非洲豬瘟日常和緊急調(diào)查技術(shù)

孫 亮，張金玉，馬曉媛，王 晉，計(jì) 越，吳逝寒，王喜偉

1.吉林省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林長(zhǎng)春 130062；2.吉林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春 130062；3.柳河縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，通化柳河 134300

1 組織與要求

1.1 由畜牧獸醫(yī)主管部門(mén)組織對(duì)養(yǎng)殖、交易、屠宰、無(wú)害化處理和巡查環(huán)節(jié)開(kāi)展非洲豬瘟流行病學(xué)調(diào)查；由林草部門(mén)組織對(duì)野豬發(fā)病、死亡情況開(kāi)展非洲豬瘟流行病學(xué)調(diào)查。

1.2 報(bào)告或發(fā)生疑似疫情時(shí)，由動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)選派2名以上畜牧獸醫(yī)專業(yè)中級(jí)以上技術(shù)職稱人員或獸醫(yī)流行病學(xué)調(diào)查人員，攜帶采樣器械，趕赴現(xiàn)場(chǎng)開(kāi)展疑似疫情排查。

1.3 確診疫情時(shí)，由疫情所在地畜牧獸醫(yī)主管部門(mén)組織當(dāng)?shù)孬F醫(yī)人員在省級(jí)和國(guó)家級(jí)專家的指導(dǎo)下，對(duì)有流行病學(xué)關(guān)聯(lián)的人員、車輛、可疑污染物、疑似感染生豬等風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)開(kāi)展初步調(diào)查、追蹤調(diào)查和溯源調(diào)查。

1.4 排查發(fā)現(xiàn)生豬不明原因死亡或出現(xiàn)疑似非洲豬瘟臨床癥狀時(shí)，要立即采取限制移動(dòng)控制措施，并逐級(jí)報(bào)告。

1.5 參與日常排查與緊急調(diào)查的人員符合下列要求。

1.5.1 一個(gè)潛伏期內(nèi)沒(méi)有接觸過(guò)非洲豬瘟病死豬及其污染物。

1.5.2 所駕乘車輛沒(méi)有去過(guò)非洲豬瘟疫區(qū)。

1.5.3 參照DB11/T 456的規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)，避免人為造成病原擴(kuò)散。

2 日常排查方法與內(nèi)容

2.1 養(yǎng)殖環(huán)節(jié)

2.1.1 采取現(xiàn)場(chǎng)觀察、電話詢問(wèn)、微信視頻或查看監(jiān)控視頻的方式，逐場(chǎng)、逐戶了解生豬臨床健康狀況。

2.1.2 通過(guò)詢問(wèn)生豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）和查閱記錄的方式，獲取生豬的銷售、補(bǔ)欄來(lái)源、發(fā)病、診療、死亡、散養(yǎng)豬與野豬接觸情況，以及場(chǎng)舍消毒情況等信息，分析非洲豬瘟發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

2.1.3 查疫苗的采購(gòu)記錄或領(lǐng)取記錄，以及生豬的免疫記錄、發(fā)病記錄和死亡記錄，了解生豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）在規(guī)范免疫豬瘟和高致病性豬藍(lán)耳病的情況下，生豬發(fā)病率和死亡率是否超出正常范圍。

2.1.4 詢問(wèn)生豬養(yǎng)殖場(chǎng)主或查看場(chǎng)區(qū)內(nèi)防鼠（蚊、蠅、蜱）設(shè)施設(shè)備配備情況，了解防鼠和蟲(chóng)媒控制措施實(shí)施情況，分析由媒介傳播非洲豬瘟病毒的風(fēng)險(xiǎn)。

2.1.5 以明察暗訪的形式，了解生豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）飼喂餐廚剩余物情況。發(fā)現(xiàn)飼喂餐廚剩余物的，應(yīng)立即對(duì)其開(kāi)展溯源調(diào)查（見(jiàn)3.2.3）。

