別為145.3 mg/L、136.2 kU/L、0.722，敏感性分別為77.6%、75.6%、90.7%，特異性分別為76.4%、64.1%、84.5%。Lp-PLA2和SOD聯(lián)合檢測診斷MCI的效能優(yōu)于單項檢測（Z=3.758，P=0.015；Z=4.593，P=0.006）。見圖1。

圖1 Lp-PLA2和SOD單項及聯(lián)合檢測診斷MCI的ROC曲線

3 討論

炎癥在腦缺血的發(fā)病機制中起著至關(guān)重要的作用，血漿Lp-PLA2和SOD是缺血性腦卒中腦血管炎癥的特異性指標(biāo)[4]。Lp-PLA2是公認(rèn)的評估系統(tǒng)性血管、神經(jīng)炎癥及心腦血管疾病發(fā)生風(fēng)險的標(biāo)志物，與缺血性卒中和血管性癡呆密切相關(guān)[15]。在缺血性CSVD早期，血漿Lp-PLA2水平會發(fā)生改變[16]。有研究結(jié)果顯示，短暫性腦缺血發(fā)作和卒中急性期患者血漿Lp-PLA2水平升高，說明Lp-PLA2與腦缺血和卒中的發(fā)生有關(guān)[17-18]。本研究結(jié)果顯示，MCI組Lp-PLA2水平高于對照組（P＜0.05）；多因素Logisitc回歸分析結(jié)果顯示，Lp-PLA2是MCI的危險因素（OR=3.241，95%CI為2.014～5.362），且與MoCA評分呈負(fù)相關(guān)（r=-0.535，P=0.017），提示Lp-PLA2與認(rèn)知障礙的發(fā)生及嚴(yán)重程度有關(guān)。分析原因，可能與Lp-PLA2參與炎癥反應(yīng)的重要過程有關(guān)，Lp-PLA2可促進(jìn)單核細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榫奘杉?xì)胞，再轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞，進(jìn)而損傷血管內(nèi)皮，促進(jìn)粥樣斑塊形成，導(dǎo)致動脈粥樣硬化，加速腦血管的損傷[19]。然而，ZHU等[4]的研究結(jié)果顯示，發(fā)生認(rèn)知障礙的CSVD患者Lp-PLA2水平降低，是血管性認(rèn)知障礙的保護(hù)性因素。造成此差異的原因可能是研究設(shè)計、受試者、數(shù)據(jù)收集方式及檢測方法有所不同。ZHU等[4]檢測的Lp-PLA2是與高密度脂蛋白相關(guān)的Lp-PLA2，這種Lp-PLA2是Lp-PLA2中的一部分，已有研究證實其對心血管有保護(hù)作用[20]。

本研究結(jié)果顯示，MCI組SOD水平低于對照組（P＜0.05），推測SOD水平降低可能會促進(jìn)CSVD患者發(fā)生認(rèn)知障礙，多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，SOD是MCI的保護(hù)性因素（OR=0.652，95%CI為0.407～0.964），且與MoCA評分呈正相關(guān)（r=0.684，P=0.008）。MCI患者SOD水平下降的程度與認(rèn)知障礙的嚴(yán)重程度有關(guān)，提示發(fā)生認(rèn)知障礙的患者可能存在抗氧化防御機制的缺陷。MCI患者由于無法去除循環(huán)中的超氧陰離子，因此會增加由活性氧和神經(jīng)炎癥引起的小血管損傷，提示血漿SOD水平較低與血管損傷增加有關(guān)[21]。

本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示，Lp-PLA2、SOD單項檢測和聯(lián)合檢測診斷MCI的AUC分別為0.813、0.738、0.903，最佳臨界值分別為145.3 mg/L、136.2 kU/L、0.722，敏感性分別為77.6%、75.6%、90.7%，特異性分別為76.4%、64.1%、84.5%；Lp-PLA2和SOD聯(lián)合檢測診斷MCI的效能優(yōu)于單項檢測（P＜0.05）。提示Lp-PLA2和SOD或可作為CSVD患者M(jìn)CI的輔助診斷指標(biāo)。

綜上所述，CSVD患者發(fā)生MCI時，Lp-PLA2和SOD均會發(fā)生變化，這2項指標(biāo)是MCI發(fā)生的影響因素。Lp-PLA2和SOD或可作為CSVD患者M(jìn)CI的輔助診斷指標(biāo)。