色譜-質譜聯用技術在食品檢測中的應用

宋菁景，劉 雪，林小暉

（濟南市食品藥品檢驗檢測中心，山東濟南 250000）

質譜法（Mass Spectrometry，MS）是運用不同的離子化技術將待測化合物轉化為氣態離子，再按質荷比對離子進行分析檢測，從而確定物質成分和結構的一種方法[1]。質譜法具有靈敏度高、響應時間短、分析速度快、信息量大和可測定分子式等特點，在分析測試領域中備受矚目。

1912年，英國學者J. J. Thomson研制出第一臺質譜儀，并由此創立質譜分析法。質譜儀用于同位素及其相對豐度的分析測定。20世紀60年代出現的氣相色譜-質譜聯用（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）儀，使質譜儀的應用領域發生了巨大的變化，成為有機物分析的重要儀器。20世紀80年代后期，軟離子化技術的相繼問世，液相色譜-質譜聯用（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry，LC-MS）儀研制成功，隨著串聯質譜儀的不斷改進，質譜法的應用拓展到分析強極性、難揮發、熱不穩定樣品和生物大分子的研究，迅速成為現代分析化學最前沿的領域之一。

1 色譜-質譜聯用技術概論

色譜-質譜聯用技術將色譜技術和質譜技術有效地結合起來，是目前分析復雜混合物的重要手段。在色譜-質譜聯用系統中，色譜儀相當于質譜儀的進樣和分離系統，質譜儀相當于色譜儀的檢測器，在食品檢測中，常用技術有氣相色譜-質譜聯用（GCMS）、液相色譜-質譜聯用（LC-MS）、離子色譜-質譜聯用（Ion Chromatography-Mass Spectrometry，IC-MS）等。

1.1 氣相色譜-質譜聯用法（GC-MS）

GC-MS法利用GC系統的氣相色譜柱對未知樣品進行分離，分離后的氣態分子進入MS系統，被離子源轟擊成碎片離子，運用質量分析器根據質荷對帶電荷的碎片進行分離、檢測和記錄，完成樣品的定性、定量分析[2]。GC-MS法常用于小分子的分離和檢測。

GC-MS法中MS系統常用的離子源主要有電子轟擊源（EI源）和化學電離源（CI源）。其中，EI源可以通過分子、離子來確定化合物的分子量，再通過碎片離子推出化合物結構，這種方式適用于正離子的檢測，但不適用于負離子檢測。相比而言，CI源的碎片離子峰少，靈活度強，圖譜相對簡單，常作為負離子的主要檢測方法。常用的質量分析器為四極桿分析器，可檢測的分子質量上限通常是4 000 Da，分辨率約為103。GC-MS法常用來檢測食品中的農藥殘留、獸藥殘留[3]、食品添加劑[4]和塑化劑殘留[5]等。

1.2 液相色譜-質譜聯用法（LC-MS）

LC-MS法是以LC系統的液相色譜柱為分離手段、質譜為檢測手段的分離分析方法。隨著大氣壓離子化（Atmospheric Pressure Ionization，API）和基質輔助激光解吸離子化（Matrix Assisted Laser Desorption Ionization，MALDI）技術的出現，LC-MS技術得到了快速的發展。

MS系統的離子源包括電噴霧離子源（Electron Spray Ionization，ESI）、大氣壓化離子源（Atmospheric Pressure Chemical Ionization，APCI）和大氣壓光離子化 源（Atmospheric Pressure Photo-Ionization，APPI），它們可以使試樣組分的離子化在大氣壓條件下完成，離子化率高。目前，幾乎所有的LC-MS聯用儀都配備了ESI源和APCI源。LC-MS法中的MS系統，根據質量范圍和分辨率，可分為低分辨質譜技術和高分辨質譜技術。低分辨質譜技術采用三重四極桿分析器，高分辨質譜技術多采用磁質譜、飛行時間質譜、傅里葉變換離子回旋共振質譜和靜電場軌道阱質譜等分析器。

LC-MS法可以分析強極性、難揮發、熱不穩定性的化合物，具有分析范圍廣、分離能力強、定性分析結果可靠、檢測限低、靈敏度高和分析時間快等優點[6]。LC-MS法常用來檢測食品中的藥物殘留、持久性有機污染物、生物毒素以及保健食品中的維生素、類胡蘿卜素和活性多糖等[7-8]。