2.1.6 無(wú)菌采集生豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）生豬的眼鼻拭子、肛拭子和豬糞環(huán)境樣品，飼喂餐廚剩余物生豬的抗凝全血和泔水桶內(nèi)殘留物進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，評(píng)估生豬感染和環(huán)境帶毒情況。

2.2 交易環(huán)節(jié)

2.2.1 通過(guò)查證驗(yàn)物的方式，獲取交易生豬來(lái)源信息，排除非洲豬瘟疫區(qū)生豬交易帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)。

2.2.2 觀察入場(chǎng)交易生豬是否有疑似非洲豬瘟臨床癥狀或不明原因死亡，發(fā)現(xiàn)異常的，立即采取控制措施。

2.2.3 詢問(wèn)交易市場(chǎng)負(fù)責(zé)人、生豬銷售和購(gòu)買(mǎi)人員，并查看消毒記錄，全面了解交易市場(chǎng)消毒情況和生豬運(yùn)輸車輛消毒情況，以及一個(gè)潛伏期內(nèi)的生豬運(yùn)輸車輛行動(dòng)軌跡，分析交易風(fēng)險(xiǎn)和車輛可能帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)。

2.2.4 無(wú)菌采集交易生豬眼鼻拭子和肛拭子，或抗凝全血，以及生豬運(yùn)輸車輛環(huán)境樣品進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，評(píng)估生豬和車輛帶毒情況。

2.3 屠宰環(huán)節(jié)

2.3.1 核查入場(chǎng)生豬檢疫票據(jù)，獲取屠宰生豬來(lái)源信息，排除疫區(qū)生豬帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)。

2.3.2 觀察宰前待宰生豬臨床癥狀，有無(wú)疑似非洲豬瘟臨床表現(xiàn)。

2.3.4 觀察同步檢疫過(guò)程中生豬臟器變化，有無(wú)疑似非洲豬瘟病理變化。

2.3.5 查看入場(chǎng)生豬運(yùn)輸車輛來(lái)源記錄信息、屠宰場(chǎng)內(nèi)外部消毒記錄，評(píng)估發(fā)生和傳入風(fēng)險(xiǎn)。

2.3.6 無(wú)菌采集運(yùn)輸車輛、待宰圈、進(jìn)豬通道和屠宰車間環(huán)境樣品，待宰生豬眼鼻拭子和肛拭子，或抗凝全血樣品進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)估車輛、環(huán)境污染情況和生豬帶毒情況。

2.4 無(wú)害化處理環(huán)節(jié)

2.4.1 查看無(wú)害化處理記錄或無(wú)害化處理補(bǔ)貼記錄，了解無(wú)害化處理場(chǎng)點(diǎn)病死豬數(shù)量變化情況。發(fā)現(xiàn)異常增多的，由當(dāng)?shù)匦竽莲F醫(yī)主管部門(mén)組織開(kāi)展調(diào)查，查清原因。

2.4.2 巡查河道兩岸、低洼水泡地帶，發(fā)現(xiàn)隨意拋棄的病死豬，由當(dāng)?shù)匦竽莲F醫(yī)主管部門(mén)組織開(kāi)展調(diào)查，查清死豬來(lái)源、所在地及周邊區(qū)域豬病流行情況。

2.4.3 無(wú)菌采集無(wú)害化處理場(chǎng)點(diǎn)病死豬的脾臟、淋巴結(jié)等組織樣品進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，分析病死豬是否死于非洲豬瘟病毒感染。

2.4.4 無(wú)菌采集非洲豬瘟病死豬掩埋點(diǎn)頂部及四角覆土樣品，如周圍有水源和蜱類吸血昆蟲(chóng)，同步采集水樣和吸血昆蟲(chóng)樣品進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，評(píng)估非洲豬瘟病毒擴(kuò)散、水源污染和吸血昆蟲(chóng)帶毒情況。2.5 巡查環(huán)節(jié)