1.3 離子色譜-質譜聯用法（IC-MS）

離子色譜法也屬于液相色譜領域，但不同于常規液相色譜的是，離子色譜配有抑制器，可以有效降低背景，減小儀器噪音，提高儀器檢測的靈敏度[9]。離子色譜-質譜聯用技術可以有效結合兩者的優勢，實現多種成分的痕量檢測。與LC-MS法類似，其離子源多采用ESI源和APCI源，質量分析多采用三重四極桿分析器。IC-MS法常用來分析檢測食品中的氯酸鹽、溴酸鹽[10-11]、單糖、小分子寡糖[12]和有機酸[13]等。

2 色譜-質譜聯用技術在食品檢測中的應用

2.1 GC-MS法在食品檢測中的應用

2.1.1 GC-MS法檢測食品中的農藥殘留

食品中的農藥殘留主要有有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯等。多項食品安全國家標準中采用GC-MS法對食品中的農藥殘留進行檢測，如《食品安全國家標準 食用菌中503種農藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質譜法》（GB 23200.15—2016）[14]、《食品安全國家標準糧谷中475種農藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質譜法》 （GB 23200.9—2016）[15]等。

多名學者對該方法也展開了研究。馬桂娟等[16]將枸杞籽油用乙腈提取，以QuEChERS方法為前處理技術，在質譜多反應監測（Multiple Reaction Monitoring，MRM）模式下，進行基質外標法定量，建立了氣相色譜三重四極桿串聯質譜法（GC-MS/MS） 同時測定枸杞籽油中28種農藥殘留的方法，能夠滿足枸杞籽油中28種農藥殘留的定性和定量分析。楊衛花等[17]用石墨化碳黑小柱和氟羅里硅柱雙柱結合凈化、氮吹濃縮，然后用氣相色譜-質譜聯用 （GC-MS）檢測大米中農藥馬拉硫磷殘留，該方法靈敏度高且可靠。

2.1.2 GC-MS法檢測食品中的獸藥殘留

薛良辰等[3]利用QuEChERS對樣品進行前處理，通過在線凝膠滲透色譜-氣相色譜-質譜聯用法對魚肉中的9種羥基類獸藥殘留進行測定，經驗證，該方法具有靈敏度高、準確可靠等優點，可對魚肉中9種羥基類獸藥進行定性、定量分析。

2.1.3 GC-MS法檢測食品中的添加劑

湛嘉等[4]建立了一種簡便快速的氣相色譜-質譜（GC/MS）聯用檢測方法，通過GC/MS的選擇離子監視模式（Selected Ion Monitoring，SIM）檢測，可以實現復雜基質中的多種食品添加劑的檢出。

2.1.4 GC-MS法檢測食品中的塑化劑

張國民等[5]應用氣相色譜-質譜法測定了食品中17種危害人體健康的污染物——鄰苯二甲酸酯類（Phthalate Acid Esters，PAEs）塑化劑的含量。選擇了白酒等12種不同類別的食物作為分析樣品，色譜系統用非極性色譜柱（DB-5MS）、程序升溫控制對樣品進行分離；質譜系統采用電子轟擊離子源（EI源）和選擇離子監測模式（SIM），對塑化劑進行定性和定量分析，并推測其中測出的PAEs可能由生產過程中或之后的運輸、包裝等過程中接觸了塑料制品所致。

2.2 LC-MS法在食品檢測中的應用

2.2.1 LC-MS法檢測食品中的藥物殘留

多項食品安全國家標準中采用LC-MS法對食品中的農藥殘留進行檢測[18]。例如，《食品安全國家標準 茶葉中448種農藥及相關化學品殘留量的測定 液相色譜-質譜法》（GB 23200.14—2016）[19]、《食品安全國家標準 果蔬汁和果酒中512種農藥及相關化學品殘留量的測定 液相色譜-質譜法》 （GB 23200.14—2016）[20]等。

楊昌彪等[21]建立了液相色譜-串聯質譜聯用（LC-MS/MS）分析方法，對番茄中18種農藥殘留進行快速檢測，樣品經QuEChERS方法凈化后，用LC-MS/MS進行檢測。該方法對濃度為0.006～ 0.100 μg/mL的18種農藥殘留均呈現出良好的線性關系，適合批量樣品的檢測分析。