2.5.1 通過(guò)走訪來(lái)掌握野豬出沒(méi)區(qū)域周邊生豬的具體養(yǎng)殖分布、養(yǎng)殖數(shù)量、發(fā)病和死亡情況。

2.5.2 向林草部門(mén)了解野豬分布、遷徙和死亡情況，以及鈍緣軟蜱等蜱類蟲(chóng)媒存在與分布情況。

2.5.3 詢問(wèn)林草部門(mén)野豬毀壞基本農(nóng)田補(bǔ)助情況或林區(qū)周邊村民、養(yǎng)殖人員，了解野豬下山覓食情況、與家豬接觸情況。

2.5.4 采集下山野豬遺留在農(nóng)田或村落周邊的糞便，以及周邊生豬的眼鼻拭子和肛拭子，或抗凝全血進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，了解野豬帶毒情況和生豬感染情況。

2.6 處置

任何單位和個(gè)人在養(yǎng)殖、交易、屠宰、無(wú)害化處理和巡查環(huán)節(jié)排查過(guò)程發(fā)現(xiàn)生豬、野豬異常死亡或出現(xiàn)疑似非洲豬瘟癥狀的，應(yīng)立即報(bào)告，按農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《非洲豬瘟疫情應(yīng)急實(shí)施方案（第五版）》的規(guī)定處置。

3 緊急調(diào)查方法與內(nèi)容

3.1 疑似疫情

3.1.1 詢問(wèn)生豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）疑似感染豬種類、感染數(shù)量、存欄量、病死前異常表現(xiàn)、發(fā)病過(guò)程、補(bǔ)欄、人工授精、調(diào)入調(diào)出等情況。

3.1.2 核查記錄信息，了解豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病免疫情況和病豬治療情況。

3.1.3 現(xiàn)場(chǎng)查看疑似感染場(chǎng)（戶）場(chǎng)區(qū)布局、飼喂泔水情況，以及周邊養(yǎng)殖環(huán)境，分析感染來(lái)源的因素。

3.1.4 觀察病豬和死亡豬臨床變化，與GB/T 18648中描述的臨床指標(biāo)相比較，是否符合非洲豬瘟臨床癥狀標(biāo)準(zhǔn)。

3.1.5 在排除炭疽情況下，可解剖觀察脾臟、腎臟、頜下淋巴結(jié)、腹腔淋巴結(jié)等臟器病理變化，與GB/T 18648中描述的病理指標(biāo)相比較，是否符合非洲豬瘟剖檢病變標(biāo)準(zhǔn)。

3.1.6 無(wú)菌采集現(xiàn)存活豬優(yōu)先采集發(fā)病豬抗凝全血，以及死亡豬脾臟、扁桃體、淋巴結(jié)、腎臟、骨髓等組織樣品進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)。

3.2 確診疫情

3.2.1 初步調(diào)查

3.2.1.1 向發(fā)病場(chǎng)（戶）所在鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)工作人員獲取發(fā)病場(chǎng)（戶）具體地點(diǎn)信息，并利用具備指南針功能的手機(jī)等設(shè)備，獲取發(fā)病場(chǎng)（戶）經(jīng)緯度等地理信息。

3.2.1.2 向疫點(diǎn)生豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）負(fù)責(zé)人或飼養(yǎng)管理人員了解最先發(fā)病生豬位置，不同圈舍發(fā)病順序，或者通過(guò)排查疫區(qū)和受威脅內(nèi)可疑病例，結(jié)合非洲豬瘟的潛伏期，推算首發(fā)病例發(fā)生的時(shí)間和地點(diǎn)，以及發(fā)病過(guò)程。

3.2.1.3 詢問(wèn)當(dāng)?shù)卣畽C(jī)關(guān)人員、畜牧獸醫(yī)部門(mén)人員、林草部門(mén)人員，并查看疫情所在地地圖，了解當(dāng)?shù)厣酱?、河流、公路、鐵路等地形地貌和交通干線，養(yǎng)殖分布，野豬分布，分析疫情潛在擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)，為疫區(qū)和受威脅區(qū)劃定做準(zhǔn)備。