2.2.2 LC-MS法檢測食品中的有機污染物

蔡冬梅等[22]基于超高效液相色譜-高分辨質譜結合同位素內標法開發了蜂毒衍生品中蜂毒肽的準確定量分析方法，樣本經胰蛋白酶酶切后，過固相萃取小柱凈化，然后經C18色譜分離，在ESI正離子模式下采用平行反應檢測（Parallel Reaction Monitoring，PRM）進行檢測分析。該方法可準確定量蜂毒衍生產品中蜂毒肽的含量，保證了產品功效，具有重要的現實意義。

2.2.3 LC-MS法檢測食品中的生物毒素

邢曉楠[6]篩選出分離最佳色譜條件，并且在MRM模式下進行離子檢測，建立起4種AIPs信號分子的液相色譜-串聯質譜（LC-MS/MS）檢測方法，并研究金黃色葡萄球菌AIPs分子信號及該分子對SEA和生物膜形成作用機理，可以快速準確地對AIPs分子定性定量，明確環境會影響AIPs分子的產生。

2.2.4 LC-MS法檢測保健食品中的成分

全文琴等[23]建立起高效液相色譜/電噴霧質譜聯用分析方法，利用C8色譜柱對樣品進行分離，在電噴霧負離子模式下，質譜對m/z301、m/z327和m/z269 進行選擇離子監測。該方法可快速、簡單、準確地測定魚油樣品中EPA和DHA兩種ω-3PUFA含量。

2.3 IC-MS法在食品檢測中的應用

2.3.1 IC-MS法檢測食品中的氯酸鹽和溴酸鹽

封麗娟等[10]用Dionex AS16離子交換色譜柱、梯度洗脫分離化合物，采用電噴霧離子源負離子掃描（ESI-），在多反應監控（MRM）模式下測定面制品中溴酸鹽、氯酸鹽和高氯酸鹽。

高峰等[11]選用高容量、強親水性的陰離子交換柱IonPac AS19進行分離，以KOH溶液為淋洗液，采用梯度淋洗，淋洗液經過抑制器抑制后直接進入質譜（ESI-MS），負離子模式進行檢測，建立一種測定碳酸飲料中亞氯酸鹽、氯酸鹽和高氯酸鹽的離子色譜-質譜聯用方法，適用于碳酸飲料中亞氯酸鹽、氯酸鹽和高氯酸鹽的同時測定。

2.3.2 IC-MS法檢測食品中的單糖、小分子寡糖

張濤等[12]將樣品粉碎后加入去離子水超聲提取，經Carbopac PA20色譜柱分離，以EGC在線產生KOH為淋洗液，梯度淋洗，采用柱后補液法（Na+源），串聯質譜技術檢測，建立了咖啡豆中阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、木糖、甘露糖、果糖和核糖的IC-MS分析方法。該方法解決了不同含碳量的糖之間的假陽性問題，可實現咖啡豆中典型單糖和小分子寡糖的同時測定。

2.3.3 IC-MS法檢測食品中的有機酸

熊治渝等[13]利用離子色譜配備自制富集柱和分離柱對有機酸進行在線富集和分離，采用質譜大氣壓化學電離源負離子電離方式（APCI-），在選擇離子監控（SIM）模式下對有機酸進行定性和定量分析，建立了在線富集方式結合離子色譜-質譜（IC-MS）快速分離分析16種有機酸的方法。該方法樣品前處理簡單，分離速度快，有機酸檢測靈敏度高，適用于多種飼料添加劑樣品中有機酸添加劑的檢測。

3 結語

本文綜述了色譜-質譜聯用技術的原理和分類，通過實例分析了該技術在食品檢驗中的應用。這類技術具有分析快速、靈敏度高和定性定量分析的準確性高等優點。食品行業的發展日新月異，對食品質量的監管也提出了更高的要求，食品檢驗部門的檢驗手段應隨之更新、提升。一些新出現的有毒有害化合物大都可充分利用該技術，建立起快速、靈敏、準確和可靠的檢測方法，對其進行有效篩選、定性，并分析其安全限度，為保障人們的飲食安全和生命健康提供有力的技術支撐。