3.2.2 追蹤調(diào)查

3.2.2.1 對(duì)首發(fā)病例發(fā)生前21天內(nèi)，以及疫情發(fā)生后采取控制措施前這一時(shí)間段，從疫點(diǎn)調(diào)出的生豬及相關(guān)產(chǎn)品、運(yùn)輸工具、密切接觸人員去向、生產(chǎn)用具、設(shè)備、飼料外賣或借出、糞便外運(yùn)或外賣、媒介動(dòng)物（犬、貓、鼠、吸血昆蟲(chóng)等）進(jìn)行追蹤調(diào)查，分析疫情是否擴(kuò)散。

3.2.2.2 對(duì)疫點(diǎn)邊緣外延3 km的疫區(qū)和疫區(qū)邊緣外延10 km的受威脅區(qū)開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)排查。疫點(diǎn)周邊有野豬出沒(méi)的，受威脅區(qū)的排查范圍擴(kuò)大到50 km。

3.2.2.3 了解疫區(qū)和受威脅區(qū)內(nèi)屠宰場(chǎng)分布及屠宰后生鮮肉品銷售去向，交易市場(chǎng)生豬臨床狀況及交易生豬去向。

3.2.2.4 臨床監(jiān)視疫區(qū)和受威脅區(qū)內(nèi)生豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）生豬臨床表現(xiàn)，掌握疫情動(dòng)態(tài)。

3.2.2.5 對(duì)與疫點(diǎn)有流行病學(xué)關(guān)聯(lián)的生豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）、屠宰場(chǎng)、無(wú)害化處理場(chǎng)、交易市場(chǎng)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)無(wú)菌采集樣品進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，評(píng)估擴(kuò)散程度。

3.2.3 溯源調(diào)查

3.2.3.1 對(duì)首發(fā)病例出現(xiàn)前21天內(nèi)，引入疫點(diǎn)的豬只（包括仔豬和種豬）、生豬產(chǎn)品（包括冷凍精液）、獸醫(yī)制品、安裝設(shè)備、泔水、含有豬血或蛋白的飼料、運(yùn)輸工具、人員往來(lái)情況等進(jìn)行溯源調(diào)查，分析疫情可能來(lái)源途徑。

3.2.3.2 詢問(wèn)當(dāng)?shù)匦竽莲F醫(yī)部門(mén)了解縣域特別是疫點(diǎn)所在地生豬養(yǎng)殖及規(guī)模化程度和分布情況，屠宰場(chǎng)點(diǎn)分布情況，結(jié)合產(chǎn)地檢疫和屠宰檢疫信息，進(jìn)一步分析疫點(diǎn)發(fā)病來(lái)源因素。

3.2.3.3 了解一個(gè)潛伏期以來(lái)省內(nèi)肉品供應(yīng)、省外肉品調(diào)入，以及國(guó)外肉品調(diào)入本省情況，特別是疫情所在地肉品調(diào)入情況。

3.2.3.4 對(duì)飼喂泔水引發(fā)疫情的，要調(diào)查泔水來(lái)源，泔水供應(yīng)單位肉品來(lái)源，運(yùn)輸泔水車輛軌跡。

3.2.3.5 由林草部門(mén)對(duì)疫情所在地野豬發(fā)病、死亡情況開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)排查，發(fā)現(xiàn)死亡的立即采取措施，并按規(guī)定采集病原學(xué)樣品送檢。

3.2.3.6 對(duì)有流行病學(xué)調(diào)查關(guān)聯(lián)的生豬養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）、屠宰場(chǎng)、交易市場(chǎng)、運(yùn)輸工具、風(fēng)險(xiǎn)物品等采樣病原學(xué)樣品進(jìn)行檢測(cè)，分析疫情來(lái)源。